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初期胚分化制御機構の解明に基づくウシガラス化保存胚の発生能改善

研究課題

研究課題/領域番号 21H02336
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
審査区分 小区分42010:動物生産科学関連
研究機関北海道大学

研究代表者

川原 学  北海道大学, 農学研究院, 准教授 (70468700)

研究分担者 柳川 洋二郎  北海道大学, 獣医学研究院, 准教授 (20609656)
唄 花子  北海道大学, 農学研究院, 助教 (60775443)
研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
17,680千円 (直接経費: 13,600千円、間接経費: 4,080千円)
2023年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
2022年度: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2021年度: 9,230千円 (直接経費: 7,100千円、間接経費: 2,130千円)
キーワード初期胚発生 / マウス / ウシ / ガラス化保存 / 細胞分化 / 胚盤胞期胚 / Hippo経路 / Nf2 / Yap1 / 栄養膜細胞 / 初期胚 / 個体発生 / 動物生産
研究開始時の研究の概要

胚盤胞期胚の胎子側および胎盤側(栄養外胚葉)への細胞分化機構を解明することは、生物学的にも動物生産の効率化のためにも不可欠である。しかし、最も解析が進んでいるマウス胚ですら、その全容は解析途上で、実験手段が限られるウシ胚では更に知見に乏しい。本研究では、ウシ胚盤胞期胚の栄養外胚葉細胞における分化維持遺伝子CDX2発現に必要なYAP1タンパク質の局在制御に及ぼす細胞膜/細胞骨格関連タンパク質NF2の役割をマウスおよびウシ胚を用いて明らかしつつ、得られた知見に基づいてウシガラス化胚の発生能力向上を目指す。

研究成果の概要

本研究では、マウスおよびウシにおけるTE細胞分化を決定づけるYAP1細胞内局在の制御に足場タンパク質NF2の局在が重要な役割を果たすことを示すものであり、ガラス化保存手順に定法として行われる高張液への浸漬がYAP1局在を変化させることを明らかにした。これらは、哺乳類胚の分化制御機構の一端を明らかする発生生物学的な意義とともに、ウシ胚の正常な発育に必須なTE細胞の遺伝子発現制御に重要なYAP1の細胞内局在の維持がガラス化処理において傷害を受ける可能性を示している。

研究成果の学術的意義や社会的意義

細胞の極性に伴う細胞分化機構は古くから知られているものの、分子レベルでの理解は進んでいなかった。また正常に分化した初期胚の作製は、主要なウシの繁殖方法の一つである受精卵移植技術の根幹となる発生工学技術でもある。さらに、ウシ生産のために実質的に受精卵移植技術を活用していくためには受精卵の低温下での保存技術の進展が欠かせない。本研究で得られた知見をもとに、哺乳類胚の発生制御における新たな分子機構の解明が進むとともに、ウシ胚改良増殖に不可欠なガラス化保存技術の洗練化につながることが期待される。

報告書

(3件)
  • 2023 研究成果報告書 ( PDF )
  • 2022 実績報告書
  • 2021 実績報告書
  • 研究成果

    (26件)

すべて 2023 2022 2021

すべて 雑誌論文 (14件) (うち国際共著 3件、 査読あり 14件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (11件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Synergistic effect of standardized extract of Asparagus officinalis stem and heat shock on progesterone synthesis with lipid droplets and mitochondrial function in bovine granulosa cells2023

    • 著者名/発表者名
      Ho Khoi Thieu, Balboula Ahmed Zaky, Homma Kohei, Takanari Jun, Bai Hanako, Kawahara Manabu, Thi Kim Nguyen Khang, Takahashi Masashi
    • 雑誌名

      The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology

      巻: 225 ページ: 106181-106181

    • DOI

      10.1016/j.jsbmb.2022.106181

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Identification of menaquinone-4 (vitamin K2) target genes in bovine endometrial epithelial cells in?vitro2023

    • 著者名/発表者名
      Bai Hanako, Kawahara Manabu, Takahashi Masashi
    • 雑誌名

      Theriogenology

      巻: 198 ページ: 183-193

    • DOI

      10.1016/j.theriogenology.2022.12.033

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Generation of viable calves derived from developmentally mature blastocysts produced by on-gel culture2022

    • 著者名/発表者名
      SAITO Shun、AKIZAWA Hiroki、FURUKAWA Eri、YANAGAWA Yojiro、BAI Hanako、TAKAHASHI Masashi、KAWAHARA Manabu
    • 雑誌名

      Journal of Reproduction and Development

      巻: 68 号: 5 ページ: 330-334

    • DOI

      10.1262/jrd.2022-054

    • ISSN
      0916-8818, 1348-4400
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Zona pellucida removal by acid Tyrode’s solution affects pre- and post-implantation development and gene expression in mouse embryos2022

    • 著者名/発表者名
      Fan Weihong、Huang Tengda、Wu Tian、Bai Hanako、Kawahara Manabu、Takahashi Masashi
    • 雑誌名

      Biology of Reproduction

      巻: -

    • DOI

      10.1093/biolre/ioac155

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cattle production by intracytoplasmic sperm injection into oocytes vitrified after ovum pick-up2022

    • 著者名/発表者名
      Kagawa Shinjiro、Hiraizumi Shingo、Bai Hanako、Takahashi Masashi、Kawahara Manabu
    • 雑誌名

      Theriogenology

      巻: 185 ページ: 121-126

    • DOI

      10.1016/j.theriogenology.2022.03.022

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Environmental factors affecting the conception rates of nulliparous and primiparous dairy cattle2022

    • 著者名/発表者名
      Ukita Haruka、Yamazaki Takeshi、Yamaguchi Satoshi、Abe Hayato、Baba Toshimi、Bai Hanako、Takahashi Masashi、Kawahara Manabu
    • 雑誌名

      Journal of Dairy Science

      巻: -

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Requirement for expression of WW domain containing transcription regulator 1 in bovine trophectoderm development2021

    • 著者名/発表者名
      Saito Shun、Yamamura Shota、Kohri Nanami、Bai Hanako、Takahashi Masashi、Kawahara Manabu
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 555 ページ: 140-146

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2021.03.112

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) and machine learning application for early pregnancy detection using bovine vaginal mucosal membrane2021

    • 著者名/発表者名
      Kunii Hiroki, Kubo Tomoaki, Asaoka Natsuki, Balboula Ahmed Z, Hamaguchi Yu, Shimasaki Tomoya, Bai Hanako, Kawahara Manabu, Kobayashi Hisato, Ogawa Hidehiko, Takahashi Masashi
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 569 ページ: 179-186

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2021.07.015

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Heat stress induces oxidative stress and activates the KEAP1-NFE2L2-ARE pathway in bovine endometrial epithelial cells2021

    • 著者名/発表者名
      Murata Hirona, Kunii Hiroki ,Kusama Kazuya, Sakurai Toshihiro, Bai Hanako、Kawahara Manabu、Takahashi Masashi
    • 雑誌名

      Biology of Reproduction

      巻: 105 号: 5 ページ: 1114-1125

    • DOI

      10.1093/biolre/ioab143

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mitochondrial maturation in the trophectoderm and inner cell mass regions of bovine blastocysts2021

    • 著者名/発表者名
      Hayashi Yoshihiro, Saito Shun, Bai Hanako, Takahashi Masashi, Kawahara Manabu
    • 雑誌名

      Theriogenology

      巻: 175 ページ: 69-76

    • DOI

      10.1016/j.theriogenology.2021.08.038

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] The use of a two-step removal protocol and optimized culture conditions improve development and quality of zona free mouse embryos2021

    • 著者名/発表者名
      Fan Weihong, Homma Misato, Xu Renliang, Kunii Hiroki, Bai Hanako, Kawahara Manabu, Kawaguchi Toshikazu, Takahashi Masashi
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 577 ページ: 116-123

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2021.09.013

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] A standardized extract of Asparagus officinalis stem improves HSP70-mediated redox balance and cell functions in bovine cumulus-granulosa cells2021

    • 著者名/発表者名
      Ho Khoi Thieu, Homma Kohei, Takanari Jun, Bai Hanako, Kawahara Manabu, Nguyen Khang Thi Kim, Takahashi Masashi
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 11 号: 1 ページ: 18175-18175

    • DOI

      10.1038/s41598-021-97632-6

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Deciphering two rounds of cell lineage segregations during bovine preimplantation development2021

    • 著者名/発表者名
      Akizawa Hiroki, Saito Shun, Kohri Nanami, Furukawa Eri, Hayashi Yoshihiro, Bai Hanako, Nagano Masashi, Yanagawa Yojiro, Tsukahara Hayato, Takahashi Masashi, Kagawa Shinjiro, Kawahara‐Miki Ryouka, Kobayashi Hisato、Kono Tomohiro、Kawahara Manabu
    • 雑誌名

      The FASEB Journal

      巻: 35 号: 10

    • DOI

      10.1096/fj.202002762rr

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Cell-cycle dependent GATA2 subcellular localization in mouse 2-cell embryos2021

    • 著者名/発表者名
      Komatsu Masaya, Tsukahara Hayato, Bai Hanako, Takahashi Masashi, Wakai Takuya, Kawahara Manabu
    • 雑誌名

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      巻: 584 ページ: 1-6

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2021.10.077

    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] ウシ子宮内膜上皮細胞における暑熱負荷培養時のNFE2L2の標的遺伝子の探索.2022

    • 著者名/発表者名
      唄 花子, 川原 学, 高橋 昌志.
    • 学会等名
      日本繁殖生物学会 (東京都 東京大学)
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] ウシ卵子成熟および発生における熱ショック非依存的なHSP70発現誘導と酸化ストレスに及ぼすEASの影響.2022

    • 著者名/発表者名
      楠野莉奈子, Ho Khoi, 本間康平, 高成準, 唄花子, 川原学, 高橋昌志.
    • 学会等名
      日本畜産学会 (神奈川県 東京農業大学)
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] ウシ初期胚発生の研究.2022

    • 著者名/発表者名
      川原 学
    • 学会等名
      日本繁殖生物学会 (オンライン)
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 内部細胞塊におけるウシYAP1の局在2022

    • 著者名/発表者名
      齋藤 隼, 加川 真二郎, 川原 学.
    • 学会等名
      日本分子生物学会 (千葉県 幕張メッセ)
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Gene expression changes in trophoblast cells after the blastocyst stage in cattle.2022

    • 著者名/発表者名
      Akizawa H., Bai H., Takahashi M. and Kawahara M.
    • 学会等名
      International Embryo Technology Society 48th Annual Conference
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ホルスタイン種初産牛の人工授精受胎率に及ぼす環境要因の解析.2021

    • 著者名/発表者名
      宇喜多遥, 山崎武志, 山口諭, 阿部隼人, 馬場俊見, 唄花子, 高橋昌志, 川原学.
    • 学会等名
      日本畜産学会 (宮城県 東北大学)
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] Effect of two-step combined zona pellucida removal on developmental competence of mouse embryos.2021

    • 著者名/発表者名
      Weihong Fan, Hanako Bai, Manabu Kawahara, Masashi Takahashi.
    • 学会等名
      日本畜産学会 (宮城県 東北大学)
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] Effect of EAS on post freezing viability of heat stressed bovine cumulus granulosa cells in relation with redox balance.2021

    • 著者名/発表者名
      Khoi Thieu Ho, Kohei Homma, Jun Takanari, Hanako Bai, Manabu Kawahara, Kim Khang Nguyen Thi, Masashi Takahashi.
    • 学会等名
      日本畜産学会 (宮城県 東北大学)
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] Effect of EAS on P4 production pathway of bovine CG cells in relation with HSP70.2021

    • 著者名/発表者名
      Khoi Thieu HO, Kohei HOMMA, Jun TAKANARI, Hanako BAI, Manabu KAWAHARA, Kim Khang NGUYEN THI, Masashi TAKAHASHI.
    • 学会等名
      日本繁殖生物学会 (京都府 京都大学)
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] 腟底部発現変動遺伝子を用いたRT-LAMP法および機械学習によるウシ簡易迅速妊娠判定モデルの検討.2021

    • 著者名/発表者名
      國井 宏樹,窪 友瑛,浅岡 那月,嶋崎 知哉,唄 花子,川原 学,高橋 昌志.
    • 学会等名
      日本繁殖生物学会 (京都府 京都大学)
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [学会発表] ウシ子宮内膜上皮細胞における暑熱負荷培養時の酸化ストレス応答経路の検証.2021

    • 著者名/発表者名
      唄 花子,國井 宏樹,川原 学,高橋 昌志.
    • 学会等名
      日本繁殖生物学会 (京都府 京都大学)
    • 関連する報告書
      2021 実績報告書
  • [産業財産権] ウシ胚の体外培養方法、ウシ胚、及びウシの生産方法2022

    • 発明者名
      川原 学、秋沢 宏紀、高橋 昌志、唄 花子
    • 権利者名
      川原 学、秋沢 宏紀、高橋 昌志、唄 花子
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2022
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書

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公開日: 2021-04-28   更新日: 2025-01-30  

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