肝炎ウイルスの3次元新規培養系の開発

• 研究課題/領域番号: 22790664
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 村上 周子 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教 (50454848)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2012年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2011年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2010年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: HBV / 肝細胞 / 3 次元培養 / キメラマウス / 肝炎 / ウイルス / 感染症 / 3次元培養 / 細胞・組織

研究概要

培養細胞株は 3 次元化して培養し組織化させることでその性質が変化することが知られている。本研究では、in vitroにおいて B 型肝炎ウイルス (HBV) 増殖機構を長期的に解析することを目的として、HBV の 3 次元培養系を検討した。培養には不死化ヒト正常肝細胞株と、ヒト肝細胞キメラマウスの肝組織より単離した肝細胞を用い、ウイルス粒子を含む HBV 感染患者血清を感染源として添加した。その結果、いずれの細胞においても、感染初期から経時的に培養上清中の HBV-DNA の増加を確認し、培養上清中の HBV-DNA 量は 10^5 copies/ml 以上で検出された。また、培養上清中に HBs 抗原が検出された。特にキメラマウス肝細胞を用いたスフェロイド形成による培養系において、高い HBs 抗原値を維持した。以上より、肝細胞の 3 次元培養系は HBV 感染モデルとして非常に有用である。

研究成果

• [雑誌論文] Mechanism of the Dependence of Hepatitis B Virus Genotype G on Co-infection with Other Genotypes for Viral Replication (2013)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto T, Tanaka Y, Kani S, Sugiyama M, Watanabe T, Iijima S, Murakami S, Matsuura K, Kusakabe A, Shinkai N, Sugauchi F, Mizokami M
  • 雑誌名: J Viral. Hepat 巻: 20 (4) 号: 4 ページ: 27-36
  • DOI: 10.1111/jvh.12022
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatitis C virus kinetics by administration of pegylated interferon-lin human and chimeric mice carrying human hepatocytes with variants of the IL28B gene (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe T, Sugauchi F, Tanaka Y, Matsuura K, Yatsuhashi H, Murakami S, Iijima S, Iio E, Sugiyama M, Shimada T, Kakuni M, Kohara M, Mizokami M
  • 雑誌名: Gut 巻: Nov 7 号: 9 ページ: 1340-6
  • DOI: 10.1136/gutjnl-2012-302553
  • 査読あり
• [雑誌論文] Multiple intra-familial transmission patterns of hepatitis B virus genotype D in north-eastern Egypt (2012)
  • 著者名/発表者名: Ragheb M, Elkady A, Tanaka Y
  • 雑誌名: J Med Virol. 巻: 84(4) 号: 4 ページ: 587-595
  • DOI: 10.1002/jmv.23234
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cross-species transmission of gibbon and orangutan hepatitis B virus to uPA/SCID mice with human hepatocytes (2011)
  • 著者名/発表者名: Sa-nguanmoo P, Tanaka Y, Ratanakorn P, Sugiyama M, Murakami S, Payungporn S, Sommanustweechai A, Mizokami M, Poovorawan Y
  • 雑誌名: Virus Res 巻: 158 (1-2) 号: 1-2 ページ: 209-15
  • DOI: 10.1016/j.virusres.2011.04.002
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cross-species transmission of gibbon and orangutan hepatitis Bvirus to uPA/SCID mice with human hepatocytes. (2011)
  • 著者名/発表者名: Sa-Nguanmoo P, Murakami S.
  • 雑誌名: Virus Research 巻: (印刷中)
  • 査読あり
• [学会発表] IL28B genetic variants and serum IP-10 level associated with virological response to PEG-IFN/RBV and PEG-IFN/RBV/Telaprevir therapy (2012)
  • 著者名/発表者名: Matsuura K, Tanaka Y, Watanabe T, Murakami S, Iio E, Endo M, Shinkai N, Fujiwara K, Miyaki T, Nojiri S, Kusakabe A, Orito E, Joh T, Mizokami M
  • 学会等名: The 63rd Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Boston in USA
• [学会発表] 核酸アナログを投与した B 型慢性肝炎患者における interferoninducible protein-10値の動態 (2012)
  • 著者名/発表者名: 新海登, 松浦健太郎,渡邊綱正,村上周子,宮木知克,藤原圭,日下部篤宣,飯尾悦子,野尻俊輔,城卓志,田中靖人
  • 学会等名: 第20回日本消化器関連学会週間
  • 発表場所: 神戸市
• [学会発表] 末梢血単核球を用いた C 型慢性肝炎患者PEG-IFN/RBV 投与直後の ISG 挙動 (2012)
  • 著者名/発表者名: 飯島沙幸, 渡邊 綱正,松浦健太郎,飯尾悦子,新海登,村上周子,田中靖人
  • 学会等名: 第20回日本消化器関連学会週間
  • 発表場所: 神戸市
• [学会発表] 2 剤,3 剤併用療法における,IP-10の治療前,治療開始早期の推移と治療効果,ウイルス動態に与える影響 (2012)
  • 著者名/発表者名: 松浦健太郎, 飯尾悦子,日下部篤宣,新海 登,藤原 圭,宮木知克,野尻俊輔,村上周子,渡邊綱正,折戸悦朗,城卓志,田中靖人
  • 学会等名: 第20回日本消化器関連学会週間
  • 発表場所: 神戸市