幹細胞を用いたドライアイに対する研究手法の開発

• 研究課題/領域番号: 24791839
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 眼科学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 横尾 誠一 東京大学, 医学部附属病院, 研究員 (20345052)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2014-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2013年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: 幹細胞 / 角膜 / 角膜上皮 / ドライアイ / ムチン / 再生医療 / 無血清

研究概要

ドライアイに対する治療の選択肢は拡大しているが、ドライアイに対する評価系は少ない。本研究では角膜上皮幹細胞を用いたドライアイ評価系の構築を目的に研究を行った。DMEM-F12, B-27, EGF存在下で幹細胞コロニーが採取でき、これらはPAS染色陽性でありムチンの発現が確認できた。対してERK1,2阻害剤であるFR1800204を用いることで、ムチン発現を抑制でき、かつERK1.2の他にERK5の抑制で細胞増殖が抑制でき、ERK1,2の抑制だけでは細胞増殖に悪影響を及ぼさないことを明らかにし、新たな評価系モデルとして期待できる成果を得た。

研究成果

• [雑誌論文] Stromal bed quality and endothelial damage after femtosecond laser cuts into the deep corneal stroma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Kimakura M, Amano S, et al.
  • 雑誌名: British Journal of Ophthalmology 巻: 97 号: 11 ページ: 1404-1409
  • DOI: 10.1136/bjophthalmol-2013-303328
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term maintenance of limbal epithelial progenitor cells using rho kinase inhibitor and keratinocyte growth factor. (2013)
  • 著者名/発表者名: Miyashita H, Yokoo S, Yoshida S, Kawakita T, Yamagami S, Tsubota K, Shimmura S.
  • 雑誌名: Stem Cells Transl Med 巻: 2 号: 10 ページ: 758-765
  • DOI: 10.5966/sctm.2012-0156
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytopathic effect of Acanthamoeba on human corneal fibroblasts. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takaoka-Sugihara N, Yamagami S, Yokoo S, Matsubara M, Yagita K.
  • 雑誌名: Mol Vis 巻: 18 ページ: 2221-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Toxicity evaluation of antiglaucoma drugs using stratified human cultivated corneal epithelial sheets. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa S, Usui T, Yokoo S, Omichi S, Kimakura M, Mori Y, Miyata K, Aihara M, Amano S, Araie M.
  • 雑誌名: Invest Ophthalmol Vis Sci. 巻: 53(9) 号: 9 ページ: 5154-60
  • DOI: 10.1167/iovs.12-9685
  • 査読あり
• [学会発表] 角膜再生医療の組織工学(シンポジウム) (2014)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一
  • 学会等名: 日本再生医療学会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
• [学会発表] 新素材ブタ由来アテロコラーゲンビトリゲル膜を用いた曲面角膜内皮細胞シートの作製と評価 (2014)
  • 著者名/発表者名: 吉田絢子, 横尾誠一, 山上聡, 天野史郎, 押方歩, 須藤理絵, 竹澤俊明
  • 学会等名: 日本再生医療学会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
• [学会発表] 新素材ブタ由来アテロコラーゲンビトリゲル膜を用いた曲面角膜内皮シートの作製と評価 (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉田絢子, 横尾誠一, 山上聡, 天野史郎, 押方歩, 須藤理絵, 竹澤俊明
  • 学会等名: 日本臨床眼科学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2013-11-01
• [学会発表] 新素材ブタ由来アテロコラーゲンビトリゲル膜を用いた曲面角膜内皮シートの作製と評価 (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉 田絢子, 横尾誠一, 山上聡, 天野史郎, 押方歩, 岡本愛, 竹澤俊明
  • 学会等名: 日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
  • 年月日: 2013-04-05
• [学会発表] フェムトセカンドレーザーを用いた移植用角膜切片作製の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 木枕光木子, 酒井修, 中川卓, 吉田絢子, 白川理香, 豊野哲也, 横尾誠一, 天野史郎
  • 学会等名: 日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
  • 年月日: 2013-04-05
• [学会発表] ヒト角膜内皮細胞の無血清培養法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一, 山上聡, 天野史郎
  • 学会等名: 日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
  • 年月日: 2013-04-05
• [学会発表] 次世代シーケンサーを用いた網羅的発現解析による角膜内皮のマーカー遺伝子探索 (2013)
  • 著者名/発表者名: 中川卓, 臼井智彦, 上田宏生, 永江玄太, 山本尚吾, 辻真吾, 横尾誠一, 山上聡, 油谷浩幸, 天野史郎
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
  • 年月日: 2013-04-05
• [学会発表] 新素材ブタ由来アテロコラーゲンビトリゲル膜を用いた曲面角膜内皮シートの作製と評価(受賞講演) (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉田絢子、横尾誠一、山上聡、天野史郎、押方歩、須藤理絵、竹澤俊明
  • 学会等名: 日本臨床眼科学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
• [学会発表] Evaluation of Novel Porcine Atelocollagen Vitrigel Membrane with Curvature as Corneal Endothelial Cell Carrier (2013)
  • 著者名/発表者名: Junko Yoshida , Seiichi Yokoo , Satoru Yamagami , Shiro Amano,Ayumi Oshikata , Chika Okamoto , Toshiaki Takezawa
  • 学会等名: ARVO 2013 Annual Meeting
  • 発表場所: Seattle , USA
• [学会発表] ヒト角膜内皮細胞の無血清培養法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、山上聡、天野史郎
  • 学会等名: 日本眼科学会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
• [学会発表] フェムトセカンドレーザーを用いた移植用角膜切片作製の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 木枕光木子、酒井修、中川卓、吉田絢子、白川理香、豊野哲也、横尾誠一、天野史郎
  • 学会等名: 日本眼科学会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
• [学会発表] 新素材ブタ由来アテロコラーゲンビトリゲル膜を用いた曲面角膜内皮シートの作製と評価 (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉田絢子、横尾誠一、山上聡、天野史郎、押方歩、岡本愛、竹澤俊
  • 学会等名: 日本眼科学会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
• [学会発表] 次世代シーケンサーを用いた網羅的発現解析による角膜内皮のマーカー遺伝子探索 (2013)
  • 著者名/発表者名: 中川卓、臼井智彦、上田宏生、永江玄太、山本尚吾、辻真吾、横尾誠一、山上聡、油谷浩幸、天野史郎
  • 学会等名: 日本眼科学会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
• [学会発表] 角膜再生医療の実現に向けた問題点と最新技術 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一
  • 学会等名: 第１２回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 横浜パシフィコ
  • 招待講演
• [学会発表] 新規温度応答性培養皿を用いた無血清・無フィーダー角膜輪部上皮細胞シート作製 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、高田哲生、天野史郎、原口和敏、山上聡
  • 学会等名: 第１２回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 横浜パシフィコ
• [学会発表] 再生医療臨床研究の実現を加速する学内連携体制の構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 片野尚子、天野史郎、横尾誠一、山上聡、島伸行、星和人、藤原夕子、高戸毅、小室美子、黒川峰夫、西澤悟、小山博之、荒川義弘、山崎力、上竹勇三郎
  • 学会等名: 第１２回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 横浜パシフィコ
• [学会発表] 角膜上皮再生医療に用いる粘膜上皮シートの新規重層化法の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、 滑川元希、山上聡、天野史郎
  • 学会等名: 第37回日本角膜学会総会・第29回日本角膜移植学会(2013 角膜カンファランス)
  • 発表場所: 白浜町立総合体育館
• [学会発表] 角膜移植用新素材ブタ由来アテロコラーゲンビトリゲル膜と市販ビトリゲルとの比較検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 吉田絢子(東京大) 横尾誠一(東京大) 山上聡(東京大) 天野史郎(東京大) 押方歩(農業資源) 岡本愛(農業資源) 竹澤俊明(農業資源)
  • 学会等名: 第37回日本角膜学会総会・第29回日本角膜移植学会(2013 角膜カンファランス)
  • 発表場所: 白浜町立総合体育館
• [学会発表] ブタ由来アテロコラーゲンビトリゲル膜を用いた新型細胞シートキャリアの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一
  • 学会等名: 第66回日本臨床眼科学会 Special Interest Group Meeting (SIG) 再生医療・生体材料研究会
  • 発表場所: 国立京都国際会館
  • 招待講演
• [学会発表] コラーゲンビトリゲルを用いた再生医療技術の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 青木茂久、戸田修二、成澤寛、天野史郎、横尾誠一、山上聡、吉田絢子、大森孝一、多田靖宏、谷亜希子、押方歩、岡本愛、竹澤俊明
  • 学会等名: 第11回再生医療学会総会
  • 発表場所: 横浜パシフィコ
• [学会発表] 角膜上皮再生医療に用いる粘膜上皮シートの新規重層化法の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、山上聡
  • 学会等名: 日本組織培養学会 第８５回大会
  • 発表場所: 京都大学百周年時計台記念館
• [学会発表] 角膜上皮幹細胞を用いた膜型ムチンをターゲットとしたドライアイ評価系モデルの構築 (2012)
  • 著者名/発表者名: 横尾誠一、山上聡、天野史郎
  • 学会等名: 第１１６回日本眼科学会総会
  • 発表場所: 東京国際フォーラム
• [学会発表] Evaluation of Novel Porcine Atelocollagen Vitrigel Membrane with Curvature as Corneal Endothelial Cell Carrier
  • 著者名/発表者名: Junko Yoshida, Seiichi Yokoo, Satoru Yamagami, Shiro Amano, Ayumi Oshikata, Chika Okamoto and Toshiaki Takezawa
  • 学会等名: The Association for Research in Vision and Ophthalmology
  • 発表場所: Seattle, USA