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蛍光相互相関分光法を用いたヒストン修飾クロストークの計測

研究課題

研究課題/領域番号 24657003
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 遺伝・ゲノム動態
研究機関東京工業大学 (2014)
大阪大学 (2012-2013)

研究代表者

木村 宏  東京工業大学, 生命理工学研究科, 教授 (30241392)

研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2012年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
キーワードクロマチン / 染色体 / 蛍光相互相関分光法 / エピジェネティクス / 蛋白質翻訳後修飾 / 翻訳後修飾 / 抗体 / 蛍光相関分光法 / ヒストン
研究成果の概要

ヒストンの翻訳後修飾は、遺伝子発現などのゲノム機能の制御と維持に重要な役割を果たしているが、各修飾間のクロストークの全体像や意義は良く分かっていない。本研究は、蛍光相互相関分光法を用いた高感度かつ迅速なヒストン修飾コンビネーションの検出法を開発することを目的として行った。Alexa488標識抗体とCy5標識抗体、及び、精製ヒストンを用いた場合、蛍光標識抗体とヒストンの可溶化条件が異なるため反応中の凝集体の形成が問題となった。そこで、蛍光標識Fabとヌクレオソームを用いたところ凝集体形成の問題が改善された。また、FRET計測により修飾コンビネーションを検出できる可能性が示唆された。

報告書

(4件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実施状況報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (9件)

すべて 2014 2012 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件、 謝辞記載あり 1件) 備考 (7件)

  • [雑誌論文] Evaluation of chemical fluorescent dyes as a protein conjugation partner for live cell imaging.2014

    • 著者名/発表者名
      Hayashi-Takanaka Y, Stasevich TJ, Kurumizaka H, Nozaki N, Kimura H
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 9 号: 9 ページ: e106271-e106271

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0106271

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] 内在性タンパク質翻訳後修飾の生細胞計測2012

    • 著者名/発表者名
      木村 宏
    • 雑誌名

      生物物理

      巻: 52 号: 5 ページ: 234-235

    • DOI

      10.2142/biophys.52.234

    • NAID

      10030877024

    • ISSN
      0582-4052, 1347-4219
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [備考] 東京工業大学 木村研究室

    • URL

      http://kimura-lab.bio.titech.ac.jp/

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [備考] 東京工業大学 生命理工学研究科 木村研究室

    • URL

      http://www.bio.titech.ac.jp/laboratory/kimura-kajikawa/kimura/index.html

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [備考] 木村グループ

    • URL

      http://www.fbs.osaka-u.ac.jp/labs/hiraoka/kimura/index.html

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [備考] 大阪大学研究者総覧 木村 宏

    • URL

      http://www.dma.jim.osaka-u.ac.jp/view?l=ja&u=7721

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [備考] Google Scholar Hiroshi Kimura

    • URL

      http://scholar.google.co.jp/citations?user=z3cSm10AAAAJ&hl=ja&oi=ao

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [備考] 木村グループHP

    • URL

      http://www.fbs.osaka-u.ac.jp/labs/hiraoka/kimura/index.html

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [備考] 大阪大学生命機能研究科教員基本情報 木村 宏

    • URL

      http://www.dma.jim.osaka-u.ac.jp/view?l=ja&u=7721

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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