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膜中におけるバンド3タンパク質の構造解析

研究課題

研究課題/領域番号 23570201
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 生物物理学
研究機関沖縄科学技術大学院大学 (2013-2014)
独立行政法人理化学研究所 (2011-2012)

研究代表者

平井 照久  沖縄科学技術大学院大学, その他の研究科, 研究員 (10450412)

連携研究者 濱崎 直孝  長崎国際大学, 薬学部, 教授 (00091265)
研究期間 (年度) 2011-04-28 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円)
2013年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2011年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
キーワード赤血球 / バンド3 / AE1 / 二次元結晶 / 電子線結晶学 / 電子線結晶構造解析 / 膜タンパク質 / 二次元結晶化 / 生体分子 / 蛋白質 / 電子顕微鏡 / 膜輸送体
研究成果の概要

バンド3の二次元結晶の改良を試みた。外向きに固定したバンド3では従来ベシクル状の結晶は得られていた。より分解能の向上を望めるシート状結晶を頻度よく得るために、精製条件から再検討した。特に精製標品に見られるグリコフォリンA(GPA)やアクアポリン-1等のマイナーなコンタミの除去を行った。内向きに固定したバンド3の精製も行い安定性を評価した。これらの結晶化とは異なるアプローチも行った。バンド3とGPAとの複合体に結合することが知られているモノクローナル抗体を精製に利用した。このモノクローナル抗体はWright抗体と呼ばれ、バンド3、GPAおよびWright抗体の三者複合体を精製することができた。

報告書

(5件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実施状況報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 2011 実施状況報告書
  • 研究成果

    (2件)

すべて 2014 2012

すべて 学会発表 (2件) (うち招待講演 1件)

  • [学会発表] Structural analysis of human erythrocyte band 32014

    • 著者名/発表者名
      平井照久
    • 学会等名
      第76回日本血液学会学術集会
    • 発表場所
      大阪国際会議場
    • 年月日
      2014-10-31
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 2者タンパク質間を認識するライト抗体を利用したバンド3-グリコフォリンA複合体の精製2012

    • 著者名/発表者名
      池田洋平、波多江日成子、隈博幸、濱崎直孝、平井照久
    • 学会等名
      日本生物物理学会
    • 発表場所
      名古屋大学東山キャンパス
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書

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公開日: 2011-08-05   更新日: 2019-07-29  

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