単一細胞内成分の高性能分離分析法の開発と応用

• 研究課題/領域番号: 22350036
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 分析化学
• 研究機関: 岡山大学 (2011-2012); 九州大学 (2010)
• 研究代表者: 金田 隆 岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 教授 (20243909)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 18,460千円 (直接経費: 14,200千円、間接経費: 4,260千円); 2012年度: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2011年度: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2010年度: 10,790千円 (直接経費: 8,300千円、間接経費: 2,490千円)
• キーワード: キャピラリー電気泳動 / レーザー励起蛍光 / がん細胞 / タンパク質 / DNA、抗がん剤 / 多剤耐性タンパク質 / 糖タンパク質 / 二色レーザー励起 / 抗がん剤 / ポリアミン / アントラサイクリン / 阻害剤

研究概要

生体細胞はタンパク質、DNAや多くの小分子を含んでいる混合物であり、高性能な分離分析法は細胞内現象を分子レベルで解明するための重要な技術である。そこで本研究では、高感度に薬物、生理活性分子、タンパク質、DNAなどを分離、計測するための方法を開発し、細胞内に含まれるこれらの成分の分析に応用した。得られた結果から、開発した方法は、分子生物学研究における新規かつ有用な技術になるものと期待される。

研究成果

• [雑誌論文] Determination of polyamines in Arabidopsis thaliana by capillary electrophoresis using salicylaldehyde-5-sulfonate as a derivatizing reagent (2013)
  • 著者名/発表者名: Genki Inoue, Takashi Kaneta, Toshio Takayanagi, Junichi Kakehi, Hiroyasu Motose, Taku Takahashi
  • 雑誌名: Analytical Methods 巻: (in press) 号: 11 ページ: 2854-2859
  • DOI: 10.1039/c3ay26360f
  • NAID: 120005285276
  • 査読あり
• [雑誌論文] Determination of association constants between 5'-guanosine monophosphate gel and aromatic compounds by capillary electrophoresis (2013)
  • 著者名/発表者名: Kaori Yamaguchi, Nobuyuki Takeyasu, Takashi Kaneta
  • 雑誌名: Journal of Chromatography A 巻: Vol.1288 ページ: 149-154
  • DOI: 10.1016/j.chroma.2013.02.090
  • NAID: 120005285275
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sheath-flow electrochemical detection of amino acids with a copper wire electrode in capillary electrophoresis (2012)
  • 著者名/発表者名: Junji Inoue, Takashi Kaneta, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Electrophoresis 巻: Vol.33 号: 17 ページ: 2743-2747
  • DOI: 10.1002/elps.201200059
  • 査読あり
• [雑誌論文] Determination of Arsenic(III) by Sequential Injection/ Anodic Stripping Voltammetry (SI/ASV) Using In-situ Thin Film-Modified Screen-Printed Carbon Electrode (SPCE) (2012)
  • 著者名/発表者名: Eakkasit Punrat, Suchada Chuanuwatanakul, Orawan Chailapakul, Toshio Takayanagi, Takashi Kaneta, Shoji Motomizu
  • 雑誌名: Journal of Flow Injection Analysis 巻: Vol.29 ページ: 11-16
  • URL: http://jafia.kyushu-u.ac.jp/japanese/jfia/contents/29_1/HP/JFIA29%281%29%282012%29PP.11.pdf
  • 査読あり
• [雑誌論文] Band broadening of DNA fragments isolated by polyacrylamide gel electrophoresis in capillary electrophoresis (2012)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Takehito Ogura, Shuhei Yamato, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Journal of Separation Science 巻: Vol.35 号: 3 ページ: 431-435
  • DOI: 10.1002/jssc.201100909
  • 査読あり
• [雑誌論文] Micellar electrokinetic chromatographic analysis for in vitro accumulation of anthracyclines enhanced by inhibitors of cell membrane transporter-proteins in cancer cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Julius Mbuna, Takashi Kaneta, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Biomedical Chromatography 巻: Vol.25 号: 10 ページ: 1168-1174
  • DOI: 10.1002/bmc.1589
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapid determination of multidrug resistance-associated protein in cancer cells by capillary electrophoresis immunoassay (2011)
  • 著者名/発表者名: Julius Mbuna, Takashi Kaneta, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Rapid determination of multidrug resistance-associated protein in cancer cells by capillary electrophoresis immunoassay 巻: Vol.1218 号: 25 ページ: 3923-3927
  • DOI: 10.1016/j.chroma.2011.04.046
  • NAID: 120003457321
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of proteins in biological samples by capillary sieving electrophoresis with postcolumn derivatization/laser-Induced fluorescence detection (2011)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Takehito Ogura, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Electrophoresis 巻: Vol.32 号: 9 ページ: 1061-1067
  • DOI: 10.1002/elps.201000488
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analysis of Proteins in Biological Samples by Capillary Sieving Electrophoresis with Postcolumn Derivatization/Laser-Induced Fluorescence Detection (2011)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Takehito Ogura, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Electrophoresis 巻: (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Applications of Hadamard transform-gas chromatography/mass spectrometry (HT-GC/MS) to online detection of exhaled breath after drinking or smoking (2010)
  • 著者名/発表者名: Cheng-Huang Lin, Yuan-Kai Cheng, Takashi Kaneta, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Journal of Chromatography A 巻: Vol.1217 号: 32 ページ: 5274-5278
  • DOI: 10.1016/j.chroma.2010.06.034
  • 査読あり
• [雑誌論文] Measurement of intracellular accumulation of anthracyclines in cancerous cells by direct injection of cell lysate in MEKC/LIF detection (2010)
  • 著者名/発表者名: Julius Mbuna, Takashi Kaneta, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Electrophoresis 巻: Vol.31 号: 8 ページ: 1396-1404
  • DOI: 10.1002/elps.200900659
  • 査読あり
• [雑誌論文] Application of Hadamard transform to gas chromatography/nonresonant multiphoton ionization/time-of-flight (2010)
  • 著者名/発表者名: Chao-Chiang Cheng, Hung-Wei Chang, Tomohiro Uchimura, Totaro Imasaka, Takashi Kaneta, Cheng-Huang Lin
  • 雑誌名: mass spectrometry Journal of Separation Science 巻: Vol.33 号: 4-5 ページ: 626-630
  • DOI: 10.1002/jssc.200900662
  • 査読あり
• [雑誌論文] Design and application of Hadamard-injectors coupled with gas and supercritical fluid sample collection systems in Hadamard transform-gas chromatography/mass spectrometry (2010)
  • 著者名/発表者名: Zenzen Fan, Chien-Hung Lin, Hung-Wei Chang, Takashi Kaneta, Cheng-Huang Lin
  • 雑誌名: Journal of Chromatography A 巻: Vol.1217 号: 5 ページ: 755-760
  • DOI: 10.1016/j.chroma.2009.12.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Measurement of Intracellular Accumulation of Anthracyclines in Cancerous Cells by Direct Injection of Cell Lysate in MEKC/LIF Detection (2010)
  • 著者名/発表者名: Julius Mbuna, Takashi Kaneta, Totaro Imasaka
  • 雑誌名: Electrophoresis 巻: 31 ページ: 1396-1404
  • 査読あり
• [学会発表] Measurement of Multiply-labeled Proteins by Capillary Electrophoresis (2013)
  • 著者名/発表者名: Keisuke Kanaji, Takashi Kaneta
  • 学会等名: 2013 BK21 Symposium on Chemical Materials Science
  • 発表場所: Seoul, Korea
• [学会発表] Selective Detection of Glycoproteins by Two-Color Laser-Induced Fluorescence in Capillary Electrophoresis (2013)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Ayumi Tabara
  • 学会等名: Pure and Applied Chemistry International Conference (PACCON2013)
  • 発表場所: Bangsaen, Chon Buri, Thailand
• [学会発表] Selective Detection of Glycoproteins by Two-Color Laser-Induced Fluorescence in Capillary Electrophoresis (2013)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Ayumi Tabara
  • 学会等名: Pure and Applied Chemistry International Conference
  • 発表場所: Thailand
  • 招待講演
• [学会発表] Measurement of Multiply-labeled Proteins by Capillary Electrophoresis (2013)
  • 著者名/発表者名: Keisuke Kanaji, Takashi Kaneta
  • 学会等名: BK21 Symposium on Chemical Materials Science
  • 発表場所: Korea
• [学会発表] レーザー励起蛍光検出/キャピラリー電気泳動法による生体関連物質の高感度分析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金田隆
  • 学会等名: 岡山地区講演会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2012-03-06
• [学会発表] グアノシンゲルの分子認識能評価の研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口 佳織,金田隆
  • 学会等名: 第29回イオンクロマトグラフィー討論会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] フロー分析用電気化学発光検出の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 赤瀬大祐,金田隆
  • 学会等名: 第29回イオンクロマトグラフィー討論会
  • 発表場所: 岡山
• [学会発表] 二色レーザー励起蛍光検出による糖タンパク質の選択的検出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金田隆,田原彩裕美
  • 学会等名: 第32回キャピラリー電気泳動シンポジウム
  • 発表場所: 池田
• [学会発表] Determination of Polyamines in Arabidopsisby Capillary Electrophoresis Using Salicylaldehyde-5-sulfonate as a Derivatizing Reagent (2012)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Genki, Inoue, Toshio Takayanagi, Junichi Kakehi,Hiroyasu Motose, Taku Takahashi
  • 学会等名: ITP2012
  • 発表場所: Baltimore, USA
• [学会発表] Effect of flow patterns on the determinations of metal ions using sequential injection system coupled with anodic stripping voltammetry (2012)
  • 著者名/発表者名: Eakkasit Punrat, Takashi Kaneta, Suchada Chuanuwatanakul, Shoji Motomizu, Orawon Chailapakul
  • 学会等名: Flow analysis XII
  • 発表場所: Greece
• [学会発表] Method development for the determination of arsenic by sequential injection/anodic stripping voltammetry using long-lasting gold film-modified screen-printed carbon electrode (2012)
  • 著者名/発表者名: Eakkasit Punrat, Takashi Kaneta, Suchada Chuanuwatanakul, Shoji Motomizu, Orawon Chailapakul
  • 学会等名: Flow analysis XII
  • 発表場所: Greece
• [学会発表] スクリーンプリントカーボン電極(SPCE)を用いるSIA/ボルタンメトリーによるヒ素の高感度定量 (2012)
  • 著者名/発表者名: Eakkasit Punrat,Suchada Chuanuwatanakul,Orawon Chailapakul,樋口慶郎,本水昌二,金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] シーケンシャルインジェクション/SPCE ボルタンメトリー用フローセルの試作 (2012)
  • 著者名/発表者名: Eakkasit Punrat,Suchada Chuanuwatanakul,Orawon Chailapakul,樋口慶郎,本水昌二,金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] キャピラリー電気泳動によるグアノシンゲルの分子認識能評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口佳織,金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] 二色レーザー励起蛍光検出・キャピラリー電気泳動による生体高分子複合体計測法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 田原彩裕美,金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] フロー分析用電気化学発光検出の開発とアスコルビン酸分析への応用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 赤瀬大祐,金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] キャピラリー電気泳動法による水溶液内イオン会合の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 東谷直樹、金田隆
  • 学会等名: 第18回中国四国支部分析化学若手セミナー
  • 発表場所: 山口
• [学会発表] キャピラリー電気泳動法による多重標識タンパク質の分離計測 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金地啓介、金田隆
  • 学会等名: 第18回中国四国支部分析化学若手セミナー
  • 発表場所: 山口
• [学会発表] 二波長検出キャピラリー電気泳動法によるタンパク質の標識効率の評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金地啓介,高柳俊夫,金田隆
  • 学会等名: 第72回分析化学討論会
  • 発表場所: 鹿児島
• [学会発表] キャピラリー電気泳動法によるテトラフェニルボレート誘導体と一価陽イオンの水溶液内イオン会合解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 東谷直樹,高柳俊夫,金田隆
  • 学会等名: 第72回分析化学討論会
  • 発表場所: 鹿児島
• [学会発表] キャピラリー電気泳動法によるテトラフェニルボレート誘導体と一価陽イオンの水溶液内イオン会合解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 東谷直樹，高柳俊夫，金田隆
  • 学会等名: 第72回分析化学討論会
  • 発表場所: 鹿児島大学
• [学会発表] 二波長検出キャピラリー電気泳動法によるタンパク質の標識効率の評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金地啓介，高柳俊夫，金田隆
  • 学会等名: 第72回分析化学討論会
  • 発表場所: 鹿児島大学
• [学会発表] キャピラリー電気泳動法による多重標識タンパク質の分離計測 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金地啓介、金田隆
  • 学会等名: 第18回中国四国支部分析化学若手セミナー
  • 発表場所: 山口県セミナーパーク
• [学会発表] キャピラリー電気泳動法による水溶液内イオン会合の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 東谷直樹、金田隆
  • 学会等名: 第18回中国四国支部分析化学若手セミナー
  • 発表場所: 山口県セミナーパーク
• [学会発表] フロー分析用電気化学発光検出の開発とアスコルビン酸分析への応用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 赤瀬大祐，金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学
• [学会発表] 二色レーザー励起蛍光検出・キャピラリー電気泳動による生体高分子複合体計測法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 田原彩裕美，金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学
• [学会発表] キャピラリー電気泳動によるグアノシンゲルの分子認識能評価 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口佳織，金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学
• [学会発表] シーケンシャルインジェクション/SPCEボルタンメトリー用フローセルの試作 (2012)
  • 著者名/発表者名: akkasit Punrat，Suchada Chuanuwatanakul，Orawon Chailapakul，樋口慶郎，本水昌二，金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学
• [学会発表] スクリーンプリントカーボン電極（SPCE）を用いるSIA/ボルタンメトリーによるヒ素の高感度定量 (2012)
  • 著者名/発表者名: Eakkasit Punrat，Suchada Chuanuwatanakul，Orawon Chailapakul，樋口慶郎，本水昌二，金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学
• [学会発表] Determination of Polyamines in Arabidopsis by Capillary Electrophoresis Using Salicylaldehyde-5-sulfonate as a Derivatizing Reagent (2012)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Genki, Inoue, Toshio Takayanagi, Junichi Kakehi, Hiroyasu Motose, Taku Takahashi
  • 学会等名: ITP2012
  • 発表場所: U.S.A.
• [学会発表] 二色レーザー励起蛍光検出による糖タンパク質の選択的検出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金田隆，田原彩裕美
  • 学会等名: 第32回キャピラリー電気泳動シンポジウム
  • 発表場所: 産業技術総合研究所関西センター
• [学会発表] フロー分析用電気化学発光検出の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 赤瀬大祐，金田隆
  • 学会等名: 第29 回イオンクロマトグラフィー討論会
  • 発表場所: 岡山理科大
• [学会発表] グアノシンゲルの分子認識能評価の研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山口 佳織，金田隆
  • 学会等名: 第29 回イオンクロマトグラフィー討論会
  • 発表場所: 岡山理科大
• [学会発表] Determination of Multidrug Resistance Protein 1 by Capillary Electrophoresis Immunoassay in Cancer Cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Julius Mbuna, Totaro Imasaka
  • 学会等名: ICAS2011
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-05-25
• [学会発表] Determination of DNA in Single Cells by Capillary Electrophoresis (2011)
  • 著者名/発表者名: Shinya Kato, Takashi Kaneta, Totaro Imasaka
  • 学会等名: ICAS2011
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2011-05-24
• [学会発表] 薄膜修飾したカーボン電極を用いるシーケンシャルインジェクション-アノーディックストリッピングボルタンメトリーによるヒ素(III)の定量 (2011)
  • 著者名/発表者名: Eakkasit PUNRAT, 高柳俊夫, Suchada CHUANUWATANAKUL, 金田隆, 本水昌二, Orawon CHAILAPAKUL
  • 学会等名: 第49回フローインジェクション分析講演会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] サリチルアルデヒド-5-スルホン酸を誘導体化試薬として用いたキャピラリーゾーン電気泳動法によるポリアミンの分離定量 (2011)
  • 著者名/発表者名: 井上源貴,金田隆,高柳俊夫
  • 学会等名: 日本分析化学会第60年会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] ポリアクリルアミドゲルから抽出したDNAの構造変化 (2011)
  • 著者名/発表者名: 金田隆,小倉丈人,大和修平,今坂藤太郎
  • 学会等名: 日本分析化学会第60年会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Determination of DNA in Single Cells by Capillary Electrophoresis (2011)
  • 著者名/発表者名: Shinya Kato, Takashi Kaneta, Totaro Imasaka
  • 学会等名: ICAS2011
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] Determination of Multidrug Resistance Protein 1 by Capillary Electrophoresis Immunoassay in Cancer Cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta, Julius Mbuna, Totaro Imasaka
  • 学会等名: ICAS2011
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] レーザーを用いた高性能分離・分析法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金田隆
  • 学会等名: 日本分析化学会北海道支部公開セミナー
  • 発表場所: 北見
  • 年月日: 2010-11-19
• [学会発表] キャピラリー電気泳動による単一細胞中のDNA計測 (2010)
  • 著者名/発表者名: 加藤慎也,金田隆,今坂藤太郎
  • 学会等名: 2010 年日本化学会西日本大会
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] 制限酵素法/キャピラリーシービング電気泳動法によるメチル化DNA分析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 金田隆,大和修平,今坂藤太郎
  • 学会等名: 日本分析化学会第59年会
  • 発表場所: 仙台
• [学会発表] ポストカラム誘導体化レーザー励起蛍光検出/キャピラリーシービング電気泳動による生体試料中のタンパク質分析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小倉丈人,金田隆,今坂藤太郎
  • 学会等名: 日本分析化学会第59年会
  • 発表場所: 仙台
• [学会発表] Analysis of Proteins by Capillary Sieving Electrophoresis with Postcolumn Derivatization/Laser-Induced Fluorescence Detection (2010)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kaneta,Takehito Ogura,Totaro Imasaka
  • 学会等名: ITP2010
  • 発表場所: Baltimore, USA
• [学会発表] MEKC Investigation on in vitro Accumulation of Anthracyclines Enhanced by Inhibition of Protein Pumps in Cancer Cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Mbuna Julius,金田隆,今坂藤太郎
  • 学会等名: 第71回分析化学討論会
  • 発表場所: 松江
• [備考]
  • URL: http://chem.okayama-u.ac.jp/~analytical/home_j.html
• [備考] 岡山大学大学院自然科学研究科（理学系） 分析化学研究室
  • URL: http://chem.okayama-u.ac.jp/~analytical/home_j.html