小脳プルキンエ細胞が複雑かつ秩序立った形態の樹状突起を形成する分子機構の解析

• 研究課題/領域番号: 22500312
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経解剖学・神経病理学
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 田中 正彦 名古屋市立大学, 大学院・薬学研究科, 准教授 (60267953)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2012年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2011年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2010年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: プルキンエ細胞 / 樹状突起 / 小脳 / siRNA / 単一細胞エレクトロポレーション / 細胞培養 / 切片培養 / 形態形成

研究概要

小脳プルキンエ細胞が複雑かつ秩序立った形態の樹状突起を形成する分子機構を明らかにするために、培養プルキンエ細胞に対して様々な遺伝子のsiRNA を単一細胞エレクトロポレーションを用いて導入し、樹状突起形成への影響を調べた。リアノジン受容体、CaM kinase、myosin Vaが、それぞれ独自の働き方で樹状突起形成に関与することを発見した。また、単一細胞エレクトロポレーションを用いた遺伝子強制発現系や、小脳切片と分散プルキンエ細胞との共培養実験系を確立した。

研究成果

• [雑誌論文] Detection of asymmetric distribution of phospholipids by fluorescence resonance energy transfer (2012)
  • 著者名/発表者名: 西村陽子、田所哲、田中正彦、平嶋尚英
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 420巻 ページ: 926-930
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term gene-silencing effects of siRNA introduced by single-cell electroporation into postmitotic CNS neurons (2011)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦、朝岡みなみ、柳川右千夫、平嶋尚英
  • 雑誌名: Neurochemical Research 巻: 36巻 ページ: 1482-1489
  • 査読あり
• [雑誌論文] A role for myosin Va in cerebellar plasticity and motor learning: a possible mechanism underlying neurological disorder in myosin Va disease (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮田麻理子、岸本泰司、田中正彦、橋本浩一、平嶋尚英、村田善晴、狩野正伸、高岸芳子
  • 雑誌名: Journal of Neuroscience 巻: 31巻 ページ: 6067-6078
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term gene silencing effects of siRNA introduced by single-cell electroporation into postmitotic CNS neurons. (2011)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦、朝岡みなみ、柳川右千夫、平嶋尚英
  • 雑誌名: Neurochemical Research 巻: (未定 印刷中)
  • 査読あり
• [雑誌論文] A role for myosin Va in cerebellar plasticity and motor learning : a possible mechanism underlying neurological disorder in myosin Va disease. (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮田麻理子、岸本泰司、田中正彦, 他5名
  • 雑誌名: Journal of Neuroscience 巻: 31 ページ: 6067-6078
  • 査読あり
• [雑誌論文] 培養神経細胞におけるGFPイメージングを用いた単一細胞レベルでのRNA干渉効果の解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 雑誌名: バイオイメージング 巻: 19巻 ページ: 9-13
  • NAID: 10027006710
• [学会発表] 単一細胞エレクトロポレーションを用いた初代培養神経細胞における遺伝子強制発現系の開発 (2013)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-29
• [学会発表] マスト細胞のエクソサイトーシスにおける微小管依存性の分泌顆粒輸送機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 平嶋尚英
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2013-03-29
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞の樹状突起形成へのCa^<2+> /カルモジュリン依存性蛋白質リン酸化酵素の関与 (2012)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: MBSJ2012(第35回日本分子生物学会年会)
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-12-12
• [学会発表] メラノサイトからケラチノサイトへのメラニン移行におけるSNARE蛋白質の関与 (2012)
  • 著者名/発表者名: 亀川沙知
  • 学会等名: MBSJ2012(第35回日本分子生物学会年会)
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2012-12-12
• [学会発表] Dendrite formation of cerebellar Purkinje cells is promoted by ryanodine receptors expressed by Purkinje and granule cells (2012)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuroscience 2012 (42nd Annual Meeting of Society for Neuroscience)
  • 発表場所: New Orleans, LA, USA
  • 年月日: 2012-10-14
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞の樹状突起形成はプルキンエ細胞だけでなく顆粒細胞が発現するリアノジン受容体によっても促進される (2012)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuroscience2012(第35回日本神経科学大会)
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2012-09-21
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞の樹状突起形成に関与するカルシウムシグナリング分子の探索 (2012)
  • 著者名/発表者名: 堀江侑季
  • 学会等名: Neuroscience2012(第35回日本神経科学大会)
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2012-09-21
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞の樹状突起形成におけるリアノジン受容体の機能解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] Roles of ryanodine receptor 1 and 2 in dendrite formation of cerebellar Purkinje cells (2011)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: MBSJ2011(第34回日本分子生物学会年会)
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞樹状突起形成におけるリアノジン受容体の役割、日本病院薬剤師会東海ブロック (2011)
  • 著者名/発表者名: 大橋令
  • 学会等名: 日本薬学会東海支部 合同学術大会2011
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-11-23
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞樹状突起形成におけるリアノジン受容体の役割 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大橋令
  • 学会等名: 日本病院薬剤師会東海ブロック日本薬学会東海支部合同学術大会2011
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-11-23
• [学会発表] The role of ryanodine receptors in dendrite formation of cerebellar Purkinje cells (2011)
  • 著者名/発表者名: 大橋令
  • 学会等名: Neuroscience2011(第34回日本神経科学大会)
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-09-16
• [学会発表] Effects of myosin Va knockdown by single-cell electroporation of siRNA in cerebellar Purkinje cells (2011)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuroscience2011(第34回日本神経科学大会)
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-09-15
• [学会発表] Single-cell electroporation technique applied to cultured cerebellar neurons、単一細胞エレクトロポレーションによるsiRNA導入を用いた小脳プルキンエ細胞におけるmyosin Va発現抑制効果の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: 日本薬学会第131年会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2011-03-30
• [学会発表] 単一細胞エレクトロポレーションによるsiRNA導入を用いた小脳プルキンエ細胞におけるmyosin Va発現抑制効果の解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: 日本薬学会第131年会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2011-03-30
• [学会発表] Long-term gene-silencing effects of small interfering RNA transferred by single-cell electroporation in cerebellar Purkinje neurons in vitro (2010)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会 第83回日本生化学会大会 合同大会)
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] Long-term gene silencing effects of small interfering RNA transferred by single-cell electroporation in cerebellar Purkinje neurons in vitro. (2010)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: BMB2010(第33回日本分子生物学会年会 第83回日本生化学会大会 合同大会)
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] Long-term monitoring of effects of small interfering RNA introduced by single-cell electroporation in cultured cerebellar neurons (2010)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuroscience 2010 (40th Annual Meeting of Society for Neuroscience)
  • 発表場所: San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2010-11-16
• [学会発表] Long-term monitoring of effects of small interfering RNA introduced by single-cell electroporation in cultured cerebellar neurons. (2010)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuroscience 2010(40th annual meeting of society for neuroscience)
  • 発表場所: San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2010-11-16
• [学会発表] Single-cell electroporation technique applied to cultured cerebellar neurons (2010)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuro2010(第33回日本神経科学大会 第53回日本神経化学会大会 第20回日本神経回路学会大会 合同大会)
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-09-02
• [学会発表] Single cell electroporation technique applied to cultured cerebellar neurons. (2010)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuro2010(第33回日本神経科学大会 第53回日本神経化学会大会 第20回日本神経回路学会大会 合同大会)
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-09-02
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞の樹状突起形成はプルキンエ細胞だけでなく顆粒細胞が発現するリアノジン受容体によっても促進される
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuroscience2012（第35回日本神経科学大会）
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞の樹状突起形成に関与するカルシウムシグナリング分子の探索
  • 著者名/発表者名: 堀江侑季
  • 学会等名: Neuroscience2012（第34回日本神経科学大会）
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Dendrite formation of cerebellar Purkinje cells is promoted by ryanodine receptors expressed by Purkinje and granule cells
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: Neuroscience 2012（42nd Annual Meeting of Society for Neuroscience）
  • 発表場所: New Orleans, USA
• [学会発表] メラノサイトからケラチノサイトへのメラニン移行におけるSNARE蛋白質の関与
  • 著者名/発表者名: 亀川沙知
  • 学会等名: MBSJ2012（第35回日本分子生物学会年会）
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] 小脳プルキンエ細胞の樹状突起形成へのCa2+／カルモジュリン依存性蛋白質リン酸化酵素の関与
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 学会等名: MBSJ2012（第35回日本分子生物学会年会）
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] マスト細胞のエクソサイトーシスにおける微小管依存性の分泌顆粒輸送機構
  • 著者名/発表者名: 原田広翔
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: 横浜
• [図書] Single-cell electroporation of siRNA in primary neuronal cultures、In: Neuromethods Vol. 65 Controlled Genetic Manipulations (2012)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 出版者: Springer (New York)
• [図書] Single-cell electroporation of siRNA in primary neuronal cultures (2012)
  • 著者名/発表者名: 田中正彦
  • 総ページ数: 11
  • 出版者: Springer (New York)
• [備考]
  • URL: http://www.phar.nagoya-cu.ac.jp/research_course/res_course05.html
• [備考] 生体超分子システム解析学
  • URL: http://www.phar.nagoya-cu.ac.jp/research_course/res_course05.html
• [備考]
  • URL: http://www.phar.nagoya-cu.ac.jp/research_course/res_course05.html
• [備考]
  • URL: http://www.phar.nagoya-cu.ac.jp/research_course/res_course05.html