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遺伝子の自在な装填を可能にする高効率タンパク質-核酸ハイブリッド型ベクターの創製

研究課題

研究課題/領域番号 24560955
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 生物機能・バイオプロセス
研究機関秋田大学

研究代表者

後藤 猛  秋田大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (10215494)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円)
2014年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2013年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2012年度: 2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
キーワードgene delivery / streptavidin / TAT / NLS / insect cell / ジーンデリバリー / 細胞輸送 / 組換えタンパク質生産 / トランスフェクション / ストレプトアビジン / 生物・生体工学 / 遺伝子導入
研究成果の概要

膜透過ペプチドとしてHIV-1由来のTAT,核移行シグナルとしてSV40由来のNLSを付加したEGFPを用い,EGFPのSf9昆虫細胞への輸送挙動を共焦点レーザー顕微鏡により調べた。その結果, TATと NLSをこの順にEGFPに結合させることにより,EGFPはSf9の細胞膜を透過して30分以内に核内まで輸送されることが分かった。次に,TAT-NLSを付加した活性型および不活性型ストレプトアビジンの1:3四量体を作成し,さらにこれにビオチン化遺伝子と結合させ,TATとNLSを有する新規な遺伝子ベクターを構築した。現在,Sf9細胞を用いてこの遺伝子ベクターの輸送能および輸送条件を検討している。

報告書

(4件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実施状況報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (5件)

すべて 2015 2014 2013

すべて 学会発表 (5件)

  • [学会発表] 膜透過ペプチドおよび核移行シグナルペプチドを用いたEGFPのSf9昆虫細胞への輸送挙動2015

    • 著者名/発表者名
      白岩直士,横田早希,村田和美,齋 匯成,後藤 猛
    • 学会等名
      日本素材物性学会平成27年度年会
    • 発表場所
      秋田ビューホテル
    • 年月日
      2015-06-25
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] シグナルペプチドを用いたEGPFのSf9昆虫細胞への輸送挙動2014

    • 著者名/発表者名
      白岩直士,横田早希,齋 匯成,村田和美,後藤 猛
    • 学会等名
      化学系学協会東北大会
    • 発表場所
      山形大学
    • 年月日
      2014-09-20 – 2014-09-21
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] ビオチンリガーゼを用いたバキュロウイルスレセプター候補タンパク質の探索2014

    • 著者名/発表者名
      横田早希,後藤 猛
    • 学会等名
      化学系学協会東北大会
    • 発表場所
      山形大学
    • 年月日
      2014-09-20 – 2014-09-21
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] Real-time PCR によるバキュロウイルス定量とタイター測定への応用2013

    • 著者名/発表者名
      横田 早希,阿部 望美,佐藤 真一,佐藤 愛香,後藤 猛
    • 学会等名
      化学工学会第38回秋季大会
    • 発表場所
      岡山大学
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [学会発表] チチタケ由来シス型プレニルトランスフェラーゼのクローニングと大腸菌および昆虫細胞による発現2013

    • 著者名/発表者名
      横田 早希,水村 仁美,家田 偉史,中村 武志,大谷 典正,後藤 猛
    • 学会等名
      第65回生物工学会大会
    • 発表場所
      広島大学
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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