研究課題/領域番号 |
21H02440
|
研究種目 |
基盤研究(B)
|
配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分43040:生物物理学関連
|
研究機関 | 名古屋大学 |
研究代表者 |
成田 哲博 名古屋大学, 理学研究科, 准教授 (30360613)
|
研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
|
研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
|
配分額 *注記 |
17,420千円 (直接経費: 13,400千円、間接経費: 4,020千円)
2023年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2022年度: 5,980千円 (直接経費: 4,600千円、間接経費: 1,380千円)
2021年度: 6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
|
キーワード | 電子顕微鏡 / 蛋白質動態 / 脂質動態 / パルス電子顕微鏡 / 動態観察 / パルス電子光源 / 蛋白質 / 分子動態 / フォトカソード電子銃 / 溶液中動態観察 / 微小管 / アクチン / 脂質 / 溶液構造 |
研究開始時の研究の概要 |
電子顕微鏡は原子を直接観察できる非常に強力な方法であるが、一方でタンパク質や脂質膜などの生体分子は元来動的なものである。この動態を電子顕微鏡分解能レベルで理解するのは、溶液中分子のブラウン運動により極めて困難であった。電子顕微鏡写真を1マイクロ 秒から1ミリ秒の強い電子線パルスで撮影するパルス電子顕微鏡を用いれば、動いている物体でもぶれずに撮影できる。私達はこのパルス電子顕微鏡の立ち上げに参画すると同時に、微小管の重合、脱重合、蛋白質複合体解離、リポソーム動態などの現象を透過型電子顕微鏡分解能でリアルタイム観察することを目指す。
|
研究実績の概要 |
電子顕微鏡へのパルス電子源の搭載を行い、電子線が出ることを確認した。現在電子線軸の機械的調整を行っている。だいぶ遅れてしまったが、来年度には実際の観察ができるはずである。 また、溶液チャンバーについては、いままで窒化シリコンを窓材にしていたが、非特異的な吸着が見られることが多く、これを抑えるため炭化シリコンを窓材に使用した溶液チャンバーの作成を行い、これに成功した。コントラストが若干落ちるが、金コロイドの非特異的吸着が大幅に抑えられた。今後は二つの窓材を使い分けることになる。 新たな試料としてリポソームの溶液チャンバーへの封入を開始。溶液チャンバーには直径数十nmの小さなリポソームを入れる必要があり、まずは小さいリポソームを安定して作る方法を脂質組成や作成法を変えながら試行している。リポソームの融合や変形を観察できるようになれば意義は大きい。
|
現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
電子顕微鏡へのパルス電子源搭載が真空系のトラベルで遅れた。 現在搭載自体は終わっており、調整中である。
|
今後の研究の推進方策 |
本年度は実際の観察を少しでも多く行うことが目標である。 電子光軸の調整を終了次第、まずは金コロイドのブラウン運動観察を通して、観察条件を詰めていく。その上で、微小管、アクチンの重合、脱重合、ダイニン、ミオシンの動きの直接観察、脂質膜の融合、変形の観察を行い、うまくいきそうなものから優先的に解析していく。
|