新規チオシアネート取り込み輸送体の機能的構築および共役活性評価

• 研究課題/領域番号: 22580082
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用微生物学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 荒川 孝俊 京都大学, 医学研究科, 研究員 (30523766)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2012年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2011年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2010年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
• キーワード: 微生物代謝 / ABCトランスポーター / 膜タンパク質 / 輸送体タンパク / チオシアネート / 硫化カルボニル / リポソーム / 共発現 / 蛋白質異種発現系

研究概要

ABC型膜輸送体のそれぞれのコンポーネントと相同性を持っている、チオシアネート加水分解酵素下流にコードされる4種類の遺伝子配列の翻訳産物について、実際に活性を持った輸送体として得られるかどうかを大腸菌と酵母を宿主とする組換え発現系を用いて検討した。細胞質内ヌクレオチド結合ドメインにあたる遺伝子産物は大腸菌・酵母いずれにおいても高効率に発現したのに比べ、細胞外ドメイン、細胞膜ドメインの遺伝子産物はごく微量な発現にとどまった。

研究成果

• [雑誌論文] Two arginine residues in the substrate pocket predominantly control the substrate selectivity of thiocyanate hydrolase (2013)
  • 著者名/発表者名: Yasuaki Yamanaka, Takatoshi Arakawa, Toshinori Watanabe, Satoshi Namima, Masa Sato, Shota Hori, Akashi Ohtaki, Keiichi Noguchi, Yoko Katayama, Masafumi Yohda, Masafumi Odaka
  • 雑誌名: Journal of Bioscience and Bioengineering 巻: Vol. 116、Issue 1 号: 1 ページ: 22-27
  • DOI: 10.1016/j.jbiosc.2013.01.013
  • NAID: 110009634740
  • 査読あり