ｉＰＳ細胞を利用した新規抗癌剤シーズ化合物の探索系の樹立

• 研究課題/領域番号: 23650587
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 発がん
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 福田 智一 東北大学, (連合)農学研究科(研究院), 准教授 (40321640)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2012年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2011年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: エピジェネティクス / 人工多能性幹細胞 / ゲノム / サイレンシング / 脱メチル化

研究概要

iPS細胞と悪性腫瘍の共通性に注目し、転写制御領域の脱メチル化を誘導する低分子化合物を探索する実験系を試みた。E6/E7によって不死化されたマウス胎児由来線維芽細胞に対して４因子を発現させた。感染後に立体的なコロニーの出現を認め、出現したコロニーをpick upし立体的なコロニーを形成した。樹立後の合計６回のパッセージにおける培養上清のルシフェラーゼ活性は全てのクローンでPassage 2よりルシフェラーゼ活性は下降、1/1000以下にまで低下した。レポーター遺伝子のサイレンシングが行われていることを意味する。サイレンシング状態のプロモーター活性を回復させる薬剤をスクリーニング中である。

研究成果

• [雑誌論文] Low-molecular-weight inhibitors of cell differentiation enable efficient growth of mouse iPS cells under feeder-free conditions (2014)
  • 著者名/発表者名: Donai K, Inagaki A, So KH, Kuroda K, Sone H, Kobayashi M, Nishimori K, Fukuda T
  • 雑誌名: Cytotechnology 巻: (in press) 号: 2 ページ: 191-197
  • DOI: 10.1007/s10616-013-9686-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Low-Molecular-Weight Inhibitors of Cell Differentiation Enable Efficient Growth of Mouse iPS Cells under Feeder-Free Conditions (2014)
  • 著者名/発表者名: Donai, K. Inagaki, A. So, HK. Kuroda, K. Sone, H. Kobayashi, M. Nishimori, K. Fukuda, T
  • 雑誌名: Cytotechnology 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of a Reporter System to Monitor Silencing Status in induced Pluripotent Stem Cell Lines (2013)
  • 著者名/発表者名: Donai K, Kuroda K, Guo Y, So K-H, Sone H, Kobayashi M, Nishimori K and Fukuda T
  • 雑誌名: Anal Biochem 巻: 443 号: 1 ページ: 104-112
  • DOI: 10.1016/j.ab.2013.08.014
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment of Induced Pluripotent Stem Cell Lines to Monitor the Silencing Status of Genomes (2013)
  • 著者名/発表者名: Kenichiro Donai, Kengo Kuroda, Yijie Guo, Kyoung-Ha So, Hideko Sone, Masayuki Kobayashi, Katsuhiko Nishimori, Tomokazu Fukuda
  • 雑誌名: Analytical Biochemistry 巻: 20
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficient establishment of pig embryonic fibroblast cell lines with conditional expression of simian vacuolating virus 40 large T fragment. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuda, T., Katayama, M., Yoshizawa, T., Eitsuka, T., Mizukami, H., Nakagawa, K., Ito, H., Komagata, H., Song, S., Roh, S., Sato, E., Hanada, H., Nishimori, K., Miyazawa, T., and Uchida, T
  • 雑誌名: Bioscience Biotechnology and Biochemistry 巻: in press
  • NAID: 10030982228
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antiproliferative effect of cathelicidin family peptide LL-37 analogue on colon cancer HCT116 p53+/+ and p53-/- cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kuroda, K., Fukuda, T., Yoneyama, H., Katayama, M., Isogai, H., Okumura, K., and Isogai, M
  • 雑誌名: Oncology Rep 巻: in press
  • 査読あり
• [学会発表] 人工多能性幹細胞におけるLTRプロモーターのサイレンシング状態を培養上清から簡便にモニタリングできるレポーターシステムの樹立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 土内憲一郎, 黒田健吾, 郭熠洁, 蘇敬夏, 小林正之, 西森克彦, 福田智一
  • 学会等名: 日本繁殖生物学会総会
  • 発表場所: 東京農工大学
• [学会発表] 人工多能性幹細胞におけるLTRプロモーターのサイレンシング状態を培養上清から簡便にモニタリングできるレポーターシステムの樹立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 土内憲一郎、黒田健吾、小林正之、西森克彦、福田智一
  • 学会等名: 106回日本繁殖生物学会
  • 発表場所: 東京農工大学
• [学会発表] Establishment of induced pluripotent stem cell lines that allow monitoring of the re-programming status of genomes (2012)
  • 著者名/発表者名: Donai K., Kuroda K., So KH., Inagaki A., Nishimori K., Fukuda T
  • 学会等名: Annual and International Meeting of the Japanese Association for Animal Cell Technology
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Application of induced pluripotent stem cells for the screening of low molecular demethylating compounds (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuda T
  • 学会等名: Annual and International Meeting of the Japanese Association for Animal Cell Technology
  • 発表場所: Nagoya
• [学会発表] Application of induced pluripotent stem cells for the screening of low-molecular demethylating compounds (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomokazu Fukuda
  • 学会等名: International Symposium of Japanese Association for Animal Cell Technology
  • 発表場所: Nagoya
  • 招待講演