| 研究課題/領域番号 |
21K05130
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分34020:分析化学関連
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| 研究機関 | 九州工業大学 |
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研究代表者 |
末田 慎二 九州工業大学, 大学院情報工学研究院, 教授 (00325581)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2022年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2021年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
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| キーワード | タンパク質相互作用解析 / 蛍光イメージング / 培養細胞 / 平衡結合解析 / タンパク質間相互作用解析 / タンパク質間相互作用 / 相互作用解析 / 細胞表層 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、培養細胞の表層を反応場として利用したタンパク質間相互作用解析系の構築を行う。具体的にはターゲットとなる標的タンパク質を、膜タンパク質を介して培養細胞の表層に発現させ、そこに蛍光ラベル化したもう一方のタンパク質を添加して、両者の相互作用を蛍光イメージングにより解析する。本解析系では反応場となる細胞が自ら標的タンパク質を産生し、その表層に提示するという特徴を有しており、原理的に様々なタンパク質間相互作用を対象として解析することが可能である。
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| 研究成果の概要 |
本研究では、培養細胞の表層を反応場として利用したタンパク質間相互作用解析系の開発を行った。ここでは、ターゲットとなる標的タンパク質を、膜タンパク質を介して培養細胞の表層に発現させ、そこに蛍光ラベル化したもう一方のタンパク質を添加して、両者の相互作用を蛍光イメージングにより解析する系の構築を行った。実際に本系を利用して平衡結合解析を実施し、タンパク質間相互作用に関する結合パラメーターを算出することに成功した。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
タンパク質間の詳細な相互作用解析には一般にセンサーチップをベースとした分析手法が活用されているが、この場合、タンパク質を固定化したセンサーチップをうまく調製できない場合があり、このことが解析の妨げとなっている。本手法では培養細胞の表層に標的タンパク質を提示し、その培養細胞の表層でそのまま相互作用解析を実施するため、センサーチップ上への固定化が困難なタンパク質についても解析を行うことが可能である。したがって本手法はこれまで詳細な相互作用解析データの取得が困難であった系に対して有効な解析手法になり得るものと期待される。
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