| 研究課題/領域番号 |
22K19413
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| 研究種目 |
挑戦的研究(萌芽)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
中区分48:生体の構造と機能およびその関連分野
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| 研究機関 | 国立研究開発法人国立国際医療研究センター |
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研究代表者 |
進藤 英雄 国立研究開発法人国立国際医療研究センター, 研究所・脂質生命科学研究部, テニュアトラック部長 (10401027)
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| 研究期間 (年度) |
2022-06-30 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円)
2023年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
2022年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
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| キーワード | リン脂質 / 中性脂質 / ラマン顕微鏡 / 細胞内脂質可視化 / 重水素ラベル / 脂肪酸 / 可視化 / 細胞内脂質 / 脂質 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究課題は、未だ技術的に難しい細胞内脂質可視化の技術開発とその応用である。近年、脂質分析技術の発展によりリン脂質研究は進展しているが、細胞内のリン脂質空間分析は未解決である。そこで細胞内リン脂質可視化の挑戦的な技術開発が必須である。本研究では、ラマン顕微鏡を用いて細胞内重水素ラベル脂質を検出する。既に脂肪滴（中性脂質）の検出に成功している（Uematsu et al. FASEB J. 2020）。保有するリン脂質生合成酵素欠損マウス群の細胞を観察し、リン脂質生体機能を併せて解析する。これまで見えなかった細胞内リン脂質挙動を明らかにするための技術開発課題である。
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| 研究成果の概要 |
本研究課題は、未だ技術的に難しい細胞内脂質可視化の技術開発とその応用を目的とした。生体内に微量だが質量分析計（liquid chromatography-mass spectrometry, LCMS）で検出できる脂肪酸Xがある。今回、Hela細胞の培養液中に30マイクロM重水素ラベル脂肪酸Xを添加してラマン顕微鏡（inVia Raman microscope, RENISHAW）で観察した。その結果、ラマンスペクトルで2000-2200カイザーに特徴的な重水素由来のピークを検出し、画像では細胞内にドット状の脂肪滴様構造を確認できた。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
質量分析計による脂質分析は高感度であるが、空間情報は得られない。また質量顕微鏡は空間像を得られるが今のところ細胞内の観察は難しい。本研究課題のように細胞内の脂質空間情報を得られる技術はこれまでに無い知見を得られ、生体機能理解も亢進できる。様々な方法の発展により、より高解像で精度の高い検出方法探索が必要であり、本研究課題も一助となる。
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