食用担子菌による効率的なラッカーゼ等の有用タンパク質発現系の確立

• 研究課題/領域番号: 23580454
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 環境農学
• 研究機関: 北見工業大学
• 研究代表者: 佐藤 利次 北見工業大学, 工学部, 准教授 (00390881)
• 研究期間 (年度): 2011-04-28 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2014年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2013年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2012年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2011年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 食用担子菌 / シイタケ / ラッカーゼ / プロトプラスト / 発現ベクター / 遺伝子発現 / ウルシ / 遺伝子発現系 / 遺伝子発現ベクター / 漆

研究成果の概要

食用担子菌による効率的なラッカーゼ等の有用タンパク質発現系を確立することを目的に、シイタケの遺伝子導入法の改良とラッカーゼ遺伝子の発現を試みた。その結果、遺伝子導入法に関しては、プロトプラスト調製法を簡便化できた。また、シイタケラッカーゼ遺伝子lcc1発現ベクターを構築しシイタケに導入したところ、宿主よりも２倍以上ラッカーゼ活性の高い株を得た。また、異種ラッカーゼとして漆のラッカーゼ遺伝子を単離し、cDNAの全配列を決定した。

研究成果

• [雑誌論文] Production of plant cell wall-degrading enzymes in Lentinula edodes and the important role of laccase in early stages of solid-state cultivation (2014)
  • 著者名/発表者名: Masaru NAGAI and Toshitsugu SATO
  • 雑誌名: Mushroom Science and Biotechnology 巻: 22 ページ: 114-120
  • NAID: 110009872486
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effective induction of pblac1 laccase by copper in Polyporus brumalis ibrc 5015. (2013)
  • 著者名/発表者名: Keiko Nakade et al.
  • 雑誌名: Fungal Biology 巻: 117 ページ: 52-61
  • 査読あり
• [学会発表] 2）新規RNAiベクターによるシイタケ(Lentinula edodes) lcc1遺伝子の発現抑制 (2014)
  • 著者名/発表者名: 但野健太、大住夏美、森 篤生、沢目洋史、鈴木直之、佐藤利次
  • 学会等名: 第66回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-11
• [学会発表] ラッカーゼ発現に変異の生じたシイタケ組換え株の解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山形明史、伊藤優希、坂上真奈、沢目洋史、鈴木直之、佐藤利次
  • 学会等名: 第66回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-11
• [学会発表] 組換えシイタケによるラッカーゼの発現とウルシ（Toxicodendron vernicifluum ）からのラッカーゼ遺伝子の単離 (2013)
  • 著者名/発表者名: 佐々木優太ら
  • 学会等名: 日本農芸化学会北海道支部 平成25年度支部講演会
  • 発表場所: 北海道大学農学部
• [学会発表] シイタケ・グリセルアルデヒド‐3‐リン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子プロモータによるシイタケ・ラッカーゼ遺伝子lcc1の発現 (2012)
  • 著者名/発表者名: 内藤真良ら
  • 学会等名: 日本農芸化学会北海道支部 平成24年度支部講演会
  • 発表場所: 北海道大学農学部
• [学会発表] ラッカーゼ発現に変異の生じたシイタケ（Lentinula edodes）REMI mutantの解析-第２報- (2012)
  • 著者名/発表者名: 沢目洋史ら
  • 学会等名: 2） 日本農芸化学会北海道支部 平成24年度支部講演会
  • 発表場所: 北海道大学農学部
• [学会発表] シイタケ栽培廃液(上面水)に含まれる酵素の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 北原慎一ら
  • 学会等名: 本農芸化学会北海道支部 平成24年度支部講演会
  • 発表場所: 北海道大学農学部
• [図書] Food Quality (2012)
  • 著者名/発表者名: Yuichi Sakamoto et al.
  • 出版者: INTECH OPEN.COM.
• [備考] 北見工業大学・研究者総覧・バイオ環境化学科・佐藤利次
  • URL: http://hanadasearch.office.kitami-it.ac.jp/searchja/show/id/1196