新規実験系による血栓形成の制御分子の解析

• 研究課題/領域番号: 24591422
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 冨山 佳昭 大阪大学, 医学部附属病院, 准教授 (80252667)
• 研究分担者: 柏木 浩和 大阪大学, 大学院医学系研究科, 講師 (10432535) ; 田所 誠司 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (80403062)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2014年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2012年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: インテグリンαIIbβ3 / CMK / inside-out signaling / talin-1 / kindlin-3 / 血小板 / タリン / キンドリン / Inside-out signaling / CMK細胞 / インテグリンαIIｂβ3

研究成果の概要

インテグリンαIIbβ3は血栓形成の中核を形成し、その機能は病的環境においてダイナミックに変化する。本研究では、申請者が開発したCMK細胞システムを用いてその分子機構を解析した。
CMKにおけるαIIbβ3活性化は、CHO細胞とは異なりtalin-1 head domain（THD）を強制発現させるのみでは活性化せず、血小板と同じくアゴニスト刺激が不可欠であり、talin-1およびkindlin-3依存性であった。種々のtalin-1変異体を用いた解析により、talinとβ3のmembrane proximal regionとの結合がαIIbβ3活性化に極めて重要であることが明らかになった。

研究成果

• [雑誌論文] Eliminate dark side from antiplatelet therapy. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomiyama Y
  • 雑誌名: Blood 巻: 123 号: 17 ページ: 2599-2601
  • DOI: 10.1182/blood-2014-03-560417
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A case of neonatal alloimmune thrombocytopenia in the presence of both anti-HPA-4b and anti-HPA-5b antibody: clinical and serological analysis of the subsequent pregnancy (2014)
  • 著者名/発表者名: Kiyokawa, T. Koh, Y. Mimura, K. Nakayama, K. Hosokawa, M. Sakuragi, M. Morikawa, T. Nakao, M. Aochi, H. Fukumori, Y. Kanagawa, T. Nagamine, K. Kimura, T. Tomiyama, Y.
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 100 号: 4 ページ: 398-401
  • DOI: 10.1007/s12185-014-1620-0
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] インテグリンαIIbβ3の構造変化と活性化：talinによる活性化機構. (2014)
  • 著者名/発表者名: 加藤 恒，冨山佳昭
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会誌 巻: 25 ページ: 619-628
  • NAID: 130004700441
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 出血傾向の鑑別診断 (2014)
  • 著者名/発表者名: 冨山佳昭
  • 雑誌名: 内科 巻: 114 ページ: 193-197
• [雑誌論文] Demonstration of novel gain-of-function mutations of αIIbβ3: association with macrothrombocytopenia and glanzmann thrombasthenia-like phenotype. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kashiwagi H, Kunishima S, Kiyomizu K, Amano Y, Shimada H, Morishita M, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Mol Genet Genomic Med 巻: 1 号: 2 ページ: 77-86
  • DOI: 10.1002/mgg3.9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pathophysiology and management of primary immune thrombocytopenia. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kashiwagi H, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 98 号: 1 ページ: 24-33
  • DOI: 10.1007/s12185-013-1370-4
  • NAID: 10031189594
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Integrin-Linked Kinase-PINCH-Parvin Complex Supports Integrin αIIbβ3 Activation (2013)
  • 著者名/発表者名: Hond S, Shirotani-Ikejima H, Tadokoro S, Tomiyama Y, Miyata T
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 8 号: 12 ページ: 1-13
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0085498
  • 査読あり
• [雑誌論文] インテグリン活性化とその制御～腫瘍細胞のコントロールにむけて. (2013)
  • 著者名/発表者名: 加藤 恒，冨山佳昭.
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会誌 巻: 24 ページ: 507-515
  • NAID: 130003384146
  • 査読あり
• [雑誌論文] Primary ITPにおける抗αIIbβ3自己抗体のエピトープ解析：抗αIIbβ3抗体はβプロペラドメイン内の高度に限定された領域を認識する. (2013)
  • 著者名/発表者名: 清水一亘, 柏木浩和, 冨山佳昭.
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会誌 巻: 24 ページ: 392-395
  • NAID: 130003367367
  • 査読あり
• [雑誌論文] Agonist stimulation, talin-1, and kindlin-3 are crucial for αIIbβ3 activation in a human megakaryoblastic cell line, CMK (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Tadokoro S, Kamae T, Kiyomizu K, Kashiwagi H, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Exp Hematol. 巻: 41(1) 号: 1 ページ: 79-90
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2012.09.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recognition of highly restricted regions in the β-propeller domain of αIIb by platelet-associated anti-αIIbβ3 autoantibodies in primary immune thrombocytopenia. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Kashiwagi H, Nakazawa T, Tadokoro S, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Blood 巻: 120(7) 号: 7 ページ: 1499-1509
  • DOI: 10.1182/blood-2012-02-409995
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mcl-1 and Bcl-xL regulate Bak/Bax-dependent apoptosis of the megakaryocytic lineage at multistages. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kodama T, Hikita H, Kawaguchi T, Shigekawa M, Shimizu S, Hayashi Y, Li W, Miyagi T, Hosui A, Tatsumi T, Kanto T, Hiramatsu N, Kiyomizu K, Tadokoro S, Tomiyama Y, Hayashi N, Takehara T.
  • 雑誌名: Cell Death Differ. 巻: 19(11) 号: 11 ページ: 1856-1869
  • DOI: 10.1038/cdd.2012.88
  • 査読あり
• [雑誌論文] P2Y12受容体に関する遺伝子関連検査. (2012)
  • 著者名/発表者名: 冨山佳昭.
  • 雑誌名: 血栓止血誌 巻: 23 ページ: 450-456
  • NAID: 130002076999
  • 査読あり
• [雑誌論文] 血栓止血系と分子標的. (2012)
  • 著者名/発表者名: 冨山佳昭，柏木浩和.
  • 雑誌名: 日本臨牀 巻: 70(増刊) ページ: 263-267
• [雑誌論文] 血栓形成の分子機構; 血小板機能異常症の解析からみた最近の進歩. (2012)
  • 著者名/発表者名: 柏木浩和，冨山佳昭.
  • 雑誌名: Pharma Medica 巻: 30 ページ: 9-14
• [学会発表] αIIb(R990W), a constitutive activating mutation of integrin αIIbβ3, knock-in mice show macrothrombocytopenia with impairment of platelet function (2014)
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Kashiwagi H, Tomiyama Y, et al
  • 学会等名: The American Society of Hematology 56th Annual Meeting
  • 発表場所: Moscone Center, San Francisco, USA
  • 年月日: 2014-12-08
• [学会発表] Pathophysiology and management of ITP in Asia (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomiyama Y
  • 学会等名: The 8th Congress of Asian Pacific Society on Thrombosis and Hemostasis
  • 発表場所: Convension Center, Hanoi, Vietnam
  • 年月日: 2014-10-10
  • 招待講演
• [学会発表] インテグリンαIIbβ3活性化変異、αIIb(R990W)ノックインマウスの解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 清水一亘，柏木浩和，冨山佳昭, ら
  • 学会等名: 第36回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 大阪国際交流センター，大阪
  • 年月日: 2014-05-31
• [学会発表] 血小板機能異常症の分子病態 (2014)
  • 著者名/発表者名: 冨山佳昭
  • 学会等名: 第36回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 大阪国際交流センター，大阪
  • 年月日: 2014-05-30
  • 招待講演
• [学会発表] Autoantigenic epitopes on GPIIb-IIIa in ITP
  • 著者名/発表者名: Tomiyama Y, Kiyomizu K, Kashiwagi H
  • 学会等名: The 24th Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Amsterdam, Netherland
• [学会発表] αIIbβ3細胞内活性化変異と血小板顆粒放出異常
  • 著者名/発表者名: 柏木浩和，冨山佳昭ら
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形国際ホテル（山形県）
• [学会発表] 腫瘍細胞インテグリンβ1活性化の転移における重要性
  • 著者名/発表者名: 加藤 恒，冨山佳昭ら
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形国際ホテル（山形県）
• [学会発表] Pathophysiology and management of primary immune thrombocytopenia
  • 著者名/発表者名: Tomiyama Y
  • 学会等名: The 17th Congress of the European Hematology Association
  • 発表場所: Amsterdam RAI, The Netherlands
  • 招待講演
• [学会発表] 新規薬剤による免疫性血小板減少症の治療
  • 著者名/発表者名: 冨山佳昭
  • 学会等名: 第109回日本内科学会講演会
  • 発表場所: みやこめっせ、京都
  • 招待講演
• [学会発表] 難治性特発性血小板減少性紫斑病の治療
  • 著者名/発表者名: 冨山佳昭
  • 学会等名: 第60回日本輸血・細胞治療学会総会
  • 発表場所: ホテルハマス、福島
  • 招待講演
• [学会発表] Pathophysiology and diagnosis of primary immune thrombocytopenia
  • 著者名/発表者名: Tomiyama Y, et al.
  • 学会等名: 第74回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 京都国際会館、京都
• [学会発表] Abnormal thrombopoiesis associated with integrin αIIbβ3 activating mutations
  • 著者名/発表者名: 柏木浩和, 冨山佳昭, ら
  • 学会等名: 第34回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: ハイアットリージェンシー東京、東京
• [学会発表] ヒト巨核球系細胞株CMK におけるαIIbβ3 の活性化にはagonist，talin-1，kindlin-3 が必須である
  • 著者名/発表者名: 中澤剛士，冨山佳昭, ら
  • 学会等名: 第34回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: ハイアットリージェンシー東京、東京
• [図書] よくわかる血栓・止血異常の診療 (2014)
  • 著者名/発表者名: 柏木浩和，冨山佳昭
  • 総ページ数: 13
  • 出版者: 中山書店