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抗硫酸化モノクローナル抗体作成による硫酸化プロテオーム解析

研究課題

研究課題/領域番号 23510265
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 生物分子科学
研究機関新潟薬科大学

研究代表者

北川 幸己  新潟薬科大学, 薬学部, 教授 (60093853)

研究分担者 浅田 真一  新潟薬科大学, 薬学部, 助教 (50424883)
研究期間 (年度) 2011-04-28 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円)
2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2011年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
キーワード硫酸化タンパク質 / モノクローナル抗体 / ファージディスプレイ / チロシン硫酸化酵素 / 基質配列モチーフ / ペプチド合成 / プロテオーム解析 / 基質認識機構 / 固相ペプチド合成 / チオエステル縮合法 / クローニング / 硫酸化モチーフ / 生体分子 / 硫酸化ペプチド / 固相ペプチド化学合成 / 硫酸基転移酵素 / 硫酸化酵素
研究成果の概要

免疫化学的ツールとして抗硫酸化モノクローナル抗体の取得を目指したが、マウス免疫法では特異的な抗体は得られず、ファージディスプレイ法に手法を変えて研究を継続している。
タンパク質硫酸化に関与する2種の酵素(TPST-1、-2)の大腸菌での発現系を確立し、酵素活性をもつタンパクを取得した。ADYAE配列を基準とした合成ペプチドを用いて基質の構造情報を検討し、硫酸化に必要な最短基質としてXDY(X:任意のアミノ酸)配列モチーフを見出した。
長鎖の硫酸化ペプチドに対応できる合成法として、硫酸化チロシンを含むペプチドチオエステルの調製法を開発し、複数個の硫酸化チロシンを含むペプチドの化学合成に適用した。

報告書

(5件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実施状況報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 2011 実施状況報告書
  • 研究成果

    (3件)

すべて 2015 2014

すべて 学会発表 (3件)

  • [学会発表] チオエステル縮合法による複数個の硫酸化チロシン酸基を含むペプチドの合成2015

    • 著者名/発表者名
      市川友莉恵、渡邊翔、飯吉加奈子、坪川和明、関川由美、浅田真一、
    • 学会等名
      日本薬学会第135年会
    • 発表場所
      神戸サンボーホール(神戸市)
    • 年月日
      2015-03-25 – 2015-03-28
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] TPSTによるチロシン硫酸化に最適な基質ペプチド配列の探索2015

    • 著者名/発表者名
      頓所さやか、海沼将、加賀崎佳央里、関川由美、北川幸己、浅田真一
    • 学会等名
      日本薬学会第135年会
    • 発表場所
      デザイン・クリエイティブセンター神戸(神戸市)
    • 年月日
      2015-03-25 – 2015-03-28
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] TPST によるチロシン硫酸化に必要な最短基質ペプチド鎖長の検討2014

    • 著者名/発表者名
      頓所さやか、海沼将、加賀崎佳央里、北川幸己、浅田真一
    • 学会等名
      第87回日本生化学会大会
    • 発表場所
      国立京都会館(京都市)
    • 年月日
      2014-10-15 – 2014-10-18
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書

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公開日: 2011-08-05   更新日: 2019-07-29  

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