金属タンパク質、高分子タンパク質複合体の質量分析法の開発

• 研究課題/領域番号: 22370040
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 高尾 敏文 大阪大学, 蛋白質研究所, 教授 (10197048)
• 連携研究者: 奥村 宣明 大阪大学, たんぱく質研究所, 准教授 (20224173)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 18,200千円 (直接経費: 14,000千円、間接経費: 4,200千円); 2012年度: 5,720千円 (直接経費: 4,400千円、間接経費: 1,320千円); 2011年度: 6,370千円 (直接経費: 4,900千円、間接経費: 1,470千円); 2010年度: 6,110千円 (直接経費: 4,700千円、間接経費: 1,410千円)
• キーワード: 蛋白質複合体 / 金属蛋白質 / エレクトロスプレーイオン化質量分析 / ネイティブ状態 / 金属イオン / 化学量論 / タンパク質 / エレクトロスプレーイオン化 / 脱アミド化 / 異性化 / 銅イオン / β2－ミクログロブリン / 質量分析 / 酵素 / 生体分子 / 分析科学

研究概要

エレクトロスプレーイオン化(ESI)質量分析計(既設)のイオン源において、高m/z領域(4000以上)でのイオン透過率を向上させるための改良を行い、高分子量蛋白質複合体をネイティブ状態(蛋白質水溶液を中性pH、pmol程度の低濃度の生理的状態に近い条件で調製)で質量分析できる方法を開発した。本装置により、種々の蛋白質複合体の化学量論や金属蛋白質における金属イオンの配位特性(種類と化学量論)を調べることが可能となった。

研究成果

• [雑誌論文] Quantitative Analysis of Deamidation and Isomerization in β2-Microglobulin by 18O Labeling (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuda M, Takao T
  • 雑誌名: Anal. Chem 巻: 84 ページ: 10388-10394
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association of aureolic acid antibiotic, chromomycin A3 with Cu(2+) and its negative effect upon DNA binding property of the antibiotic (2012)
  • 著者名/発表者名: Lahiri S, Takao T, Devi PG, Ghosh S, Ghosh A, Dasgupta A, Dasgupta D
  • 雑誌名: Biometals 巻: 25 ページ: 435-450
  • 査読あり
• [雑誌論文] Significance of AlanineAminopeptidase N (APN) in Bile in the Diagnosis of Acute Cellular Rejection After Liver Transplantation (2012)
  • 著者名/発表者名: Kim C, Aono S, Marubashi S, Wada H, Kobayashi S, Eguchi H, Takeda Y, Tanemura M, Okumura N, Takao T, Doki Y, Mori M, Nagano H.
  • 雑誌名: J Surg Res 巻: 175 ページ: 138-148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quantitative Analysis of Deamidation and Isomerization in β2-Microglobulin by 18O Labeling (2012)
  • 著者名/発表者名: Masafumi Fukuda
  • 雑誌名: Analytical Chemistry 巻: 84 号: 23 ページ: 10388-10394
  • DOI: 10.1021/ac302603b
  • 査読あり
• [雑誌論文] Significance of Alanine Aminopeptidase N (APN) in Bile in the Diagnosis of Acute Cellular Rejection After Liver IVansplantation (2012)
  • 著者名/発表者名: Kim C, et al
  • 雑誌名: J.Surg.Res. 巻: 175 ページ: 138-148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Charge state-selective separation of peptides by reversible modification of amino groups and strong cation-exchange chromatography: evaluation in proteomic studies using peptide-centric database searches. (2011)
  • 著者名/発表者名: Betancourt LH, Sanchez A, Perez Y, Fernandez de Cossio J, Gil J, Toledo P, Iguchi S, Aimoto S, Gonzalez LJ, Padron G, Takao T, Besada V.
  • 雑誌名: J. Proteomics. 巻: 74 ページ: 2210-2213
  • 査読あり
• [雑誌論文] A screen for potential ferredoxin electron transfer partners uncovers new, redox dependent interactions (2011)
  • 著者名/発表者名: Hanke GT, Satomi Y, Shinmura K, Takao T, Hase T.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta. 巻: 1814 ページ: 366-374
  • 査読あり
• [雑誌論文] Charge state-selective separation of peptides by reversible modification of amino groups and strong cation-exchange chromatography : evaluation in proteomic studies using peptide-centric database searches (2011)
  • 著者名/発表者名: Betancourt LH, et al
  • 雑誌名: J.Proteomics. 巻: 74 ページ: 2210-2213
  • 査読あり
• [雑誌論文] A screen for potential ferredoxin electron transfer partners uncovers new, redox dependent interactions. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hanke GT, et al.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta 巻: 1814 ページ: 366-374
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of C4.4A at the invasive front is a novel prognostic marker for disease recurrence of colorectal cancer (2010)
  • 著者名/発表者名: Konishi K, Yamamoto H, Mimori K, Takemasa I, Mizushima T, Ikeda M, Sekimoto, M, Matsuura N, Takao T, Doki Y, Mori M.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 101(10) ページ: 2269-2277
  • NAID: 10027832873
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of C4.4A at the invasive front is a novel prognostic marker for disease recurrence of colorectal cancer. (2010)
  • 著者名/発表者名: Konishi K, et al.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 101 ページ: 2269-2277
  • 査読あり
• [雑誌論文] Distribution of neuroendocrine regulatory peptide-1 and -2, and proteolytic processing of their precursor VGF protein in the rat. (2010)
  • 著者名/発表者名: Mishiro-Sato E, et al.
  • 雑誌名: J Neurochem. 巻: 114 ページ: 1097-1106
  • 査読あり
• [学会発表] Quantitative analysis of deamidation and isomerization in β2-microglobulin by 18O labeling (2013)
  • 著者名/発表者名: ukuda M, Takao T
  • 学会等名: The 8th Annual Meeting of Nine Life Science InstitutesAffiliated with the National University in Japan
  • 発表場所: Kyoto University, Kyoto
• [学会発表] Quantitative analysis of deamidation and isomerization in β2-microglobulin by 18O labeling (2013)
  • 著者名/発表者名: Masafumi Fukuda
  • 学会等名: The 8th Annual Meeting of Nine Life Science Institutes Affiliated with the National University in Japan
  • 発表場所: Kyoto University, Kyoto
• [学会発表] Mass Spectrometric Strategies for the Analysis of Posttranslational Modifications (2012)
  • 著者名/発表者名: Takao T
  • 学会等名: IPR International Symposium 2012
  • 発表場所: Senri-Hankyu Hotel Suita
  • 年月日: 2012-11-22
• [学会発表] プロテオミクスによるバイオマーカー探索 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高尾敏文
  • 学会等名: 生物分子システムに基づく創薬科学フロンティア研究成果発表会y
  • 発表場所: 京都薬科大学(招待講演)
  • 年月日: 2012-02-18
• [学会発表] Mass Spectrometry for Analysis of Posttranslational Modifications (2012)
  • 著者名/発表者名: Takao T
  • 学会等名: Recent Advances in Chemical & Physical Biology Organized by Saha Institute ofNuclear Physics & Mechanobiology Institute, National University of Singapore
  • 発表場所: Kolkata,India.
• [学会発表] プロテオミクスによるバイオマーカー探索 (2012)
  • 著者名/発表者名: 高尾敏文
  • 学会等名: 平成23 年度文部科学省私立大学戦略的基盤研究形成事業, 「生物分子システムに基づく創薬科学フロンティア研究」
  • 発表場所: 京都薬科大学、京都
• [学会発表] Mass Spectrometric Strategies for the Analysis of Posttranslational Modifications (2012)
  • 著者名/発表者名: Toshifumi Takao
  • 学会等名: IPR International Symposium 2012
  • 発表場所: Senri-Hankyu Hotel, Suita
• [学会発表] Mass Spectrometry for Analysis of Post-translational Modifications (2012)
  • 著者名/発表者名: Takao T
  • 学会等名: Recent Advances in Chemical and Physical Biology
  • 発表場所: Saha Institute of Nuclear Physics, India(招待講演)
• [学会発表] Analysis of Dimer Formation of Carnosine Dipeptidase 2 (CNDP2) by ESI-TOF/MS (2011)
  • 著者名/発表者名: Okumura N, Tamura J, Takao T
  • 学会等名: The 59thAnnual Conference on Mass Spectrometry
  • 発表場所: Hotel Hankyu Expo Park, Suita
• [学会発表] Mass spectrometry for analysis of posttranslational modifications (2010)
  • 著者名/発表者名: Takao T
  • 学会等名: The 1st International Symposium on Recent Advance in Medical Proteomics Organized by Yokohama City University
  • 発表場所: Yokohama.
  • 年月日: 2010-09-16
• [学会発表] Mass Spectrometry for Analysis of Posttranslational Modifications (2010)
  • 著者名/発表者名: Toshifumi Takao
  • 学会等名: The 1st International Symposium on Recent Advance in Medical Proteomics
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 2010-09-16
• [図書] "新規タンパク質の発見法"日本医事新報 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高尾敏文
  • 総ページ数: 87
• [図書] "疾患・バイオマーカー探索"生化学 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高尾敏文