ヒト急性GVHDにおける組織残存レシピエントT細胞の機能と臨床的意義の解明

• 研究課題/領域番号: 21K08387
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分54010:血液および腫瘍内科学関連
• 研究機関: 滋賀医科大学 (2022); 名古屋大学 (2021)
• 研究代表者: 村田 誠 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (40378063)
• 研究期間 (年度): 2021-04-01 – 2024-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2022年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2022年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: 造血幹細胞移植 / 移植片対宿主病 / T細胞

研究開始時の研究の概要

急性移植片対宿主病（GVHD）は同種造血幹細胞移植における致死的合併症の一つである。急性GVHDは生着したドナーT細胞が患者組織を傷害することにより発症すると考えられている。一方、最近レシピエントT細胞が移植後もGVHD組織に残存することが報告された。しかし、それらレシピエントT細胞とGVHD発症との関わりについては十分明らかにされていない。本研究では、ヒト急性GVHD組織残存レシピエントT細胞を詳細に解析し、その解析結果とGVHD重症度や治療反応性など臨床経過との関連を明らかにすることで、組織残存レシピエントT細胞の臨床的意義を解明する。

研究実績の概要

本研究では、ヒト急性移植片対宿主病（GVHD）組織に浸潤するT細胞について、その細胞起源も含めて詳細に解析し、GVHD重症度や治療反応性などGVHD臨床経過との関連を明らかにすることをめざしている。昨年度に加え、今年度は新たに急性GVHD発症患者3症例から、GVHD診断時の皮膚生検組織の提供を受けた。それらの生検組織について、後の解析のために一部をRNAlaterで凍結保存するとともに、Whole Skin Dissociation Kitを用いて細胞を分離し、Dead Cell Removal Kitで死細胞を除去した上で、分離した細胞をサイトスピンで確認した。標本を検鏡するとリンパ球のほか、単球・マクロファージや、好中球なども確認し得たことから、組織中の種々の有核細胞が万遍なく採取出来ていることが示された。NGSを用いた生検組織浸潤T細胞のTCR-Vβ CDR3塩基配列の網羅的解析、ならびに生検組織からのT細胞クローンの分離などの解析も同時に進めている。一方、このように組織から細胞を分離した上で解析する戦略とは別に、病理組織標本を用いてトランスクリプトーム解析する技術も近年急速に普及しつつあるため、過去に研究同意を得て保存してある急性GVHD皮膚生検検体のブロック標本を用いて空間トランスクリプトーム解析を行うことを現在検討している。GVHDのエフェクター細胞であるT細胞と単球・マクロファージなどその他の免疫細胞との相互作用などについても情報が得られ、またY染色体上遺伝子の発現レベルなどを目印に細胞起源に関する情報も得られると考えている。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

患者からのGVHD組織の検体収集は順調に進んでおり、組織浸潤有核細胞の分離、NGSを用いた組織浸潤T細胞の網羅的TCR塩基配列の決定、細胞起源の同定なども進んでいる。これまでのところ本研究はおおむね順調に進展している。

今後の研究の推進方策

現在の所属施設においても前施設とほぼ同数の年間移植数が実施されており、引き続き計画通りに検体収集を進めることが可能と考えている。これまで通り本研究を進めていく。

研究成果

• [雑誌論文] Downregulation of HLA class II is associated with relapse after allogeneic stem cell transplantation and alters recognition by antigen-specific T cells (2022)
  • 著者名/発表者名: Adachi Yoshitaka、Sakai Toshiyasu、Terakura Seitaro、Shiina Takashi、Suzuki Shingo、Hamana Hiroshi、Kishi Hiroyuki、Sasazuki Takehiko、Arase Hisashi、Hanajiri Ryo、Goto Tatsunori、Nishida Tetsuya、Murata Makoto、Kiyoi Hitoshi
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 115 号: 3 ページ: 371-381
  • DOI: 10.1007/s12185-021-03273-w
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel swab storage gel is superior to dry swab DNA collection, and enables long-range high resolution next generation sequencing HLA typing from buccal cell samples. (2022)
  • 著者名/発表者名: Shimizu M, Takahashi D, Suzuki S, Shigenari A, Ito S, Miyata S, Satake M, Matsuhashi M, Kulski JK, Murata M, Azuma F, Shiina T.
  • 雑誌名: HLA 巻: 99 号: 6 ページ: 590-606
  • DOI: 10.1111/tan.14611
  • 査読あり
• [雑誌論文] The new generation tyrosine kinase inhibitor improves the survival of chronic myeloid leukemia patients after allogeneic stem cell transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Shimazu Y, Murata M, Kondo T, Minami Y, Tachibana T, Doki N, Uchida N, Ozawa Y, Yano S, Fukuda T, Kato J, Ara T, Eto T, Ishikawa J, Nakamae H, Tanaka J, Ichinohe T, Atsuta Y, Nagamura-Inoue T.
  • 雑誌名: Hematol Oncol 巻: 40 号: 3 ページ: 442-456
  • DOI: 10.1002/hon.3000
  • 査読あり
• [雑誌論文] Favorable Outcome with Conditioning Regimen of Flu/Bu4/Mel in Acute Myeloid Leukemia Patients in Remission Undergoing Cord Blood Transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Mizuno S, Takami A, Kawamura K, Shimomura Y, Arai Y, Konuma T, Ozawa Y, Sawa M, Ota S, Takahashi S, Anzai N, Hiramoto N, Onizuka M, Nakamae H, Tanaka M, Murata M, Kimura T, Kanda J, Fukuda T, Atsuta Y, Yanada M.
  • 雑誌名: Transplant Cell Ther 巻: 28 号: 11 ページ: 775.e1-775.e9
  • DOI: 10.1016/j.jtct.2022.07.026
  • 査読あり
• [雑誌論文] Incidence and predictors of recurrent sick leave in survivors who returned to work after allogeneic hematopoietic cell transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Kurosawa S, Yamaguchi T, Mori A, Matsuura T, Masuko M, Murata M, Tashiro H, Kako S, Satake A, Hagihara M, Ota S, Saito T, Kagawa K, Matsuo Y, Itonaga H, Uoshima N, Yamaguchi H, Naito K, Takahashi M, Fukuda T.
  • 雑誌名: J Cancer Surviv 巻: in press 号: 3 ページ: 1-1
  • DOI: 10.1007/s11764-022-01250-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sequence Variations Within HLA-G and HLA-F Genomic Segments at the Human Leukocyte Antigen Telomeric End Associated With Acute Graft-Versus-Host Disease in Unrelated Bone Marrow Transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Suzuki S, Morishima S, Murata M, Tanaka M, Shigenari A, Ito S, Kanga U, Kulski JK, Morishima Y, Shiina T.
  • 雑誌名: Front Immunol. 巻: 13 ページ: 938206-938206
  • DOI: 10.3389/fimmu.2022.938206
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Prognostic impact of complex karyotype on post-transplant outcomes of myelofibrosis. (2022)
  • 著者名/発表者名: Okada Y, Takenaka K, Murata M, Shimazu Y, Tachibana T, Ozawa Y, Uchida N, Wakayama T, Doki N, Sugio Y, Tanaka M, Masuko M, Kobayashi H, Ino K, Ishikawa J, Nakamae H, Matsuoka KI, Kanda Y, Fukuda T, Atsuta Y, Nagamura-Inoue T.
  • 雑誌名: Hematol Oncol 巻: 40 号: 5 ページ: 1076-1085
  • DOI: 10.1002/hon.3058
  • 査読あり
• [雑誌論文] Total body irradiation-containing conditioning regimens without antithymocyte globulin in adults with aplastic anemia undergoing umbilical cord blood transplantation. (2022)
  • 著者名/発表者名: Hiramoto N, Yamazaki H, Nakamura Y, Uchida N, Murata M, Kondo T, Yoshioka S, Eto T, Nishikawa A, Kimura T, Ichinohe T, Atsuta Y, Onishi Y, Suzuki R, Mori T.
  • 雑誌名: Annals of Hematology 巻: 101 号: 1 ページ: 165-175
  • DOI: 10.1007/s00277-021-04664-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytomegalovirus gastroenteritis in patients with acute graft-versus-host disease (2022)
  • 著者名/発表者名: Akahoshi Yu、Kimura Shun-ichi、Tada Yuma、Matsukawa Toshihiro、Tamaki Masaharu、Doki Noriko、Uchida Naoyuki、Tanaka Masatsugu、Nakamae Hirohisa、Kuriyama Takuro、Matsuoka Ken-ichi、Ikeda Takashi、Kimura Takafumi、Fukuda Takahiro、Kanda Yoshinobu、Atsuta Yoshiko、Murata Makoto、Terakura Seitaro、Nakasone Hideki
  • 雑誌名: Blood Advances 巻: 6 号: 2 ページ: 574-584
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2021005885
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Antithymocyte Globulin Potentially Could Overcome an Adverse Effect of Acute Graft-versus-Host Disease in Matched-Related Peripheral Blood Stem Cell Transplantation (2022)
  • 著者名/発表者名: Miyao K, Kuwatsuka Y, Murata M, Nagafuji K, Teshima T, Takeuchi Y, Shiratori S, Najima Y, Uchida N, Tanaka M, Sawa M, Ota S, Fukuda T, Ozawa Y, Kako S, Kawakita T, Ara T, Tanaka J, Kanda Y, Atsuta Y, Kanda J, Terakura S
  • 雑誌名: Transplantation and Cellular Therapy 巻: 28 号: 3 ページ: 153.e1-153.e11
  • DOI: 10.1016/j.jtct.2021.12.009
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phase I clinical trial of intra-bone marrow cotransplantation of mesenchymal stem cells in cord blood transplantation. (2021)
  • 著者名/発表者名: Goto T, Murata M, Nishida T, Terakura S, Kamoshita S, Ishikawa Y, Ushijima Y, Adachi Y, Suzuki S, Kato K, Hirakawa A, Nishiwaki S, Nishio N, Takahashi Y, Kodera Y, Matsushita T, Kiyoi H.
  • 雑誌名: Stem Cells Transl Med. 巻: 10(4) 号: 4 ページ: 542-553
  • DOI: 10.1002/sctm.20-0381
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Comparison of Transplantation Outcomes after Foscarnet and Ganciclovir Administration as First-Line Anti-Cytomegalovirus Preemptive Therapy (2021)
  • 著者名/発表者名: Miyao K, Terakura S, Ozawa Y, Sawa M, Kohno A, Kasahara S, Iida H, Ino K, Kusumoto S, Kasai M, Takami A, Kurahashi S, Kajiguchi T, Morishita T, Nishida T, Murata M; Nagoya Blood and Marrow Transplantation Group.
  • 雑誌名: Transplant Cell Ther 巻: 27(4) 号: 4 ページ: 342.e1-342.e10
  • DOI: 10.1016/j.jtct.2020.12.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of methotrexate dose in graft-versus-host disease prophylaxis after single-unit cord blood transplantation in adult acute myeloid leukemia (2021)
  • 著者名/発表者名: Terakura S, Kuwatsuka Y, Sugita J, Takahashi S, Ozawa Y, Ozeki K, Yoshioka S, Nakamae H, Kawakita T, Sawa M, Morishige S, Najima Y, Katsuoka Y, Sakaida E, Kouzai Y, Kimura T, Ichinohe T, Fukuda T, Atsuta Y, Murata M, Teshima T.
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: - 号: 6 ページ: 840-850
  • DOI: 10.1007/s12185-021-03097-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Spacer Length Modification Facilitates Discrimination between Normal and Neoplastic Cells and Provides Clinically Relevant CD37 CAR T Cells (2021)
  • 著者名/発表者名: Okuno Shingo、Adachi Yoshitaka、Terakura Seitaro、Julamanee Jakrawadee、Sakai Toshiyasu、Umemura Koji、Miyao Kotaro、Goto Tatsunori、Murase Atsushi、Shimada Kazuyuki、Nishida Tetsuya、Murata Makoto、Kiyoi Hitoshi
  • 雑誌名: The Journal of Immunology 巻: 206 号: 12 ページ: 2862-2874
  • DOI: 10.4049/jimmunol.2000768
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Off-the-shelf bone marrow-derived mesenchymal stem cell treatment for acute graft-versus-host disease: real-world evidence. (2021)
  • 著者名/発表者名: Murata M (corresponding), Terakura S, Wake A, Miyao K, Ikegame K, Uchida N, Kataoka K, Miyamoto T, Onizuka M, Eto T, Doki N, Ota S, Sato M, Hashii Y, Ichinohe T, Fukuda T, Atsuta Y, Okamoto S, Teshima T.
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplantation 巻: 56 号: 10 ページ: 2355-2366
  • DOI: 10.1038/s41409-021-01304-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Combined impact of HLA-allele matching and the CD34-positive cell dose on optimal unit selection for single-unit cord blood transplantation in adults. (2021)
  • 著者名/発表者名: Yabe T, Satake M, Odajima T, Watanabe-Okochi N, Azuma F, Kashiwase K, Matsumoto K, Orihara T, Yabe H, Kato S, Kato K, Kai S, Mori T, Morishima S, Takanashi M, Nakajima K, Murata M, Morishima Y.
  • 雑誌名: Leukemia & Lymphoma 巻: 62 号: 11 ページ: 2737-2746
  • DOI: 10.1080/10428194.2021.1929958
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of HLA disparity on the risk of overall mortality in patients with grade II-IV acute GVHD on behalf of the HLA Working Group of Japan Society for Hematopoietic Cell Transplantation. (2021)
  • 著者名/発表者名: Fuji S, Hakoda A, Kanda J, Murata M, Terakura S, Inamoto Y, Uchida N, Toya T, Eto T, Nakamae H, Ikegame K, Tanaka M, Kawakita T, Kondo T, Miyamoto T, Fukuda T, Ichinohe T, Kimura T, Atsuta Y, Shintani A, Morishima S.
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplantation 巻: 56 号: 12 ページ: 2990-2996
  • DOI: 10.1038/s41409-021-01443-2
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Treatment of Steroid-Refractory Acute Graft-Versus-Host Disease Using Commercial Mesenchymal Stem Cell Products. (2021)
  • 著者名/発表者名: Murata M, Teshima T.
  • 雑誌名: Frontiers in Immunology 巻: 12 ページ: 724380-724380
  • DOI: 10.3389/fimmu.2021.724380
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Effect of cytomegalovirus reactivation with or without acute graft-versus-host disease on the risk of nonrelapse mortality (2020)
  • 著者名/発表者名: Akahoshi Y, Kimura SI, Inamoto Y, Seo S, Muranushi H, Shimizu H, Ozawa Y, Tanaka M, Uchida N, Kanda Y, Katayama Y, Shiratori S, Ota S, Matsuoka KI, Onizuka M, Fukuda T, Atsuta Y, Murata M, Terakura S, Nakasone H.
  • 雑誌名: Clin Infect Dis 巻: - 号: 3 ページ: e620-e628
  • DOI: 10.1093/cid/ciaa1871
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 造血幹細胞移植における間葉系幹細胞の臨床応用. (2022)
  • 著者名/発表者名: 村田 誠.
  • 学会等名: 第29回日本輸血・細胞治療学会秋季シンポジウム
  • 招待講演
• [学会発表] 日本におけるGVHD治療の現状. (2022)
  • 著者名/発表者名: 村田 誠.
  • 学会等名: 第44回日本造血・免疫細胞療法学会総会
  • 招待講演
• [学会発表] 急性GVHDに対するMSC治療 (2022)
  • 著者名/発表者名: 村田 誠.
  • 学会等名: 第44回日本造血・免疫細胞療法学会総会
• [学会発表] CD19 CAR-T細胞療法のための白血球アフェレーシス. (2022)
  • 著者名/発表者名: 村田 誠, 岩田 哲, 竹内 裕貴, 吉山 聡一, 鈴木奈瑠子, 佐合 健, 古川 勝也, 中島 麻梨絵, 葉名尻 良, 牛島 洋子, 島田 和之, 石川 裕一, 寺倉 精太郎, 長井 りさ, 古村 恵理, 松下 正, 清井 仁.
  • 学会等名: 第70回日本輸血・細胞治療学会学術総会
• [学会発表] 初発重症再生不良性貧血に対する免疫抑制療法におけるエルトロンボパグ併用の有用性 (2022)
  • 著者名/発表者名: 横田 裕史, 宮尾 康太郎, 小野 孝明, 楠本 茂, 兼村 信宏, 尾関 和貴, 小島 由美, 梶口 智弘, 内藤 健助, 内野かおり, 寺倉精太郎, 岡本 晃直, 冨田 章裕, 森下 喬允, 小澤 幸泰, 今橋 伸彦, 飯田 浩充, 井本 直人, 倉橋 信悟, 生駒 良和, 笠原 千嗣, 稲垣 裕一郎, 澤 正史, 西田 徹也, 村田 誠.
  • 学会等名: 第44回日本造血・免疫細胞療法学会総会
• [学会発表] 同種造血幹細胞移植後の就労に関する実態調査 －移植後復職後の再就職に関する検討－ (2022)
  • 著者名/発表者名: 黒澤 彩子, 山口 拓洋, 森 文子, 松浦 朋子, 増子 正義, 村田 誠, 田代 晴子, 賀古 真一, 佐竹 敦志, 萩原 真紀, 太田 秀一, 齋藤 健, 賀川 久美子, 衛藤 徹也, 澤山 靖, 魚嶋 伸彦, 山口 博樹, 内藤 健助, 高橋 都, 福田 隆浩.
  • 学会等名: 第44回日本造血・免疫細胞療法学会総会
• [学会発表] ALLに対するpiggyBacトランスポゾン遺伝子改変CD19CAR-T細胞療法の臨床第1相試験 (2022)
  • 著者名/発表者名: 西尾 信博, 葉名尻 良, 石川 裕一, 村田 誠, 片岡 伸介, 谷口 理恵子, 成田 敦, 村松 秀城, 高橋 義行.
  • 学会等名: 第14回日本血液疾患免疫療法学会学術集会
• [学会発表] CD19およびCD37を標的とするdual CAR-T細胞療法の開発 (2022)
  • 著者名/発表者名: 竹内 裕貴, 今井 奏衣, 寺倉 精太郎, 尾﨑 正英, 安達 慶高, 奥野 真吾, 葉名尻 良, 村田 誠, 清井 仁.
  • 学会等名: 第14回日本血液疾患免疫療法学会学術集会
• [学会発表] Eva1発現固形癌に対しての新規CAR-T細胞療法 (2022)
  • 著者名/発表者名: 尾﨑 正英, 寺倉 精太郎, 砂川 真輝, 國料 俊男, 西田 徹也, 村田 誠, 清井 仁.
  • 学会等名: 第81回日本癌学会学術集会
• [学会発表] CD37CAR-T細胞のスペーサーの長さを微調整することで最適なシグナルを得ることができる. (2021)
  • 著者名/発表者名: 安達 慶高, 奥野真吾, 寺倉精太郎, Jakrawadee Julamanee, 堺 寿保, 宮尾康太郎, 村瀬 篤史, 尾﨑 正英, 今井 奏衣, 梅村 晃史, 葉名尻 良, 島田 和之, 西田徹也, 村田 誠, 清井 仁.
  • 学会等名: 第13回日本血液疾患免疫療法学会学術集会
• [学会発表] ヒト急性GVHD組織におけるT細胞応答. (2021)
  • 著者名/発表者名: 村田 誠.
  • 学会等名: 第29回日本組織適合性学会大会
• [学会発表] Phase I study of piggyBac transposon mediated CD19: CAR-T therapy for acute lymphoblastic leukemia. (2021)
  • 著者名/発表者名: Nishio N, Hanajiri R, Ishikawa Y, Terakura S, Nishida T, Murata M, Hamada M, Nishikawa E, Kawashima N, Okuno Y, Narita A, Muramatsu H, Takahashi Y.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] The optimal signal can be obtained by fine-tuning the spacer length of CD37CAR-T cells. (2021)
  • 著者名/発表者名: 安達 慶高, 寺倉 精太郎, 奥野 友介, 佐藤 好隆, 尾崎 正英, 今井 奏衣, 梅村 晃史, 堺 寿保, 葉名尻 良, 西田 徹也, 村田 誠, 清井 仁.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Genome-wide CRISPR-Cas9 screening to identify the genes regulating human CAR-T cells proliferation. (2021)
  • 著者名/発表者名: 安達 慶高, 寺倉 精太郎, 奥野 友介, 佐藤 好隆, 尾崎 正英, 今井 奏衣, 梅村 晃史, 堺 寿保, 葉名尻 良, 西田 徹也, 村田 誠, 清井 仁.
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Cytomegalovirus Gastroenteritis in Patients with Acute Graft-Versus-Host Disease. (2021)
  • 著者名/発表者名: Akahoshi Y, Kimura S-I, Tada Y, Matsukawa T, Tamaki M, Doki N, Uchida N, Tanaka M, Nakamae H, Kuriyama T, Matsuoka K-I, Ikeda T, Kimura T, Fukuda T, Kanda Y, Atsuta Y, Murata M, Terakura S, Nakasone H.
  • 学会等名: The 63rd annual meeting of the American Society of Hematology
  • 国際学会
• [学会発表] A Phase I Study of CD19 Chimeric Antigen Receptor-T Cells Generated By the PiggyBac Transposon Vector for Acute Lymphoblastic Leukemia. (2021)
  • 著者名/発表者名: Nishio N, Hanajiri R, Ishikawa Y, Murata M, Taniguchi R, Hamada M, Nishikawa E, Kawashima N, Narita A, Muramatsu H, Takahashi Y.
  • 学会等名: The 63rd annual meeting of the American Society of Hematology
  • 国際学会