研究課題
若手研究
研究目的を達成するために、以下の研究を遂行する。腫瘍間質とがん細胞の相互作用におけるACLPの機能解析:CAFにおいてACLPと相互作用する分子を、網羅的探索によって同定し、その機能および臨床的意義を明らかにする。またがん細胞においてACLPと相互作用する分子を同定し、がん細胞におけるACLPシグナルを明らかにする。腫瘍間質と免疫細胞の相互作用におけるACLPの機能解析:ACLPを標的としたがん間質阻害と、がん免疫療法の組み合わせの有用性を明らかにする。ACLPの翻訳後修飾の機能的・臨床的意義の解析:ACLP蛋白の翻訳後修飾、とくにグリコシル化の機能的および臨床的意義を明らかにする。
がん線維芽細胞(CAF)におけるACLPの解析:頭頸部扁平上皮がんの臨床検体より採取したCAFを用いて、機能解析を行った。まずACLPをsiRNAによりノックダウンし、collagen gel contraction assayを行った。ACLPのノックダウンがCAFによる細胞外マトリックス再構成能を低下させたことから、ACLPがCAFの活性化に関わることを明らかにした。またCAFにおけるACLP発現は、コラーゲン発現と高く相関することを明らかにした。がん細胞に対するACLPの解析:CAF由来のACLPががん細胞に与える影響を解析するため、CAFのACLPをsiRNAによりノックダウンし、がん細胞と間接共培養を行った。その結果、CAFのACLPノックダウンはコントロール群と比較して、がん細胞の遊走・浸潤能を低下させた。一方、CAFのACLP過剰発現は、がん細胞の遊走・浸潤を促進した。またがん細胞をリコンビナントACLPで処理した結果、がん細胞の遊走・浸潤・cisplatin耐性の上昇が認められた。がん細胞とACLPを過剰発現させたCAFをヌードマウスに移植した結果、ACLPがin vivo腫瘍形成を促進することを明らかにした。xenograft腫瘍の免疫染色解析から、ACLP過剰発現群では腫瘍間質が増大していること、さらに間質のコラーゲンが豊富であることが示された。ACLP発現とCD8 Tリンパ球の相関の解析:頭頸部扁平上皮がん臨床例を用いてACLPの免疫組織染色解析を行った結果、ACLPはがん間質、特にCAFに高発現することを明らかにした。一方、CD8+ Tリンパ球の腫瘍内浸潤はACLPの染色とは逆のパターンを示した。このことから、ACLPの高発現はCD8+ Tリンパ球の腫瘍内浸潤を抑制する可能性が考えられた。
2: おおむね順調に進展している
臨床検体からCAFを採取・樹立し、実験系を充実させることができた。またCAFにおけるACLPの機能解析実験を行うことができた。CAF由来のACLPががん細胞に与える影響について解析を行うことができた。またACLP高発現がコラーゲン高発現と相関し、逆にCD8+ Tリンパ球の腫瘍内浸潤を抑制する可能性を見出した。
臨床検体からの正常繊維芽細胞ならびにCAFの採取と樹立を継続する。CAFにおけるACLPの分子機能をさらに検証すべく、ACLPがp53蛋白や細胞周期関連遺伝子に与える影響の検証を行う。また今年度得られた、ACLPと相互作用する候補分子について、解析を進める。CAFのACLP発現が、リンパ球浸潤を抑制するメカニズムの検証を行う。
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すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (6件)
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