| 研究課題/領域番号 |
21K16678
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分56020:整形外科学関連
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
松村 恵津子 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 非常勤講師 (30831854)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2022年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2021年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
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| キーワード | 間葉系幹細胞 / IL1b / 滑膜 / 軟骨再生 / 増殖 / Erk1/2 / CD121a / IL-1 beta / 細胞増殖 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
これまでの研究から、関節炎症に伴って発現上昇するIL1bが、MSCの分化能を損なう事なく強力な増殖因子として機能することを示してきた(Matsumura E, et al. Cytotherapy, 2017; 19: 181-193)。しかし、IL1bは非常に強力な炎症性サイトカインであると同時に軟骨細胞に対して軟骨基質産生抑制、軟骨基質分解酵素の発現増強作用が報告されているため、再生医療においてヒトに直接応用することは難しいと考えられた。そこで本研究では、IL1bによる組織破壊作用とMSC増殖促進作用の分子機序を明らかとし、増殖促進作用のみを再生医療に応用可能か検討を行う。
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| 研究実績の概要 |
間葉系幹細胞(MSC)を用いた関節軟骨の再生医療の実現には、移植に用いる自家MSCの特性の解析が重要である。これまでの先行研究では、患者膝滑膜より調製したMSCは、IL1b受容体(CD121a)陽性細胞分画は約5％程度と低いにもかかわらず、in vitroにおいてIL1bが強力な増殖因子として作用することを示した。更に、IL1bはMSCの多分化能に影響しないことを示した。これらの結果は、IL1bが関節腔内において炎症反応を惹起するカタボリックな側面に加えて、組織修復のプロセスを促進するアナボリックな側面も合わせて有する可能性を示すと考えている。
IL1bによるMSC増殖促進効果は血清の存在下でのみ観察されたことから、血清中に存在する他の増殖因子の作用を増強する働きがあると考えられた。細胞増殖に関連する細胞内Erk1/2のリン酸化を検証したところ、血清刺激によりErk1/2のリン酸化は早期(5～10分)に一過的に観察されるが、IL1bはその時間を倍以上(5～30分)に延長させることが明らかとなった。この現象はMSC特異的であり、他の細胞株(HEK293FT等)においては、刺激後早期の一過的なリン酸化のみ観察された。MSCにおいて観察される遅延型Erk1/2リン酸化の分子機序を明らかとする目的で、免疫染色によるIL1受容体(CD121a)の局在解析を行ったところ、MSCではCD121aは細胞膜ではなく主に細胞質に局在することが明らかとなった。さらに、このMSC特異的発現制御の分子機序として、MSC特異的スプライシングの可能性が示唆された。
以上の結果から、IL1bが血清中に存在する増殖因子の強力な補助因子として機能する機序として、細胞質におけるレセプターとリガンドの相互作用による新規の遅延型情報伝達様式の存在か示唆された。
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