網膜視蓋投射・視蓋層形成機構の解析

• 研究課題/領域番号: 22570199
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 発生生物学
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 仲村 春和 東北大学, 大学院・生命科学研究科, 教授 (90079690)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2012年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2011年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2010年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 網膜視蓋投射 / 視蓋層形成 / ニワトリ胚 / エレクトロポレーション / Engrailed / 視蓋 / 層形成 / Tet-on / En2 / スライスカルチャー / 動画 / 層構築 / Er81

研究概要

視神経繊維の大部分は視蓋の表層を走り、標的付近で内側に向きを変えシナプスを作るが、本研究により、最初から視蓋の深層を走る一過性の一群があることが明らかにされた。En2は視蓋の発生初期に後ろとしての位置価を与えるが、視神経が視蓋に到達した頃に、SGFS,g-j層で発現している。En2の強制発現により、En2発現細胞は視蓋の浅層に到達することはなかった。E1.5にEn2をトランスフェクトし、Doxによりその発現をE8.5に誘導すると、浅層でEn2を発現した細胞はi層に戻っていった。このことから、En2が視蓋総計性に深く関わっていることが示唆された。Neuropilin1(NRP1)がE8.5視蓋のIV,V層に、そのリガンドSema3AがVI層に発現している。IV,V層の細胞は接戦方向の移動をする細胞により構成されることが本研究により明らかとなった。その接戦方向の移動にSema-Neuropilinの反発系が関与していることが示唆された。Sema3Aを強制発現すると視蓋の層構造が乱れることから、semaphorin-neuropilinの反発系が視蓋の総計性に大きな役割を果たしていることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Electroporation: Past, present and future (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, H., Funahashi, J.
  • 雑誌名: Dev Growth Differ 巻: 55 ページ: 15-19
  • DOI: 10.1007/978-1-60327-483-8_27
  • NAID: 40019549265
  • ISBN: 9781588294319, 9781603274838
  • 査読あり
• [雑誌論文] Coactosin accelerates cell dynamism by promoting actin polymerization (2013)
  • 著者名/発表者名: Hou, X., Katahira, T., Ohashi, K., Mizuno, K., Sugiyama, S., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev Biol 巻: 379 号: 1 ページ: 53-63
  • DOI: 10.1016/j.ydbio.2013.04.006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Electroporation: Past, present and future (2013)
  • 著者名/発表者名: Harukazu Nakamura and Junichi Funahashi
  • 雑誌名: Develop. Growth Differ 巻: 55 号: 1 ページ: 15-19
  • DOI: 10.1111/dgd.12012
  • NAID: 40019549265
  • 査読あり
• [雑誌論文] Optogenetic Probing and Manipulation of the Calyx-Type Presynaptic Terminal in the Embryonic Chick Ciliary Ganglion. (2013)
  • 著者名/発表者名: Egawa, R., Hososhima, S., Hou, X., Katow, H, S., Ishizuka, T. Nakamura, H., and Yawo, H.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 8 号: 3 ページ: e59179-e59179
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0059179
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nuclear translocation of intracellular domain of PRTG by proteolytic cleavage (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, Y., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev. Growth Differ 巻: 54 号: 2 ページ: 167-176
  • DOI: 10.1111/j.1440-169x.2011.01315.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nuclear translocation of FGF8 and its implication to induce Sprouty2 (2012)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, A., Harada, H. Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev Growth Differ 巻: 54 (4) 号: 4 ページ: 463-473
  • DOI: 10.1111/j.1440-169x.2012.01332.x
  • NAID: 10031136917
  • 査読あり
• [雑誌論文] Otx2 is involved in the regional specification of the developing retinal pigment epithelium by preventing the expression of sox2 and fgf8, factors that induce neural retina differentiation (2012)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Nishihara, Ichiro Yajima, Hiromasa Tabata, Masato Nakai, Nagaharu Tsukiji, Tatsuya Katahira, Kazuhisa Takeda, Shigeki Shibahara, Harukazu Nakamura, Hiroaki Yamamoto
  • 雑誌名: PLoS One 巻: e48879 号: 11 ページ: e48879-e48879
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0048879
  • 査読あり
• [雑誌論文] 脊椎動物の脳はいかにしてかたちづくられるか (2012)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和
  • 雑誌名: 日仏生物学会誌 巻: 52 ページ: 4-15
• [雑誌論文] Genetically-defined lineage tracing of Nkx2.2-expressing cells in chick spinalcord (2011)
  • 著者名/発表者名: Gotoh H, Ono K, Takebayashi H, Harada H, Nakamura H, Ikenaka
  • 雑誌名: Dev. Biol 巻: 349 号: 2 ページ: 504-511
  • DOI: 10.1016/j.ydbio.2010.10.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Conditional knockdown of target gene expression by tetracycline regulated transcription of double strand RNA (2011)
  • 著者名/発表者名: Hou, X., Omi, M., Harada, H., Ishii, S., Takahashi, Y., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev Growth Differ 巻: 53 号: 1 ページ: 69-75
  • DOI: 10.1111/j.1440-169x.2010.01229.x
  • NAID: 10027899337
  • 査読あり
• [雑誌論文] Protogenin mediates cell adhesion for ingression and re-epithelialization of the paraxial mesodermal cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Ito, K., Nakamura, H., Watanabe, Y.
  • 雑誌名: Dev Biol 巻: 351 号: 1 ページ: 13-24
  • DOI: 10.1016/j.ydbio.2010.11.024
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of retinotectal projection pathway in the deep tectal laminae in the chick (2011)
  • 著者名/発表者名: Omi, M., Harada, H., Nakamura, H.
  • 雑誌名: J Comp Neurol 巻: 519 号: 13 ページ: 2615-2621
  • DOI: 10.1002/cne.22642
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of retinotectal projection pathway in the deep tectal laminae in the chick (2011)
  • 著者名/発表者名: Omi M, Harada H, Nakamura H.
  • 雑誌名: J Comp Neurol. 巻: 519 ページ: 2615-2621
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetically-defined lineage tracing of Nkx2.2-expressing cells in chick spinal cord (2011)
  • 著者名/発表者名: Gotoh H, Ono K, Takebayashi H, Harada H, Nakamura H, Ikenaka
  • 雑誌名: Dev.Biol. 巻: 349 ページ: 504-511
  • 査読あり
• [雑誌論文] Conditional knockdown of target gene expression by tetracycline regulated transcription of double strand RNA (2011)
  • 著者名/発表者名: Hou, X., Omi, M., Harada, H., Ishii, S., Takahashi, Y., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev.Growth Differ 巻: 53 ページ: 69-75
  • NAID: 10027899337
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of Ras-ERK pathway by Fgf8 and its downregulation by Sprouty2 for the isthmus organizing activity (2010)
  • 著者名/発表者名: Suzuki-Hirano, A., Harada, H., Sato, T., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev. Biol 巻: 337 号: 2 ページ: 284-293
  • DOI: 10.1016/j.ydbio.2009.10.044
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gene manipulation of chick embryos in vitro, EC culture, and long survival in transplanted eggs (2010)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, J., Harada, H., Ito, K., Ogura, T., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev Growth Differ 巻: 52 号: 7 ページ: 629-634
  • DOI: 10.1111/j.1440-169x.2010.01198.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Activation of Ras-ERK pathway by Fgf8 and its downregulation by Sprouty2 for the isthmus organizing activity (2010)
  • 著者名/発表者名: Suzuki-Hirano, A., Harada, H., Sato, T., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev.Biol. 巻: 337 ページ: 284-293
  • 査読あり
• [雑誌論文] Gene manipulation of chick embryos in vitro, EC culture, and long survival in transplanted eggs (2010)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, J., Harada, H., Ito, K., Ogura, T., Nakamura, H.
  • 雑誌名: Dev.Growth Differ. 巻: 52 ページ: 629-634
  • 査読あり
• [学会発表] 脊椎動物脳の領域化のメカニズム (2012)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和
  • 学会等名: 埼玉大学研究機構・脳科学融合研究センターシンポジウム「脳の発生・発達とその破綻の理解をめざして」
  • 発表場所: 埼玉大学
  • 年月日: 2012-10-06
• [学会発表] Conditional knockdown of target gene expression: Tet-on of transcription of double strand RNA. Chick 7: Avian Model Systems (2012)
  • 著者名/発表者名: Hou, X., Omi, M., Harada, H., Ishii, S., Takahashi, Y., Nakamura, H.
  • 学会等名: 7th International Chick Meeting
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Time-lapse imaging system with shell-less culture chamber. Chick 7: Avian Model Systems (2012)
  • 著者名/発表者名: Funahashi, J., Nakamura, H.
  • 学会等名: 7th International Chick Meeting
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Chair of the Organizers (2012)
  • 著者名/発表者名: Harukazu Nakamura
  • 学会等名: Chick 7: Avian Model Systems, 7^<th> International Chick Meeting
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Conditional knockdown of target gene expression: Tet-on of transcription of double strand RNA. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hou, X., Omi, M., Harada, H., Ishii, S., Takahashi, Y., Nakamura, H.
  • 学会等名: Chick 7: Avian Model Systems, 7th International Chick Meeting.
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Class 3 semaphorins regulate tectal laminar formation (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, Y., Nakamura, H.
  • 学会等名: Joint Meeting of JSDB 45th and JSCB 64th
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Involvement of En2 in tectal laminar formation in chick embrhyos (2012)
  • 著者名/発表者名: Omi, M., Watanabe, Y., Nakamura, H.
  • 学会等名: Joint Meeting of JSDB 45th and JSCB 64th
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] 脊椎動物脳の領域化のメカニズム (2012)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和
  • 学会等名: 埼玉大学研究機構・脳科学融合研究センターシンポジウム
  • 発表場所: 埼玉
• [学会発表] Class 3 semaphorins regulate tectal laminar formation (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, Y., Nakamura, H.
  • 学会等名: Joint Meeting of JSDB 45th and JSCB 64th
  • 発表場所: Kobe
• [学会発表] Ivolvement of En2 in tectal laminar formation in chick embrhyos (2012)
  • 著者名/発表者名: Omi, M., Watanabe, Y., Nakamura, H.
  • 学会等名: Joint Meeting of JSDB 45th and JSCB 64th
  • 発表場所: Kobe
• [学会発表] Possibility of FGF8 as a nuclear factor. Third UCL-Tohoku University Joint Symposium (2011)
  • 著者名/発表者名: Suzuki A, Harada H, Nakamura H
  • 学会等名: From Cell/Developmental Biology to Human Deseases. London
  • 発表場所: Great Britain
  • 年月日: 2011-10-19
• [学会発表] From Cell/Developmental Biology to human diseases,Organizers (2011)
  • 著者名/発表者名: Harukazu Nakamura & Shinichi Ohnuma
  • 学会等名: UCL-Tohoku University Symposium
  • 発表場所: London, Great Britain
  • 年月日: 2011-10-19
• [学会発表] アクチン結合タンパク質、コアクトシンの発達期ニワトリ胚毛様体神経節における局在-Localization of the actin binding protein, coactosin that expressed in the developing chick ciliary ganglion- (2011)
  • 著者名/発表者名: 細島頌子, 侯旭濱, 石塚徹, 仲村春和, 八尾寛
  • 学会等名: 第34回日本神経科学大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-09-17
• [学会発表] 私たちの脳はいかにして作られ、機能するようになるか (2011)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和
  • 学会等名: 第44回日本発生生物学会
  • 発表場所: 沖縄(招待講演)
  • 年月日: 2011-05-24
• [学会発表] Involvement of Pax6 in the retinal pigment epithelium development (2011)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Nishihara, Akiha Kawasaki-Nishihara, Nagahara Tsukiji, Harukazu Nakamura, Hiroaki Yamamoto
  • 学会等名: 第44回日本発生生物学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2011-05-20
• [学会発表] Two modes of tangential cell migration in the developing chick optic tectum (2011)
  • 著者名/発表者名: Yuji Watanabe, Harukazu Nakamura
  • 学会等名: 第44回日本発生生物学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2011-05-19
• [学会発表] Novel retinal fiber pathway in the deep laminae of the developing chick optic tectum (2011)
  • 著者名/発表者名: Minoru Omi, Hidekiyo Harada, Harukazu Nakamura
  • 学会等名: 第44回日本発生生物学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2011-05-19
• [学会発表] Fgf8 may function as a nuclear factor (2011)
  • 著者名/発表者名: Ayumu Suzuki, Hidekiyo Harada, Harukazu Nakamura
  • 学会等名: 第44回日本発生生物学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2011-05-19
• [学会発表] Essential roll of SOX5 in the semicircular canal development of zebrafish (2011)
  • 著者名/発表者名: Sympei Tanino, Gembu Abe, Koichi Kawakami, Harukazu Nakamura, Jun-ichi Funahashi
  • 学会等名: 第44回日本発生生物学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2011-05-19
• [学会発表] Expression of the actin-binding proteins, coactosin and drebrin, in the developing chick ciliary ganglion (2011)
  • 著者名/発表者名: Shoko Hososhima, Xubin Hou, Harukazu Nakamura, Tour Ishizuka, Hiromu Yawo
  • 学会等名: 第44回日本発生生物学会
  • 発表場所: 沖縄
  • 年月日: 2011-05-19
• [学会発表] Second UCL-Tohoku University Symposium (2011)
  • 著者名/発表者名: Harukazu Nakamura& Shinichi Ohnuma
  • 学会等名: From Cell/Developmental Biology to Neuroscience. Organizers
  • 発表場所: Sendai
  • 年月日: 2011-01-23
• [学会発表] Novel retinotectal projection pathway in deeper laminae of the developing chick optic tectum (2011)
  • 著者名/発表者名: Minoru Omi, Hidekiyo Harada, Harukazu Nakamura
  • 学会等名: The 1st Tohoku International Symposium on Multidisciplinary Neuroscience
  • 発表場所: Sendai
  • 年月日: 2011-01-21
• [学会発表] FGF8 localizes in the nucleus-The possibility of new function- (2011)
  • 著者名/発表者名: Ayumu Suzuki, Hidekiyo Harada, Harukazu Nakamura
  • 学会等名: The 1st Tohoku International Symposium on Multidisciplinary Neuroscience
  • 発表場所: Sendai
  • 年月日: 2011-01-21
• [学会発表] SOX5 is required for semicicular canal development in Zebrafish (2010)
  • 著者名/発表者名: Sympei Tanino, Gembu Abe, Koichi Kawakami, Harukazu Nakamura, Jun-ichi Funahashi
  • 学会等名: BMB2010第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] Involvement of Pea3/Ets transcription factor Erm in the neuronal axis formation by repressing Shh expression (2010)
  • 著者名/発表者名: 原田英斉, 尾身実, 佐藤達也, 仲村春和
  • 学会等名: BMB2010第33回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-07
• [学会発表] ニワトリ胚網膜視蓋投射における新規軸索経路 (2010)
  • 著者名/発表者名: 尾身実, 原田英斉, 仲村春和
  • 学会等名: 日本動物学会第81回大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-09-25
• [学会発表] New retinotectal projection pathway in deeper laminae of the developing chick optic tectum (2010)
  • 著者名/発表者名: Minoru Omi, Hidekiyo Harada, Harukazu Nakamura
  • 学会等名: 第43回日本発生生物学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-06-22
• [学会発表] Involvement of Mitf in the retinal pigment epthelium development and its possible regulators (2010)
  • 著者名/発表者名: Daisuke Nishihara, Nagahara Tsukiji, Ichiro Yajima, Kazuhisa Takeda, Shigeki Shibahara, Harukazu Nakamura, Hiroaki Yamamoto
  • 学会等名: 第43回日本発生生物学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-06-22
• [学会発表] Visualization of tangential neuronal migration in the developing chick optic tectum (2010)
  • 著者名/発表者名: Yuji Watanabe, Harukazu Nakamura
  • 学会等名: 第43回日本発生生物学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-06-21
• [学会発表] Analysis of translocation of Fgf8 to the nuclei (2010)
  • 著者名/発表者名: Ayumu Suzuki, Hidekiyo Harada, Harukazu Nakamura
  • 学会等名: 第43回日本発生生物学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-06-21
• [学会発表] Organizing signal for development of the tectum and cerebellum. UCL-Tohoku University Symposium, From Cell/Developmental Biology to Neuroscience (2010)
  • 著者名/発表者名: Harukazu Nakamura
  • 学会等名: Organizers: Harukazu Nakamura & Shin-ichiOhnuma
  • 発表場所: London, Great Britain
  • 年月日: 2010-03-15
• [学会発表] UCL-Tohoku University Symposium (2010)
  • 著者名/発表者名: Harukazu Nakamura & Shinichi Ohnuma
  • 学会等名: From Cell/Developmental Biology to Neuroscience. Organizers
  • 発表場所: London, Great Britain
  • 年月日: 2010-03-15
• [学会発表] 脳の設計図とその書き換えによる自在な脳の作り替え (2009)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和
  • 学会等名: 第2回東北大学バイオフォーラム～脳科学の革新的な発展を目指して～
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-06-05
• [図書] キメラ・クローン・遺伝子-生命の発生・進化をめぐる研究の歴史? (2012)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和 勝部憲一監訳
  • 出版者: 西村書店(Nicole Le Douarin著Des Chimeres,des Clones et des genesからの翻訳)
• [図書] 目的別で選べる遺伝子導入プロトコール ニワトリ胚への遺伝子強制発現およびノックダウン (2012)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和
  • 出版者: 実験医学別冊医学書院仲嶋一範,北村義浩,武内恒成/編
• [図書] 遺伝子導入プロトコール (2012)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和
  • 総ページ数: 250
  • 出版者: ニワトリ胚への遺伝子強制発現およびノックダウン
• [図書] 目的別で選べる遺伝子導入プロトコール （ニワトリ胚への遺伝子強制発現およびノックダウンの章を担当） (2012)
  • 著者名/発表者名: 仲村春和
  • 出版者: 医学書院
• [図書] Electroporation and Sonoporation in Developmental Biology. Ed (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, H
  • 出版者: Springer Japan, Tokyo.
• [図書] Chapter 1 'Short history of electroporation for the study of developmental biology (2009)
  • 著者名/発表者名: Harukazu Nakamura
  • 出版者: Springer Japan, Tokyo
• [図書] Chapter 2 'In ovo electroporation as a useful tool to pursue molecular mechanisms of neural development in chick embryos. Odani, N., Hou, X. (2009)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, H
  • 出版者: Springer Japan, Tokyo
• [図書] Chapter 10 'Retinal fiber tracing by in ovo electroporation (2009)
  • 著者名/発表者名: Harada, H., Nakamura, H
  • 出版者: Springer Japan, Tokyo
• [図書] Chapter 12 'Clonal and widespread gene transfer by proviral electroporation for analysis of brain laminar formation (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, S., Nakamura, H
  • 出版者: Springer Japan, Tokyo