マイクロインジェクション法を応用した歯の形態誘導プロトコールの確立

• 研究課題/領域番号: 23792299
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 歯科医用工学・再生歯学
• 研究機関: 日本歯科大学
• 研究代表者: 筒井 健夫 日本歯科大学, 生命歯学部, 准教授 (70366764)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2013年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2012年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2011年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: 歯髄幹細胞 / マイクロインジェクション / 口腔粘膜上皮 / 口腔粘膜上皮幹細胞 / 三次元共培養 / マイクロインジェクション法 / 上皮間葉相互作用 / 三次培養

研究概要

マイクロインジェクションによるタンパク導入を行うため、歯髄幹細胞と口腔粘膜上皮幹細胞を細胞シートとして温度応答性培養皿から分離し、コラーゲンゲルを添加し凝固しておいた培養用ディッシュ上で３次元培養を行った。タンパクの注入は積層培養部位を切り出し、オリエンテーションを変えて行った。組織学的検査では、口腔粘膜上皮幹細胞より作製した細胞シートの基底細胞層に細胞の集積が見られ、歯髄幹細胞との間に上皮細胞の侵入様組織像が観察された。当該課題で研究した歯髄幹細胞と口腔粘膜上皮細胞の３次元培養法により、上皮系細胞と間葉系細胞における相互作用が示唆された。