| 研究課題/領域番号 |
21K10172
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57070:成長および発育系歯学関連
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| 研究機関 | 日本大学 |
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研究代表者 |
白川 哲夫 日本大学, 歯学部, 特任教授 (00187527)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2023年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円)
2022年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2021年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
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| キーワード | ヒト歯髄 / エピジェネティクス / 間葉系幹細胞 / 神経細胞 / レット症候群 / MECP2 / hTERT遺伝子 / 細胞表面抗原 / CD69 / TNF-α / スフェロイド / 分化誘導 / 抜去歯 / 歯髄幹細胞 / アポトーシス / Ki67 / SSEA-3 / 歯髄由来幹細胞 / 神経幹細胞 / シナプス結合 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
歯髄由来幹細胞は頭部神経堤細胞由来であり、骨や軟骨のほか神経系の細胞にも分化可能であるが、神経細胞に分化したあとの機能的解析は世界的にみてもまだ端緒に就いたばかりである。
本研究では、健常者ならびにレット症候群女性から採取した歯髄由来幹細胞を神経細胞に分化誘導して分子生物学的、および神経生理学的な解析を行う。方法として、まず栄養因子を付加した培地を用いて神経細胞への分化誘導を成功させ、そののち培養下で神経細胞間の情報伝達ならびに同期活動を調べて神経細胞としての特性を解析するとともに、主にGABAあるいはグルタミン酸作動性神経細胞への分化と機能異常の有無を調べ、疾患との関わりについて検討する。
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| 研究成果の概要 |
レット症候群女児および健常女児の歯髄由来の間葉系幹細胞（MSCs）について、幹細胞専用培地を用いて培養したのち細胞表面抗原の発現を調べた。88種の抗原のうちCD69のみがレット症候群女児由来MSCsに強発現していた。CD69mRNA量はTNF-α刺激に対し濃度依存的に増加した。レット症候群女児由来MSCsの不死化ならびに神経細胞への分化誘導を目的としてhTERT遺伝子導入を試みた。健常女児由来MSCsについてG418耐性のhTERT遺伝子導入細胞を得ることができた一方で、レット症候群女児由来MSCsでは同遺伝子導入の過程で細胞の活性が著しく低下し神経細胞への分化誘導には至らなかった。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
レット症候群女児歯髄由来の間葉系幹細胞（MSCs）について、健常女児歯髄由来のMSCsと比較して明らかに増殖能が低くまた老化が早いことに加えて、Lipofectamineによる遺伝子導入処理に脆弱であることが判明した。レット症候群女児由来MSCsに強発現していたCD69はリンパ球の早期活性化マーカーとして知られているが、レット症候群の症状や遺伝子導入処理での細胞脆弱性との関連は不明である。CD69については近年、脳常在性の制御性T細胞での発現が報告されており、制御性T細胞が脳内での過剰な炎症反応を抑制していることが示唆されることから、レット症候群の病態解明における標的分子の１つと考えられる。
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