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S-スルフヒドリル化タンパク質の網羅的解析による含硫化合物生合成機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 21K05345
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分38020:応用微生物学関連
研究機関高知大学

研究代表者

加藤 伸一郎  高知大学, 教育研究部総合科学系生命環境医学部門, 准教授 (60346707)

研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
キーワードS-スルフヒドリル化 / システイン代謝 / トレーサー実験 / 硫黄代謝 / トレーサー
研究開始時の研究の概要

チアミン、ビオチンなど構造中に含まれる硫黄原子は含硫アミノ酸であるL-システインに由来していることが知られており、PLP酵素「システインデスルフラーゼ」が含硫化合物生合成の初発段階を司っている。この酵素により生じるS-スルフヒドリル化を放射性同位元素標識化合物であるL-[35S]システインを用いたトレーサー実験により網羅的に検出する。そして、検出されたタンパク質の含硫化合物生合成系の関与を解析し、その分子特性を明らかにすることを目指す。

研究成果の概要

大腸菌MG1655の無細胞抽出液を試料としてL-[35S]システインによるトレーサー実験を行ったところ、経時的に35S標識されるタンパク質が見出した。in vitroにおいて、これらとシステインデスルフラーゼの間の硫黄原子の受け渡しについて確認を行ったところ、経時的な[35S]標識量の変動が認められた。大腸菌にはIscS、SufS、CsdAの3種システインデスルフラーゼの存在が認められており、それぞれを用いた場合の[35S]標識量についても確認を行った。

研究成果の学術的意義や社会的意義

生体内には存在量は微量ながら高い生理活性を有するチアミン、ビオチン、リポ酸、鉄-硫黄クラスター、モリブドプテリンなどの補因子や、tRNAに含まれるチオウリジンなどの含硫化合物の存在が知られている。大腸菌においてPLP酵素であるシステインデスルフラーゼが、含硫化合物生合成の初発段階において硫黄を供給するという、極めて重要な役割を有していることを示唆された。この知見を生かすことで、含硫化合物の生合成プラットフォームの構築が可能となり、効率的かつ安価な生産が可能になると期待される。

報告書

(3件)
  • 2023 研究成果報告書 ( PDF )
  • 2022 実施状況報告書
  • 2021 実施状況報告書
  • 研究成果

    (1件)

すべて 2022

すべて 学会発表 (1件)

  • [学会発表] 部位特異的変導入によるL-アラニン脱水素酵の基質特異性改変試み2022

    • 著者名/発表者名
      廣出隼正、谷口優人、加藤伸一郎
    • 学会等名
      日本農芸化学会中四国支部2022年度大会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書

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公開日: 2021-04-28   更新日: 2025-01-30  

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