改変狂犬病ウイルスベクターによる新しい神経回路トレーシング手法の開発

• 研究課題/領域番号: 22650063
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 神経科学一般
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 井上 謙一 京都大学, 霊長類研究所, 特定助教 (90455395)
• 連携研究者: 高田 昌彦 京都大学, 霊長類研究所, 教授 (00236233) ; 星 英司 東京都医学研究機構, 東京都医学総合研究所, 副参事研究員 (50407681) ; 宮地 重弘 京都大学, 霊長類研究所, 准教授 (60392354) ; 井上 智 国立感染症研究所, 獣医科学部, 室長 (90213157)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 3,060千円 (直接経費: 2,700千円、間接経費: 360千円); 2011年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2010年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
• キーワード: 神経科学 / 脳・神経 / ウイルスベクター / 解剖学

研究概要

本研究では、神経回路解析に有用なトレーシングシステムを実現するための基盤的技術として、狂犬病ウイルスベクターを初めとするベクターシステムの開発を行った。まず、まず神経解剖学において有用な越シナプス的トレーサーとして使用されている狂犬病ウイルスCVS株をベースとした伝播能欠損型ベクターを開発し、挿入するマーカータンパク質(蛍光蛋白質)の発現量を増強する為の改変を行った。また、アデノ随伴ウイルスベクターおよびレンチウイルスベクター構築と回収法の検討を行い、霊長類において実用可能な力価・精製度を持つベクターの作製に成功した。これらのベクターを用いて、ベクターの多重感染により目的細胞選択的な外来遺伝子発現制御が可能であることを霊長類において明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Ischaemia in the Zinn-Haller circle and glaucomatous optic neuropathy in macaque monkeys (2012)
  • 著者名/発表者名: Hiraoka M, Inoue K, Ninomiya T, Takada M
  • 雑誌名: Br J Ophthalmol 巻: 96 号: 4 ページ: 597-603
  • DOI: 10.1136/bjophthalmol-2011-300831
  • 査読あり
• [雑誌論文] Localization of papillofoveal bundles in primates (2012)
  • 著者名/発表者名: Hiraoka M, Inoue K, Kawano H, Takada M
  • 雑誌名: Anat Rec 巻: 295 号: 2 ページ: 347-354
  • DOI: 10.1002/ar.21519
  • 査読あり
• [雑誌論文] Neuron-specific gene transfer through retrograde transport of lentiviral vector pseudotyped with a novel type of fusion envelope glycoprotein (2011)
  • 著者名/発表者名: Kato S, Kuramochi M, Takasumi K, Kobayashi K, Inoue K, Takahara D, Hitoshi S, Ikenaka K, Shimada T, Takada M, Kobayashi K
  • 雑誌名: Hum Gene Ther 巻: 22 号: 12 ページ: 1511-1523
  • DOI: 10.1089/hum.2011.111
  • 査読あり
• [雑誌論文] Differential architecture of multisynaptic geniculo-cortical pathways to V4 and MT (2011)
  • 著者名/発表者名: Ninomiya T, Sawamura H, Inoue K, Takada M
  • 雑誌名: Cereb Cortex 巻: 21 号: 12 ページ: 2797
  • DOI: 10.1093/cercor/bhr078
  • 査読あり
• [雑誌論文] A lentiviral strategy for highly efficient retrograde gene transfer by pseudotyping with fusion envelope glycoprotein (2011)
  • 著者名/発表者名: Kato S, Kobayashi K, Inoue K, Kuramochi M, Okada T, Yaginuma H, Morimoto K, Shimada T, Takada M, Kobayashi K
  • 雑誌名: Hum Gene Ther 巻: Vol.22 号: 2 ページ: 197-206
  • DOI: 10.1089/hum.2009.179
  • 査読あり
• [雑誌論文] Origins of multisynaptic projections from the basal ganglia to rostrocaudally distinct sectors of the dorsal premotor area in macaques (2011)
  • 著者名/発表者名: Saga, Y., Hirata, Y., Takahara, D., Inoue, K., Miyachi, S., Nambu, A., Tanji, J., Takada, M., and Hoshi, E.
  • 雑誌名: Eur. J. Neurosci 巻: 33 号: 2 ページ: 285-97
  • DOI: 10.1111/j.1460-9568.2010.07492.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] A lentiviral strategy for highly efficient retrograde gene transfer by pseudotyping with fusion envelope glycoprotein. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kato S, Kobayashi K, Inoue K, Kuramochi M, Okada T, Yaginuma H, Morimoto K, Shimada T, Takada M, Kobayashi K
  • 雑誌名: Hum Gene Ther 巻: 22 ページ: 197-206
  • 査読あり
• [雑誌論文] Origins of multisynaptic projections from the basal ganglia to rostrocaudally distinct sectors of the dorsal premotor area in macaques. (2011)
  • 著者名/発表者名: Saga M, Hirata Y, Takahara D, Inoue K, Miyachi S, Nambu A, Tanji J, Takada M, Hoshi E
  • 雑誌名: Eur J Neurosci 巻: 33 ページ: 285-297
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intracapsular organization of ciliary zonules in monkey eyes (2010)
  • 著者名/発表者名: Hiraoka M, Inoue K, Ohtaka-Maruyama C, Ohsako S, Kojima N, Senoo H, Takada M.
  • 雑誌名: Anat Rec 巻: Vol.293 号: 10 ページ: 1797-804
  • DOI: 10.1002/ar.21220
  • 査読あり
• [雑誌論文] Motor and nonmotor projections from the cerebellum to rostrocaudally distinct sectors of the dorsal premotor cortex in macaques (2010)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, M., Takahara, D., Hirata, Y., Inoue, K., Miyachi, S., Nambu, A., Tanji, J., Takada, M., and Hoshi, E.
  • 雑誌名: Eur. J. Neurosci 巻: 31 号: 8 ページ: 1402-13
  • DOI: 10.1111/j.1460-9568.2010.07151.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Motor and nonmotor projections from the cerebellum to rostrocaudally distinct sectors of the dorsal premotor cortex in macaques. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto M, Takahara D, Hirata Y, Inoue K, Miyachi S, Nambu A, Tanji J, Takada M, Hoshi E
  • 雑誌名: Eur J Neurosci 巻: 31 ページ: 1402-1413
  • 査読あり
• [学会発表] 霊長類パーキンソン病モデルの作製と同モデルを用いた遺伝子治療研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 井上謙一、高田昌彦
  • 学会等名: 神経疾患のモデル動物研究会(招待講演)
  • 発表場所: 大阪大学・大阪
  • 年月日: 2012-01-14
• [学会発表] 霊長類パーキンソン病モデルの作製と同モデルを用いた遺伝子治療研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 井上謙一、高田昌彦
  • 学会等名: 神経疾患のモデル動物研究会
  • 発表場所: 大阪大学・大阪(招待講演)
  • 年月日: 2012-01-14
• [学会発表] Development in pathway-selective gene expression and cell ablation by using modified lentiviral vectors with retrograde transport in primates (2011)
  • 著者名/発表者名: Inoue K, Kato S, Takahara D, Endo A, Okuda Y, Kobayashi K, Kobayashi K, Takada M
  • 学会等名: 40th Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: San Diego, CA, USA.
  • 年月日: 2011-11-15
• [学会発表] Organization of multisynaptic top-down pathways from frontal cortex to visual areas MT and V4 in macaques (2011)
  • 著者名/発表者名: Ninomiya T, Sawamura H, Inoue K.-I, Takada MNinomiya T, Sawamura H, Inoue K.-I
  • 学会等名: 41th Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: Washington, DC. USA.
  • 年月日: 2011-11-14
• [学会発表] Organization of multisynaptic top-down pathways from frontal cortex to visual areas MT and V4 in macaques (2011)
  • 著者名/発表者名: Ninomiya T, Sawamura H, Inoue K.-I, Takada M
  • 学会等名: 41th Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: Washington, DC.USA
  • 年月日: 2011-11-14
• [学会発表] 脳機能研究のための神経特異的な高頻度逆行性遺伝子導入ベクターの開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: 倉持真人、加藤成樹、小林憲太、高住賢司、高原大輔、井上謙一、島田隆、高田昌彦、小林和人
  • 学会等名: 第34回日本神経科学大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜・横浜
  • 年月日: 2011-09-17
• [学会発表] マカクザル前頭葉からMTおよびV4への多シナプス性入力様式 (2011)
  • 著者名/発表者名: 二宮太平、澤村裕正、井上謙一、高田昌彦
  • 学会等名: 第34回日本神経科学大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜・横浜
  • 年月日: 2011-09-17
• [学会発表] 高頻度逆行性遺伝子導入ベクターの霊長類脳科学への応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小林和人、加藤成樹、倉持真人、小林憲太、井上謙一、高田昌彦
  • 学会等名: 第34回日本神経科学大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜・横浜(シンポジウム)
  • 年月日: 2011-09-17
• [学会発表] イムノトキシン神経路標的法によるサル大脳基底核ハイパー直接路の選択的除去 (2011)
  • 著者名/発表者名: 井上謙一、纐纈大輔、加藤成樹、小林和人、南部篤、高田昌彦
  • 学会等名: 第34回日本神経科学大会
  • 発表場所: パシフィコ横浜・横浜
  • 年月日: 2011-09-15
• [学会発表] 高頻度逆行性遺伝子導入ベクターの霊長類脳科学への応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小林和人、加藤成樹、倉持真人、小林憲太、井上謙一、高田昌彦
  • 学会等名: 第34回日本神経科学大会(シンポジウム)
  • 発表場所: パシフィコ横浜・横浜
  • 年月日: 2011-07-17
• [学会発表] Development in pathway-selective gene delivery and neuronal ablation with enhanced retrograde transfer of a modified lentiviral vector in primate brain (2011)
  • 著者名/発表者名: Inoue K, Kato S, Kobayashi K, Takada M
  • 学会等名: The 8th IBRO World Congress Of Neuroscience
  • 発表場所: Florence, Italy
  • 年月日: 2011-07-14
• [学会発表] Multisynaptic inputs from the temporal cortex to the dorsal premotor cortex in macaques (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahara D, Inoue K, Hirata Y, Miyachi S, Nambu A, Takada M, Hoshi E
  • 学会等名: 40th Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: San Diego, CA, USA.
  • 年月日: 2010-11-17
• [学会発表] Multisynaptic inputs from the temporal cortex to the dorsal premotor cortex in macaques. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahara D, Inoue K, Hirata Y, Miyachi S, Nambu A, Takada M, Hoshi E
  • 学会等名: 40^<th> Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2010-11-17
• [学会発表] Development in pathway-selective gene expression and cell ablation by using modified lentiviral vectors with retrograde transport in primates. (2010)
  • 著者名/発表者名: Inoue K, Kato S, Takahara D Endo A, Okuda Y, Kobayashi K, Kobayashi K, Takada M
  • 学会等名: 40^<th> Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2010-11-15
• [学会発表] Frontal lobe inputs to the shoulder region of the dorsal premotor area in macaque monkeys (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirata Y, Inoue K, Takahara D, Takada M, Hoshi E
  • 学会等名: 40th Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: San Diego, CA, USA.
  • 年月日: 2010-11-14
• [学会発表] Frontal lobe inputs to the shoulder region of the dorsal premotor area in macaque monkeys. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hirata Y, Inoue K, Takahara D, Takada M, Hoshi E.
  • 学会等名: 40^<th> Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: San Diego, CA, USA
  • 年月日: 2010-11-14
• [学会発表] 腹側前頭前野から背側運動前野への多シナプス性入力 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高原大輔、平田快洋、井上謙一、宮地重弘、南部篤、高田昌彦、星英司
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場・神戸
  • 年月日: 2010-09-04
• [学会発表] 逆行性感染型レンチウイルスベクターを用いた神経路選択的細胞操作法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 井上謙一、加藤成樹、高原大輔、遠藤歩、奥田泰宏、小林憲太、小林和人、高田昌彦
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸・神戸国際会議場
  • 年月日: 2010-09-04
• [学会発表] 逆行性感染型レンチウイルスベクターを用いた神経路選択的細胞操作法の開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 井上謙一、加藤成樹、高原大輔、遠藤歩、奥田泰宏、小林憲太、小林和人、高田昌彦
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場・神戸
  • 年月日: 2010-09-04
• [学会発表] マカクザルにおける大脳基底核から背側運動前野への多シナプス性入力 (2010)
  • 著者名/発表者名: 星英司、佐賀洋介、高原大輔、平田快洋、井上謙一、宮地重弘、南部篤、丹治順、高田昌彦
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸・神戸国際会議場
  • 年月日: 2010-09-03
• [学会発表] マカクザルの前頭葉から4次視覚野への多シナプス性入力様式 (2010)
  • 著者名/発表者名: 二宮太平、澤村裕正、井上謙一、高田昌彦
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸・神戸国際会議場
  • 年月日: 2010-09-03
• [学会発表] マカクザルにおける大脳基底核から背側運動前野への多シナプス性入力 (2010)
  • 著者名/発表者名: 星英司、佐賀洋介、高原大輔、平田快洋、井上謙一、宮地重弘、南部篤、丹治順、高田昌彦
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場・神戸
  • 年月日: 2010-09-03
• [学会発表] マカクザルの前頭葉から4次視覚野への多シナプス性入力様式 (2010)
  • 著者名/発表者名: 二宮太平、澤村裕正、井上謙一、高田昌彦
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場・神戸
  • 年月日: 2010-09-03
• [図書] Viral Gene Therapy(edited by Ke Xu) (2011)
  • 著者名/発表者名: Kato S, Kuramochi M, Kobayashi K, Inoue K, Takada M
  • 総ページ数: 450
  • 出版者: Intech(Croatia)
• [図書] Viral Gene Therapy(edited by Ke Xu) (2011)
  • 著者名/発表者名: Kato S, Kuramochi M, Kobayashi K, Inoue K, Takada M, Kobayashi K
  • 総ページ数: 450
  • 出版者: Intech (Croatia)
• [備考]
  • URL: http://www.pri.kyoto-u.ac.jp/sections/systems_neuroscience/index.html
• [備考]
  • URL: http://www.pri.kyoto-u.ac.jp/sections/systems_neuroscience/index.html