研究課題/領域番号 |
21K05618
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 基金 |
応募区分 | 一般 |
審査区分 |
小区分39050:昆虫科学関連
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研究機関 | 佐賀大学 |
研究代表者 |
吉賀 豊司 佐賀大学, 農学部, 教授 (00312231)
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研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2023年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2022年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2021年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
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キーワード | 線虫 / 昆虫 / 自然免疫 / 血球 / 包囲反応 |
研究開始時の研究の概要 |
線虫において寄生が進化してきた背景として、線虫に共通する、免疫を回避するための基盤的機構の存在が考えられる。本課題ではこの機構を解明するため、モデル線虫Caenorhabditis elegansの変異体をスクリーニングすることによって線虫側の宿主免疫からの回避に関する遺伝子の探索を行う。また、宿主としてチョウ目昆虫を用い、昆虫の線虫に対する反応を生化学的・分子生物学的手法によって解明することによって、宿主と寄生者の相互作用を理解しようとするものである。
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研究実績の概要 |
寄生が成立するための重要なステップの一つは、宿主免疫からの回避である。細菌やカビなどに対しては、宿主による異物認識機構の詳細は明らかになっている 一方で、線虫などに 対する宿主の異物認識機構は未だに明らかになっていない部分が多い。寄生性を獲得した線虫は、宿主免疫を回避や抑制すると考えられて いるが、その詳細や進化についても不明である。そこで本研究では、昆虫を用いて血球による異物認識とそれに対する線虫の宿主免疫からの回避機構の解明を目指した。鱗翅目昆虫では、大型の異物に対しては顆粒細胞やプラズマ細胞が包囲することによって無毒化することが分かっているが、顆粒細胞がどのように線虫を異物認識するのかについては不明である。当初利用していたアワヨトウが実験に利用できなくなったため、その代わりにカイコを用いて実験系の確立を試みた。その結果、カイコにおいて線虫が包囲化されることを確認するとともに、カイコの発育ステージや生育状態によって線虫に対する異物認識が変化することが明らかとなった。 昆虫による包囲に関する線虫の変異体のin vivoスクリーニング法として、EMS処理して得られたC. elegans変異体の集団を昆虫血体腔内に注入し、一定時間後に線虫を回収し、血球の付着に変化がみられる線虫個体を単離し、人工培地上で培養し、血球の付着が異なる個体の選抜を試みた。ハチノスツヅリガ幼虫やカイコ幼虫、ミールワームなどの幼虫を用いて血球に包囲されない個体やより包囲される個体を探し出した。この一次スクリーニングで反応が異なる個体を単離培養し、再度、反応を調査したが、これまでのところはっきりとした再現性が得られていない。供試個体数を増やしていくとともにより効率の良いスクリーニング方法を検討していく必要がある。
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