可視化によるインフルエンザウイルス出芽過程の動的解析

• 研究課題/領域番号: 22590420
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: ウイルス学
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 黒田 和道 日本大学, 医学部, 准教授 (50215109)
• 研究分担者: 芝田 敏克 日本大学, 医学部, 研究員 (30398854)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2012年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2011年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2010年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
• キーワード: 細胞 / 出芽 / インフルエンザ / ライブセルイメージング / インフルエンザウイルス / 出芽過程 / 蛍光タンパク質 / テトラシステインタグ

研究概要

インフルエンザウイルスのM1に蛍光タンパク質を付加したもの(GFP-M1)と全反射照明蛍光顕微鏡を用い、ウイルス粒子形成過程の生細胞での観察を試みた。GFP-M1発現細胞にウイルスを感染させたところ、約8時間後からGFP-M1の顆粒状構造が細胞表面に観察され始め、その後、顆粒は集積傾向を示した。もう一つのウイルスタンパク質であるHAでも同様な傾向が確認された。これは、GFP-M1顆粒形成がウイルス粒子形成に対応することを示す。

研究成果

• [雑誌論文] polyphenol-rich extract from Chaenomeles sinensis (Chinese quince) inhibits influenza A virus infection by preventing primary transcription in vitro. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sawai-Kuroda R, Kikuchi S, ShimizuYK, Sasaki Y, Kuroda K, Tanaka T, Yamamoto T, Sakurai K, Shimizu K.,A
  • 雑誌名: J Ethnopharmacol 巻: 146(3) ページ: 866-872
  • 査読あり
• [雑誌論文] virus NS4B targets lipid droplets through hydrophobic residues in the amphipathic helices. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Kuroda K, Ikeda M, WakitaT, Kato N, Makishima M. Hepatitis C
  • 雑誌名: J Lipid Res. 巻: 54(4) ページ: 881-892
  • 査読あり
• [雑誌論文] A polyphenol-rich extract from Chaenomeles sinensis (Chinese quince) inhibits influenza A virus infection by preventing primary transcription in vitro. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sawai-Kuroda R et al.
  • 雑誌名: J Ethnopharmacol. 巻: 19 号: 3 ページ: 866-872
  • DOI: 10.1016/j.jep.2013.02.020
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatitis C virus NS4B targets lipid droplets through hydrophobic residues in the amphipathic helices (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T et al.
  • 雑誌名: J Lipid Res. 巻: 54(4) 号: 4 ページ: 881-892
  • DOI: 10.1194/jlr.m026443
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bacterialneuraminidase rescues influenza virus replication from inhibition by a neuraminidase inhibitor. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nishikawa T, Shimizu K, Tanaka T, Kuroda K, Takayama T, Yamamoto T,Hanada N, Hamada Y.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 7(9)
  • 査読あり
• [雑誌論文] The interaction between Lyn andFcεRIβ is indispensable for FcεRI-mediated human mast cell activation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Okayama Y, Kashiwakura JI, Matsuda A, Sasaki-Sakamoto T,Nunomura S, Yokoi N, Ebihara N,Kuroda K, Ohmori K, Saito H, Ra C.
  • 雑誌名: Allergy. 巻: 67(10) ページ: 1241-1249
  • 査読あり
• [雑誌論文] H1N1/09 influenza Avirus infection of immortalized firsttrimester human trophoblast cell lines. (2012)
  • 著者名/発表者名: Komine-Aizawa S, Suzaki A, Trinh QD, Izumi Y, Shibata T, Kuroda K, Hayakawa S.
  • 雑誌名: Am J Reprod Immunol. 巻: 68(3) ページ: 226-232
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peroxiredoxin family proteins are key initiators of post-ischemic inflammation in the brain. (2012)
  • 著者名/発表者名: Shichita T, Hasegawa E, Kimura A, Morita R, Sakaguchi R, Takada I, Sekiya T, Ooboshi H, Kitazono T,Yanagawa T, Ishii T, Takahashi H,Mori S, Nishibori M, Kuroda K, AkiraS, Miyake K, Yoshimura A.
  • 雑誌名: Nat Med. 巻: 18(6) ページ: 911-917
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bacterial neuraminidase rescues influenza virus replication from inhibition by a neuraminidase inhibitor (2012)
  • 著者名/発表者名: Nishikawa T et al.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7(9) 号: 9 ページ: e45371-e45371
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0045371
  • 査読あり
• [雑誌論文] The interaction between Lyn and FcεRIβ is indispensable for FcεRI-mediated human mast cell activation. (2012)
  • 著者名/発表者名: Okayama Y, Kashiwakura JI, Matsuda A, Sasaki-Sakamoto T, Nunomura S, Yokoi N, Ebihara N, Kuroda K, Ohmori K, Saito H, Ra C.
  • 雑誌名: Allergy. 巻: 67(10) 号: 10 ページ: 1241-9
  • DOI: 10.1111/j.1398-9995.2012.02879.x.
  • NAID: 10031146235
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peroxiredoxin family proteins are key initiators of post-ischemic inflammation in the brain (2012)
  • 著者名/発表者名: Shichita T
  • 雑誌名: Nature Medicine 巻: 18 号: 6 ページ: 911-917
  • DOI: 10.1038/nm.2749
  • 査読あり
• [雑誌論文] SOCS1regulates type I/type II NKT cell balance by regulating IFNgamma signaling. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto M, Hiwatashi K, Ichiyama K, Morita R, Sekiya T, Kimura A, Sugiyama Y, Sibata T, Kuroda K,Takahashi R, Yoshimura A.
  • 雑誌名: Int Immunol 巻: 23(3) ページ: 165-176
  • 査読あり
• [雑誌論文] SOCS1 regulates type I/type II NKT cell balance by regulating IFN {gamma} signaling (2011)
  • 著者名/発表者名: Masayuki Hashimoto, 他他
  • 雑誌名: Int Immunol 巻: 23 号: 3 ページ: 165-176
  • DOI: 10.1093/intimm/dxq469
  • 査読あり
• [雑誌論文] 宿主細胞内への侵入:エンドサイトーシス (2010)
  • 著者名/発表者名: 芝田敏克、黒田和道
  • 雑誌名: 現代化学 巻: 11月号 ページ: 24-27
• [学会発表] インフルエンザウイルスM1タンパク質と核内構造物ND10との相互作用の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 芝田敏克、豊澤恵子、早川智、山本樹生、清水一史、黒田和道
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2012-11-14
• [学会発表] インフルエンザウイルスM1タンパク質と核内構造物ND10との相互作用の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 芝田 敏克
  • 学会等名: 第60回ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Modulatory efect of heat shock protein 70(Hsp70) on infuenza virus replication (2012)
  • 著者名/発表者名: Manzoor Rashid
  • 学会等名: 第60回ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] UBE2L6DOWN-REGULATES INFLUENZAVIRUS REPLICATION. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shimotai Y, Shibata T, Sasaki Y, Saito M, Kuroda K, Tanaka T, Hongo S, Hayakawa S, Shimizu K.
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-12
• [学会発表] UBE2L6 DOWN-REGULATES INFLUENZA VIRUS REPLICATION (2011)
  • 著者名/発表者名: Shimotai Y, Shibata T, Sasaki Y, Saito M, Kuroda K, Tanaka T, Hongo S, Hayakawa S, Shimizu K
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-12
• [学会発表] BACTERIALNEURAMINIDASE REDUCES THE ANTIVIRALEFFECTS OF INFLUENZA VIRUS NEURAMINIDASE INHIBITOR. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishikawa T, Toyosawa K, Kuroda K, Yamamoto T, Hanada N, Hamada Y,Shimizu K.
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-11
• [学会発表] DIFFERENT IMAGES OF INFLUENZA VIRUSM1 PROTEIN AT BUDDING SITESOBTAINED BY IMMUNOSTAINING AND TETRACYSTEINE-TAGSTAINING. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shibata T, Hayakawa S, Shimizu K, Yamamoto T, Kuroda K.
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-11
• [学会発表] INFLUENZA VIRUS M1 PROTEIN ACCUMULATES IN THE SUBNUCLEAR STRUCTURE, ND10, WITHOUT ANY HELP FROM OTHER VIRAL PROTEINS. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shibata T, Hayakawa S, Shimizu K, Yamamoto T, Kuroda K.
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-11
• [学会発表] INFLUENZA VIRUS M1 PROTEIN ACCUMULATES IN THE SUBNUCLEAR STRUCTURE, ND10, WITHOUT ANY HELP FROM OTHER VIRAL PROTEINS (2011)
  • 著者名/発表者名: Shibata T, Hayakawa S, Shimizu K, Yamamoto T, Kuroda K
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-11
• [学会発表] DIFFERENT IMAGES OF INFLUENZA VIRUS M1 PROTEIN AT BUDDING SITES OBTAINED BY IMMUNOSTAINING AND TETRACYSTEINE-TAG STAINING (2011)
  • 著者名/発表者名: Shibata T, Hayakawa S, Shimizu K, Yamamoto T, Kuroda K
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-11
• [学会発表] BACTERIAL NEURAMINIDASE REDUCES THE ANTIVIRAL EFFECTS OF INFLUENZA VIRUS NEURAMINIDASE INHIBITOR (2011)
  • 著者名/発表者名: Nishikawa T, Toyosawa K, Kuroda K, Yamamoto T, Hanada N, Hamada Y, Shimizu K
  • 学会等名: XV International Congress of Virology
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2011-09-11
• [学会発表] インフルエンザウイルスM1タンパク質の核内構造物ND10への集積 (2010)
  • 著者名/発表者名: 芝田敏克、清水一史、早川智、山本樹生、黒田和道
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2010-11-07
• [学会発表] インフルエンザウイルスM1タンパク質の核内構造物ND10への集積 (2010)
  • 著者名/発表者名: 芝田敏克
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 徳島県郷土文化会館(徳島市)
  • 年月日: 2010-11-07