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昆虫細胞におけるdsRNA応答機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 23580077
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 応用昆虫学
研究機関九州大学

研究代表者

LEE JAEMAN  九州大学, (連合)農学研究科(研究院), 助教 (50404083)

研究分担者 日下部 宜宏  九州大学, 大学院農学研究院, 教授 (30253595)
研究期間 (年度) 2011 – 2013
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円)
2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
キーワードRNA interference / 遺伝子機能阻害 / dsRNA応答機構 / BmAgo1 / BmAgo2 / BmMLV / RISC因子 / RNAi / RNAi誘導実験 / siRNA / miRNA / Soaking RNAi誘導 / 遺伝子機能解析 / sid-1 / BmN4細胞
研究概要

本研究では、遺伝子解析において、最も有効な手段の一つである遺伝子機能阻害法として、昆虫細胞における効率的なRNAi誘導システムの確立を目的に、dsRNAの取り込みを向上させる膜タンパク質の導入と昆虫細胞内のdsRNA応答機構の解析を行った。その結果、線虫由来の膜タンパク質Sid-1が最も有効であることを明らかにし、同遺伝子を導入した種々のカイコ培養細胞を樹立した。また、カイコRNAi関連因子の同定と機能解析を行い、各因子の機能と各因子間の相互作用を明らかにした。

報告書

(4件)
  • 2013 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2012 実施状況報告書
  • 2011 実施状況報告書
  • 研究成果

    (25件)

すべて 2014 2013 2012 2011

すべて 雑誌論文 (14件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (11件)

  • [雑誌論文] Co-expression of Escherichia coli RNase III in silkworm cells improves the Efficiency of RNA interference induced by long hairpin dsRNAs2013

    • 著者名/発表者名
      JaeMan Lee, Yoshito Kojin, Hiroaki Mon, Tsuneyuki Tatsuke, Yoshitaka Miyagawa, Takahiro Kusakabe
    • 雑誌名

      Insect Sci

      巻: 20 ページ: 69-77

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] A MC motif in silkworm Ago1 are indispensible for translational repression2013

    • 著者名/発表者名
      Li Zhu, Yuuki Masaki, Tsuneyuki Tatsuke, Hiroaki Mon, Zhiqing Li, Jian Xu, JaeMan Lee, Takahiro Kusakabe
    • 雑誌名

      Insect Mol. Biol

      巻: 22 ページ: 320-330

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Soaking RNAi-mediated modification of Sf9 cells for baculovirus expression system by ectopic expression of Caenorhabditis elegans SID-1 Appl2013

    • 著者名/発表者名
      Jian Xu, Yudai Nagata, Y., Hiroaki Mon, Zhiqing Li, Li Zhu, Kazuhiro Iiyama, Takahiro Kusakabe, JaeMan Lee
    • 雑誌名

      Microbiol. Biotech

      巻: 97 ページ: 5921-5931

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Genome-wide identification of Argonaute 1- and Argonaute 2-regulating genes revealed an inhibition of macula-like virus by RNAi pathway in the silkworm2013

    • 著者名/発表者名
      Li Zhu, Zhiqing Li, Tsuneyuki Tatsuke, Daojun Cheng, Jian Xu, Kaito Yoshimura, Hiroaki Mon, Kazuhiro Iiyama, JaeMan Lee, Qingyou Xia, Takahiro Kusakabe
    • 雑誌名

      J. Insect Biotechnol. Seric

      巻: 82 ページ: 19-23

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Characterization of Tudor-sn-containing granules in the silkworm, Bombyx mori2013

    • 著者名/発表者名
      Li Zhu, Tsuneyuki Tatsuke, Hiroaki Mon, Zhiqing Li, Jian Xu, JaeMan Lee, Takahiro Kusakabe
    • 雑誌名

      Insect Biochem. Mol. Biol

      巻: 43 ページ: 664-674

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Characterization of Tudor-sn-containing granules in the silkworm, Bombyx mori2013

    • 著者名/発表者名
      Li Zhu, Tsuneyuki Tatsuke, Hiroaki Mon, Zhiqing Li, Jian Xu, Jae Man Lee, Takahiro Kusakabe
    • 雑誌名

      Insect Biochemistry and Molecular Biology

      巻: 43 号: 8 ページ: 664-674

    • DOI

      10.1016/j.ibmb.2013.04.004

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Establishment of a soaking RNA interference and Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV)-hypersensitive cell line using Bme21 cell2013

    • 著者名/発表者名
      Jian Xu, Hiroaki Mon, Takahiro Kusakabe, Zhiqing Li, Li Zhu, Kazuhiro Iiyama, Atsushi Masuda, Takumi Mitsudome, Jae Man Lee
    • 雑誌名

      Applied Microbiology and Biotechnology

      巻: 97 号: 24 ページ: 10435-10444

    • DOI

      10.1007/s00253-013-5279-x

    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Coexpression of Escherichia coli RNase III in silkworm cells improves the efficiency of RNA interference induced by long hairpin dsRNAs2013

    • 著者名/発表者名
      Lee, J.M., Kojin, Y., Tatsuke, T., Mon, H., Miyagawa, Y. and Kusakabe, T.
    • 雑誌名

      Insect Science

      巻: 20 号: 1 ページ: 69-77

    • DOI

      10.1111/j.1744-7917.2012.01569.x

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Effective RNA interference in cultured silkworm cells mediated by overexpression of Caenorhabditis elegans SID-12012

    • 著者名/発表者名
      Hiroaki Mon, Isao Kobayashi, Shinji Ohkubo, Shuichiro Tomita, JaeMan Lee, Hideki Sezutsu, Toshiki Tamura, Takahiro Kusakabe
    • 雑誌名

      RNA Biol

      巻: 9 ページ: 40-46

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] RNA interference induction by long hairpin dsRNAs expressed from chromosomal DNA of Bombyx mori cells2012

    • 著者名/発表者名
      JaeMan Lee, Yoshito Kojin, Hiroaki Mon, Tsuneyuki Tatsuke, Yoshitaka Miyagawa, Takahiro Kusakabe
    • 雑誌名

      J. Fac. Agr

      巻: (in press)

    • NAID

      120004756198

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Molecular cloning of BmTUDOR-SN and analysis of its role in RNAi pathway in the silkworm, Bombyx mori (Lepidoptera : Bombycidae)2012

    • 著者名/発表者名
      Li Zhu, Tsuneyuki Tatsuke, Zhiqing Li, Hiroaki Mon, Jian Xu, JaeMan Lee, Takahiro Kusakabe
    • 雑誌名

      Appl. Entomol. Zool

      巻: 47 ページ: 207-215

    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Molecular cloning of BmTUDOR-SN and analysis of its role in the RNAi pathway in the silkworm, Bombyx mori (Lepidoptera: Bombycidae)2012

    • 著者名/発表者名
      Zhu, L., Tatsuke, T., Li, Z., Mon, H., Xu, J., Lee, J.M. and Kusakabe, T.
    • 雑誌名

      Applied entomology and zoology

      巻: 47 ページ: 207-215

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] RNA Interference Induction by Long Hairpin dsRNAs Expressed from Chromosomal DNA of Bombyx mori Cells2012

    • 著者名/発表者名
      Lee, J.M., Kojin, Y., Tatsuke, T., Mon, H., Miyagawa, Y. and Kusakabe, T.
    • 雑誌名

      Journal of the Faculty of Agriculture, Kyushu University

      巻: 57 ページ: 441-445

    • NAID

      120004756198

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [雑誌論文] Effective RNA interference in cultured silkworm cells mediated by over expression of Caenorhabditis elegans SID-12012

    • 著者名/発表者名
      Mon H, Kobayashi I, Ohkubo S, Tomita S, Lee JM, Sezutsu H, Tamura T, Kusakabe T
    • 雑誌名

      RNA Biol

      巻: 9 号: 1 ページ: 1-8

    • DOI

      10.4161/rna.9.1.18084

    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Role of silkworm RISC components in the basal defense against Bombyx mori nucleopolyhedrovirus (BmNPV)2014

    • 著者名/発表者名
      祝 力・徐 剣・李 志清・門 宏明・ 李 在萬・日下部宜宏
    • 学会等名
      日本蚕糸学会
    • 発表場所
      日本大学生物資源科学部
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] Soaking RNAi and its application on insect sciences2013

    • 著者名/発表者名
      Takahiro Kusakabe, Hiroaki Mon, JaeMan Lee, Xu Jian, Li Zhiqing
    • 学会等名
      韓国蚕糸学会本会
    • 発表場所
      大韓民国平昌郡
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] カイコにおけるRNAi経路の解析2012

    • 著者名/発表者名
      吉末真吾、田附常幸、阪下浩介、門宏明、李在萬、日下部宜宏
    • 学会等名
      日本蚕糸学会第82回大会蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • 発表場所
      福岡市
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] BmTudor-sn interact with BmAgo1 and BmAgo2 not to be involved in RNAi pathway, while to participate in stress granule formation in BmN4 cells2012

    • 著者名/発表者名
      Li Zhu, Tuneyuki Tatsuke, Hiroaki Mon, JaeMan Lee, Takahiro Kusakabe
    • 学会等名
      日本蚕糸学会第82回大会蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • 発表場所
      福岡市
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] カイコ培養細胞NHEJにおける修復関連遺伝子ノックダウンの影響2012

    • 著者名/発表者名
      藤井美江、門宏明、高橋将晃、光延仁志、李在萬、日下部宜宏
    • 学会等名
      日本蚕糸学会第82回大会蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • 発表場所
      福岡市
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] カイコ培養細胞におけるN-グリコシル化経路の改変とタンパク質発現系への応用2012

    • 著者名/発表者名
      永田祐大、副嶋泰彦、門宏明・李在萬、日下部宜宏
    • 学会等名
      日本蚕糸学会第82回大会蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • 発表場所
      福岡市
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] カイコ培養細胞による多分岐型N-グリカンを持つ糖タンパク質の生産2012

    • 著者名/発表者名
      永田祐大、門宏明、李 在萬、日下部宜宏
    • 学会等名
      平成24年日本分子生物学会本会
    • 発表場所
      福岡国際会議場・マリンメッセ福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] カイコ培養細胞NHEJにおける修復関連遺伝子ノックダウンの影響2012

    • 著者名/発表者名
      藤井美江、門宏明、高橋将晃、光延仁志、李 在萬、日下部宜宏
    • 学会等名
      平成24年日本分子生物学会本会
    • 発表場所
      福岡国際会議場・マリンメッセ福岡
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] カイコにおける RNAi 経路の解析2012

    • 著者名/発表者名
      吉末真吾 田附常幸  阪下浩介  門 宏明  李 在萬  日下部宜宏
    • 学会等名
      平成24年度 蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • 発表場所
      九州大学箱崎キャンパス文系地区 福岡
    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
  • [学会発表] Analysis of P-bodies and stress granules in silkworm BmN4 cells2011

    • 著者名/発表者名
      祝力、田附常幸、李志清、門宏明、李在萬、日下部宜宏
    • 学会等名
      第34回日本分子生物学会
    • 発表場所
      横浜市
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] カイコβ-N-acetylglucosaminidase (BmFDL)のノックダウンがN-グリカン形成に与える影響/Effect of RNAi for BmFDL in the N-glycosylation pathway2011

    • 著者名/発表者名
      永田祐大、副嶋泰彦、門宏明、李在萬、日下部宜宏
    • 学会等名
      第34回日本分子生物学会
    • 発表場所
      横浜市
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書

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公開日: 2011-08-05   更新日: 2021-04-07  

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