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新規アミノ酸発色法を用いた臨床検査法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 21K07394
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分52010:内科学一般関連
研究機関香川県立保健医療大学

研究代表者

徳原 康哲  香川県立保健医療大学, 保健医療学部, 准教授 (60746329)

研究分担者 小原 一朗  徳島文理大学, 薬学部, 講師 (60581775)
研究期間 (年度) 2021-04-01 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2023年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2022年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2021年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
キーワードアミノ酸 / 次亜塩素酸ナトリウム五水和物 / 吸光度 / トリプトファン / ホモゲンチジン酸 / 質量分析 / 生化学自動分析装置 / アスコルビン酸 / 臨床検査法 / 亜硝酸 / アンモニア
研究開始時の研究の概要

アミノ酸代謝異常症には重篤な症状を引き起こす疾患が多いが,尿中アミノ酸を簡易・迅速に測定する臨床検査法は確立されていない.このような状況の中,申請者は種々のアミノ酸を青緑色に発色させる新たな方法を見出した.本研究の目的は,尿中アミノ酸を測定する新規臨床検査法を確立する事である.本研究では,以下の2点を検証する.
① アミノ酸が発色する至適条件と発色機構を解明する.
② 生化学自動分析装置により尿中アミノ酸濃度を測定する.
以上の結果より,尿中アミノ酸濃度の臨床検査が可能となるため,アミノ酸の代謝異常を示す様々な疾患の早期発見・治療へと繋がる検査項目としての利用が期待できる.

研究成果の概要

本研究は、アミノ酸の新規発色法を開発し、生体試料中のアミノ酸を測定する臨床検査法への応用を目的とする。研究期間(2021~2023年度)では、必須アミノ酸の一つであるトリプトファンの新規検出法の開発に関する研究、さらに、エレクトロスプレーイオン化質量分析法(ESI-MS)を用いたアミノ酸の中間代謝産物(ホモゲンチジン酸)の検出に関する研究を実施した。
研究期間全体を通じて、研究代表者が責任著者として3編の論文発表そして6件の国内学会発表を行った。さらに、2023年度には日本臨床化学会の奨励賞を受賞する等、 アミノ酸やその代謝産物を検出する新たな方法に関する研究成果を国内外に発表することができた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

①トリプトファンは必須アミノ酸の一つであり、肝疾患や精神疾患等で体内濃度が変化するため、体内動態を観察することが重要である。希塩酸や次亜塩素酸ナトリウム五水和物等を用いてトリプトファンを赤褐色に発色させる我々の方法は、生体試料中のトリプトファン濃度を定量する簡易・迅速な臨床検査法の開発に有用である。
②ホモゲンチジン酸は、アミノ酸であるフェニルアラニンやチロシンの中間代謝産物であり、アルカプトン尿症患者の尿中に大量に排出される物質である。微量物質を検出できるエレクトロスプレーイオン化質量分析法(ESI-MS)を用いてホモゲンチジン酸を測定することは、アルカプトン尿症患者の発見に有用である。

報告書

(4件)
  • 2023 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2022 実施状況報告書
  • 2021 実施状況報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2023 2022

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (6件) (うち招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Detection of homogentisic acid by electrospray ionization mass spectrometry2023

    • 著者名/発表者名
      Tokuhara Yasunori、Ohara Kazuaki、Morinishi Tatsuya、Yamaguchi Kentaro、Tada Satoshi
    • 雑誌名

      Journal of Clinical Laboratory Analysis

      巻: 37 号: 21-22

    • DOI

      10.1002/jcla.24976

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] A spectrophotometric method for the determination of tryptophan following oxidation by the addition of sodium hypochlorite pentahydrate2023

    • 著者名/発表者名
      Hosokawa Sho、Morinishi Tatsuya、Ohara Kazuaki、Yamaguchi Kentaro、Tada Satoshi、Tokuhara Yasunori
    • 雑誌名

      PLOS ONE

      巻: 18 号: 1 ページ: e0279547-e0279547

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0279547

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Absorption and Mass Spectrometry Measurements of Aqueous Ammonia after the Addition of Phenol and Sodium Hypochlorite Pentahydrate2022

    • 著者名/発表者名
      Yasunori Tokuhara, Tatsuya Morinishi, Yasuhiko Ota, Satoshi Tada
    • 雑誌名

      Journal of Kagawa Prefectural University of Health Sciences

      巻: 13 ページ: 45-49

    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 次亜塩素酸ナトリウム五水和物を用いた トリプトファンの新規発色法に関する基礎的検討2023

    • 著者名/発表者名
      村川晴香,今治留菜,徳原康哲
    • 学会等名
      第17回生物試料分析科学会中国四国支部学術集会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] 論文投稿の経験から会誌の在り方を考える~若手研究者の視点から~2023

    • 著者名/発表者名
      徳原康哲
    • 学会等名
      第70回日本臨床検査医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 次亜塩素酸ナトリウム五水和物を用いたアンモニア発色法の基礎的検討2023

    • 著者名/発表者名
      徳原康哲,多田達史
    • 学会等名
      第33回日本臨床化学会四国支部例会・総会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] 尿試験紙における亜硝酸塩の新たな偽陰性要因 次亜塩素酸ナトリウム溶液の混入2022

    • 著者名/発表者名
      徳原康哲,森西起也,宿谷賢一,多田達史
    • 学会等名
      第71回日本医学検査学会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] 亜硝酸塩検査の新たな陰性化要因に関する基礎的検討2022

    • 著者名/発表者名
      有田小夏,久保春華,徳原康哲
    • 学会等名
      第16回生物試料分析科学会中国四国支部学術集会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [学会発表] 新規トリプトファン発色法の考案2022

    • 著者名/発表者名
      徳原康哲,細川翔,小原一朗,山口健太郎,森西起也,多田達史
    • 学会等名
      第62回 日本臨床化学会年次学術集会
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書

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公開日: 2021-04-28   更新日: 2025-01-30  

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