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新奇な構造をもつ制限酵素のDNA切断ドメインを利用した人工制限酵素の創製

研究課題

研究課題/領域番号 24658077
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分補助金
研究分野 応用微生物学
研究機関京都大学

研究代表者

喜多 恵子  京都大学, (連合)農学研究科(研究院), 教授 (70234226)

研究協力者 中村 啓悟  京都大学, 農学部, 4回生
日置 貴大  京都大学, 農学部, 4回生
研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2014-03-31
研究課題ステータス 完了 (2013年度)
配分額 *注記
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2012年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
キーワード制限酵素 / 分子工学 / DNA / ドメイン / リンカー / 分子間相互作用 / 構造機能相関 / 人工酵素 / ヌクレアーゼ
研究概要

制限酵素はDNA上の特異的な配列を認識して切断することから, 遺伝子マニピュレーションのツールとして汎用されるとともに, DNA結合タンパク質としても興味深い研究対象である.本研究ではこれまでに報告されていない新奇な立体構造をもつ制限酵素EcoT38Iの部位特異的変異酵素を作成して酵素学的な諸性質を解析した結果,アミノ酸を1残基変化させることで野生型(GPuGCPyC)とは異なる配列特異性を持つ酵素(GAGCTC)へと改変させることに成功した.

報告書

(3件)
  • 2013 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2012 実施状況報告書
  • 研究成果

    (8件)

すべて 2014 2013 2012 その他

すべて 学会発表 (8件) (うち招待講演 1件)

  • [学会発表] DNA認識ドメインへの変異導入による制限酵素EcoT38Iの機能改変2014

    • 著者名/発表者名
      日置貴大,中村啓悟,喜多恵子
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年度大会
    • 発表場所
      明治大学生田キャンパス
    • 年月日
      2014-03-30
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Molecular engineering of a novel restriction endonuclease EcoT38I2013

    • 著者名/発表者名
      Keiko KITA
    • 学会等名
      Conference on transposition and genome engineering 2013
    • 発表場所
      Budapest, Hungary
    • 年月日
      2013-09-20
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Molecular engineering of a novel restriction endonuclease for creating new specificity2012

    • 著者名/発表者名
      Keiko KITA
    • 学会等名
      13^<th> Swiss Japanese conference on Biotechnology and Bioprocess Engineering
    • 発表場所
      Walzenhauzen, Switzerland
    • 年月日
      2012-11-05
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Novel structure and reaction mechanism of EcoT38I restriction endonuclease2012

    • 著者名/発表者名
      Keiko KITA
    • 学会等名
      FASEB Science Research Conference"Genome Engineering–Research & Applications"
    • 発表場所
      Lucca, Italy
    • 関連する報告書
      2013 研究成果報告書
  • [学会発表] Novel structure and reaction mechanism of EcoT38I restriction endonuclease2012

    • 著者名/発表者名
      喜多恵子
    • 学会等名
      FASEB Science Research Conferences "Genome Engineering -Research & Applications"
    • 発表場所
      Lucca, Italy
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] Molecular engineering of a novel restriction endonuclease for creating new specificity2012

    • 著者名/発表者名
      喜多恵子
    • 学会等名
      13th Swiss Japanese Conference on Biotechnology and Bioprocess Engineering
    • 発表場所
      Walzenhausen, Switzerland
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Molecular engineering of a novel restriction endonuclease EcoT38I

    • 著者名/発表者名
      Keiko KITA, Keigo NAKAMURA, Takahiro HIOKI, Akifumi UESUMI, and Bunzo MIKAMI
    • 学会等名
      Conference on transposition and genome engineering 2013
    • 発表場所
      Budapest, Hungary
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] DNA認識ドメインへの変異導入による制限酵素EcoT38Iの機能改変

    • 著者名/発表者名
      日置貴大 中村啓悟 喜多恵子
    • 学会等名
      日本農芸化学会2014年度大会
    • 発表場所
      明治大学生田キャンパス
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書

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公開日: 2013-05-31   更新日: 2019-07-29  

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