新規miRNA阻害ベクターライブラリーを用いたがん細胞増悪化関連miRNAの探索

• 研究課題/領域番号: 22700873
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 腫瘍生物学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 原口 健 東京大学, 医科学研究所, 助教 (10549455)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2011
• 研究課題ステータス: 完了 (2011年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2011年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2010年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
• キーワード: RNA干渉 / microRNA / inhibitor / がん / miRNA / miRNA inhibitor / miR-200 / EMT / E-cadherin / vimentin

研究概要

我々が開発したmiRNAを阻害するDecoy RNA, TuD(Tough Decoy) RNAの発現ベクターを改良し、これを用いて癌性質に関わるmiRNAを探索することが本研究の目的であった。本研究において実際に我々はTuD RNA発現ベクターを改良することができた。この改良型TuD RNAを発現するユニットを搭載したレンチウイルスベクターが、導入された培養細胞内において100日以上の長期に渡り、miRNA阻害効果を維持することができることを示した。さらにこのベクターを用いることにより、癌細胞において上皮一間充織転換を誘導することができた。これにより改良型TuD RNA発現ベクターが、癌細胞におけるmiRNAの機能を解析する上で有用なツールであることを実証した。

研究成果

• [雑誌論文] A potent 2'-O-methylated RNA-based microRNA inhibitor with unique secondary structures (2012)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi,T., Nakano, H., Tagawa, T., Ohki, T., Ueno, Y., Yoshida, T., Iba, H.
  • 雑誌名: Nucleic Acids Res. 巻: (in press) 号: 8 ページ: 1-13
  • DOI: 10.1093/nar/gkr1317
  • 査読あり
• [雑誌論文] Micro RNA regulation of glycoprotein B5R in oncolytic vaccinia virus reduces viral pathogeni city without impairing itsantitumor efficacy (2011)
  • 著者名/発表者名: Hikichi M, Kidokoro M, Haraguchi T, Iba H, Shida H, Tahara H, Nakamura T
  • 雑誌名: Mol Ther 巻: 19(6) ページ: 1107-15
• [雑誌論文] Micro RNAs miR-199a-5p and-3p target the Brm subunit of SWI/SNF to generate a double-negative feedback loop in a variety of human cancers (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakurai, K, Furukawa C, Haraguchi T, Inada K, Shiogama K, Tagawa T, Fujita S, Ueno Y, Ogata A, Ito M, Tsutsumi Y, Iba H
  • 雑誌名: Cancer Research 巻: 71 ページ: 1680-1689
• [雑誌論文] MicroRNA regulation of vaccinia virus for enhanced oncolytic activity and reduced pathogenicity in oncolytic virotherapy (2011)
  • 著者名/発表者名: Hikichi M, Kidokoro M, Haraguchi T, Iba H, Shida H, Tahara H & Nakamura T.
  • 雑誌名: Molecular Therapy 巻: 19巻 号: 6 ページ: 1107-15
  • DOI: 10.1038/mt.2011.36
  • 査読あり
• [雑誌論文] MicroRNAs miR-199a-5p and -3p target the Brm subunit of SWI/SNF to generate a double-negative feedback loop in a variety of human cancers. (2011)
  • 著者名/発表者名: Sakurai, K, Furukawa C, Haraguchi T, Inada K, Shiogama K, Tagawa T, Fujita S, Ueno Y, Ogata A, Ito M, Tsutsumi Y, Iba H.
  • 雑誌名: Cancer Research 巻: 71 ページ: 1680-1689
  • 査読あり
• [雑誌論文] MicroRNA Regulation of Glycoprotein B5R in Oncolytic Vaccinia Virus Reduces Viral Pathogenicity Without Impairing Its Antitumor Efficacy (2011)
  • 著者名/発表者名: Hikichi M, Kidokoro M, Haraguchi T, Iba H, Shida H, Tahara H, Nakamura T.
  • 雑誌名: Molecular Therapy 巻: (Published online)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Requiem Protein Links RelB/p52 and the Brm-type SWI/SNF Complex in a Noncanonical NF-kappa B Pathway. (2010)
  • 著者名/発表者名: Tando T, Ishizaka A, Watanabe H, Ito T, Iida S, Haraguchi T, Mizutani T, Izumi T, Isobe T, Akiyama T, Inoue J, Iba H.
  • 雑誌名: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY 巻: 285 ページ: 21951-21960
  • 査読あり
• [学会発表] Development of S-TuD, a novel2'-0-methylated RNA based microRNA inhibitor with unique secondary structures. (2011)
  • 著者名/発表者名: 原口健、中野春男、吉田哲郎、伊庭英夫
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] Development of S-TuD, a novel 2'-O-methylated RNA based microRNA inhibitor with unique secondary structures (2011)
  • 著者名/発表者名: 原口健、中野春男、吉田哲郎、伊庭英夫
  • 学会等名: 第34回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] miRNA as an epigenetic switch. (2011)
  • 著者名/発表者名: 伊庭英夫、原口健、櫻井浩平、小林和善
  • 学会等名: 第18回東アジアシンポジウム
  • 発表場所: 上海
  • 年月日: 2011-12-07
• [学会発表] miRNA as an epigenetic switch (2011)
  • 著者名/発表者名: 伊庭英夫、原口健、櫻井浩平、小林和善
  • 学会等名: 第18回東アジアシンポジウム
  • 発表場所: 中国・上海(招待講演)
  • 年月日: 2011-12-07
• [学会発表] A potent2'-0-Methylated RNA based microRNA inhibitor with unique secondary structures. (2011)
  • 著者名/発表者名: 原口健、中野春男、吉田哲郎、伊庭英夫
  • 学会等名: 第70回日本癌学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-10-04
• [学会発表] A potent 2'-O-Methylated RNA based microRNA inhibitor with unique secondary structures (2011)
  • 著者名/発表者名: 原口健、中野春男、吉田哲郎、伊庭英夫
  • 学会等名: 第70回日本癌学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-10-04
• [学会発表] 特定のmicroRNAを長期間、高効率で阻害するDecoyRNA発現レンチウイルスベクターの確立 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口健、櫻井浩平、伊庭英夫
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2010-11-09
• [学会発表] 特定のmicroRNAを長期間、高効率で阻害するDecoy RNA発現レンチウイルスベクターの確立 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口健
  • 学会等名: 第58回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 徳島 あわぎんホール
  • 年月日: 2010-11-09
• [学会発表] マイクロRNAによって制御されるウイルスの開発とその応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 引地美奈、木所稔、原口健、伊庭英夫、志田壽利、田原秀晃、中村貴史
  • 学会等名: 第12回日本RNA学会年会
  • 発表場所: 東京
• [図書] 遺伝子医学MOOK、2'-OME RNAオリゴを基盤とした独特の二次構造を持つ新規microRNA阻害剤、S-TuD (2012)
  • 著者名/発表者名: 原口健、伊庭英夫
  • 出版者: メディカルドゥ(印刷中)
• [図書] 遺伝子医学MOOK (2012)
  • 著者名/発表者名: 原口健、伊庭英夫
  • 出版者: メディカルドゥ(印刷中)
• [図書] 実験医学、TuD RNA発現ベクターによる特定のmicroRNAの高効率阻害法 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口健、伊庭英夫
  • 出版者: 羊土社
• [図書] 生体の科学、TuD RNA発現ベクターを用いたmiRNAの活性阻害による機能解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口健、桜井浩平、伊庭英夫
  • 出版者: 医学書院
• [図書] 生体の科学 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口健
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: 医学書院
• [図書] 実験医学 (2010)
  • 著者名/発表者名: 原口健
  • 出版者: 羊土社
• [備考]
  • URL: http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/div-host-Parasite/Versionl.html
• [備考]
  • URL: http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/div-host-parasite/Versionl.html
• [備考]
  • URL: http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/div-host-parasite/Version1.html