タンパク質に隠された新しい生理活性ペプチド「クリプタイド」の探索と生理機能の解明

• 研究課題/領域番号: 25350971
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物分子化学
• 研究機関: 長浜バイオ大学
• 研究代表者: 向井 秀仁 長浜バイオ大学, バイオサイエンス学部, 准教授 (20251027)
• 研究分担者: 木曽 良明 長浜バイオ大学, バイオサイエンス学部, 客員教授 (40089107)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: 生理活性ペプチド / クリプタイド / マイトクリプタイド / Gタンパク質共役受容体 / 好中球 / 自然免疫 / 中和抗体 / 拮抗阻害ペプチド / 自然炎症 / 拮抗阻害薬

研究成果の概要

１）ミトコンドリアタンパク質由来の新規好中球活性化ペプチド15種を新たに同定した。
２）Mitocryptide-1 (MCT-1)、-2 (MCT-2)ならびに新たに同定したmitocryptide-3（MCT-3）がそれらの受容体を活性化するために必要で十分な構造単位を明らかにするとともに、MCT-2およびMCT-3に対する拮抗阻害ペプチドを創製した。
３）MCT-1、MCT-2ならびにMCT-3の生理機能を解析する上で重要なツールとなる、それぞれに対する特異的中和抗体取得に成功するとともに、さらにMCT-1およびMCT-2が低濃度において好中球のマウス腹腔への浸潤を惹起することが示された。

研究成果

• [雑誌論文] Mitocryptide-3: characterization of its receptor molecules (2016)
  • 著者名/発表者名: Marutani, T., Nakashima, K., Tsutsumi, K., Hattori, T., Nishino, K., Shimizu, T., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2015 ページ: 251-252
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Effects of mitocryptide-1 on inflammatory cells in mice (2016)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Morikawa, H., Marutani, T., Tsutsumi, K., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2015 ページ: 253-254
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Mitochondrial protein-derived cryptides: are endogenous N-formylated peptides including mitocryptide-2 components of mitochondrial damage-associated molecular patterns? (2016)
  • 著者名/発表者名: Marutani, T., Hattori, T., Tsutsumi, K., Koike, Y., Harada, A., Noguchi, K., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Biopolymers: Peptide Science 巻: 106 号: 4 ページ: 580-587
  • DOI: 10.1002/bip.22788
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Successful acquisition of a neutralizing monoclonal antibody against a novel neutrophil-activating peptide, mitocryptide-1 (2015)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Nakashima, K., Marutani, T., Kiso, Y., Nishi, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 463 号: 1-2 ページ: 54-59
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.05.016
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Structure-activity relationships of mitocryptide-3 on the activation of neutrophilic cells (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakashima, K., Marutani, T., Hattori, T., Noguchi, K., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2014 ページ: 175-176
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Investigation of ligand recognition mechanisms of receptors for mitocryptide-1 (2015)
  • 著者名/発表者名: Tsutsumi, K., Marutani, T., Hattori, T., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2014 ページ: 177-178
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Mitocryptide-2: structure-activity relationships for the elucidation of ligand recognition mechanisms of formyl-peptide receptor like 1 (2015)
  • 著者名/発表者名: Marutani, T., Hattori, T., Koike, Y., Harada, A., Watanabe, K., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptides 巻: 2014 ページ: 6-8
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Functional analysis of mitocryptides with their neutralizing monoclonal antibodies (2015)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Araki, R., Watanabe, K., Marutani, T., Nakashima, K., Nishi, Y., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptides 巻: 2014 ページ: 360-361
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Successful acquisition of a neutralizing monoclonal antibody against a novel neutrophil-activating peptide, mitocryptide-1 (2015)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Nakashima, K., Marutani, T., Kiso, Y., Nishi, Y., and Hidehito Mukai, H.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: in press
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Mitocryptides: Elucidation of their biological functions with their monoclonal antibodies (2014)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Araki, R., Nakashima, K., Marutani, T., Ogino, S., Koike, Y., Hirooka, Y., Miyake, N., Murata, K., Watanabe, K., Kiso, Y., Nishi, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2013 ページ: 247-248
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Endogenous N-formylated cryptides: Investigation of their biological functions (2014)
  • 著者名/発表者名: Marutani, T., Hattori, T., Koike, Y., Harada, A., Watanabe, K., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2013 ページ: 249-250
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Aggregation inhibitor of amyloid-β peptide based on O-acyl isopeptide (2014)
  • 著者名/発表者名: Kawashima, H., Sohma, Y., Nakanishi, T., Kitamura, H., Mukai, H., Yamashita, M., Akaji, K., and Kiso, Y.
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2013 ページ: 101-104
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] クリプタイドータンパク質に隠された新しい生理活性ペプチド (2014)
  • 著者名/発表者名: 服部竜弥，向井秀仁
  • 雑誌名: 日本薬理学雑誌 巻: 144 ページ: 234-238
  • NAID: 130004704238
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] クリプタイド：タンパク質に隠された新しい機能ペプチド (2013)
  • 著者名/発表者名: 向井秀仁，木曽良明
  • 雑誌名: バイオサイエンスとインダストリー 巻: 71 ページ: 18-22
  • NAID: 10031140296
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative properties of Aβ1-42, Aβ11-42, and [Pyr^<11>]Aβ11-42 generated from O-acyl isopeptides (2013)
  • 著者名/発表者名: 相馬洋平
  • 雑誌名: Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 巻: 23巻 号: 5 ページ: 1326-1329
  • DOI: 10.1016/j.bmcl.2012.12.082
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional analysis of mitocryptides with their monoclonal antibodies (2013)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Shirota, S., Marutani, T., Kiso, Y., Nishi, Y., and Mukai, H.
  • 雑誌名: Peptide Science 巻: 2012 ページ: 277-278
  • NAID: 10031161627
  • 査読あり
• [雑誌論文] A new class of aggregation inhibitor of amyloid-β peptide based on an O-acyl isopeptide. (2013)
  • 著者名/発表者名: 川島 浩之
  • 雑誌名: Bioorganic & Medicinal Chemistry 巻: 21 号: 21 ページ: 6323-6327
  • DOI: 10.1016/j.bmc.2013.08.062
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification and structure-activity studies of novel cryptides hidden in mitochondrial proteins (2013)
  • 著者名/発表者名: Mukai, H., Hokari, Y., Seki, T., Fukamizu, A., and Kiso, Y.
  • 雑誌名: Peptides: Across the Pacific 巻: 2013 ページ: 314-315
  • 査読あり
• [学会発表] マイトクリプタイド：ミトコンドリアタンパク質配列に隠された一群の免疫調節因子 (2016)
  • 著者名/発表者名: 向井秀仁、服部竜弥、丸谷飛之、堤光己、木曽良明
  • 学会等名: 日本薬学会第136年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市
  • 年月日: 2016-03-29
  • 招待講演
• [学会発表] Cryptides: endogenous bioactive peptides hidden in protein structures (2016)
  • 著者名/発表者名: Mukai, H., and Kiso, Y.
  • 学会等名: The 8th Takeda Science Foundation Symposium on PharmaSciences
  • 発表場所: Suita, Osaka
  • 年月日: 2016-01-21
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Mitocryptides: candidate factors for neutrophil-activating peptides in mitochondrial DAMPs (2016)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Morikawa, H., Yamada, T., Marutani, T., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 学会等名: The 8th Takeda Science Foundation Symposium on PharmaSciences
  • 発表場所: Suita, Osaka
  • 年月日: 2016-01-21
  • 国際学会
• [学会発表] Identification of receptor molecules for mitocryptides, a novel family of neutrophil-activating peptides derived from mitochondrial proteins (2016)
  • 著者名/発表者名: Marutani, T., Nakashima, K., Tsutsumi, K., Hattori, T., Nishino, K., Shimizu, T., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 学会等名: The 8th Takeda Science Foundation Symposium on PharmaSciences
  • 発表場所: Suita, Osaka
  • 年月日: 2016-01-21
  • 国際学会
• [学会発表] 新規好中球活性化ペプチド、mitocryptide-3に対する受容体の同定 (2015)
  • 著者名/発表者名: 丸谷飛之、中島健太、堤光己、服部竜弥、西野弘大、清水稔弘、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 第38回日本分子生物学会年会、第88回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 兵庫県神戸市
  • 年月日: 2015-12-03
• [学会発表] マイトクリプタイドが免疫細胞に及ぼす影響の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 服部竜弥、森川広樹、丸谷飛之、堤光己、西義介、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 第38回日本分子生物学会年会、第88回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 兵庫県神戸市
  • 年月日: 2015-12-02
• [学会発表] 新規好中球活性化ペプチド、マイトクリプタイド-1の構造活性相関の検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 堤光己、丸谷飛之、服部竜弥、清水稔弘、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 第38回日本分子生物学会年会、第88回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 兵庫県神戸市
  • 年月日: 2015-12-02
• [学会発表] マイトクリプタイド-3：受容体分子の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 丸谷飛之、中島健太、堤光己、服部竜弥、西野弘大、清水稔弘、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: ペプチド討論会
  • 発表場所: 神奈川県平塚市
  • 年月日: 2015-11-17
• [学会発表] マイトクリプタイド-1のマウス免疫細胞に対する効果 (2015)
  • 著者名/発表者名: 服部竜弥、森川広樹、丸谷飛之、堤光己、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: ペプチド討論会
  • 発表場所: 神奈川県平塚市
  • 年月日: 2015-11-16
• [学会発表] 一群の新しい生理活性ペプチド、クリプタイド：からだをコントロールするシャドープレイヤー (2015)
  • 著者名/発表者名: 向井秀仁
  • 学会等名: 日本ペプチド学会市民フォーラム２０１５
  • 発表場所: 神奈川県平塚市
  • 年月日: 2015-11-15
  • 招待講演
• [学会発表] Mitocryptides: structure-activity relationships of a novel family of neutrophil-activating peptides (2015)
  • 著者名/発表者名: Mukai, H.
  • 学会等名: 5th Modern Solid Phase Peptide Synthesis and its Application Symposium
  • 発表場所: Queensland, Australia
  • 年月日: 2015-10-23
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Mitocryptides: physiological and pathophysiological significance of a novel family of neutrophil-activating peptides (2015)
  • 著者名/発表者名: Mukai, H.
  • 学会等名: 14th International Congress on Amino Acids, Peptides and Proteins
  • 発表場所: Vienna, Austria
  • 年月日: 2015-08-04
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Cryptides and their accumulative signaling mechanisms for novel therapeutic targets (2015)
  • 著者名/発表者名: Mukai, H.
  • 学会等名: 7th Annual AisiaTIDES
  • 発表場所: Osaka
  • 年月日: 2015-03-03 – 2015-03-05
  • 招待講演
• [学会発表] マイトクリプタイド-3の好中球様細胞活性化における構造活性相関の検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 中島健太、丸谷飛之、服部竜弥、野口公輔、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 第51回ペプチド討論会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2014-10-22 – 2014-10-24
• [学会発表] マイトクリプタイド-1受容体のリガンド認識機構の検討 (2014)
  • 著者名/発表者名: 堤光己、丸谷飛之、服部竜弥、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 第51回ペプチド討論会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2014-10-22 – 2014-10-24
• [学会発表] 好中球活性化ペプチド、マイトクリプタイド-1に対する中和抗体の取得とそれを用いた生理機能解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 服部竜弥、荒木良太、福井茜音、中島健太、丸谷飛之、木曽良明、西義介、向井秀仁
  • 学会等名: 第87回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2014-10-15 – 2014-10-18
• [学会発表] 新規の内因性ホルミルペプチドによる好中球活性化機序 (2014)
  • 著者名/発表者名: 丸谷飛之、堤光己、服部竜弥、小池裕介、原田明彦、渡辺建佑、野口公輔、山中陽介、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 第87回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2014-10-15 – 2014-10-18
• [学会発表] 一群の新規好中球活性化ペプチド、マイトクリプタイドに対する受容体のリガンド認識機構の解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 中島健太、丸谷飛之、服部竜弥、青木慎一郎、梅田龍平、仁本義章、野口公輔、福井茜音、山中陽介、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 第87回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2014-10-15 – 2014-10-18
• [学会発表] Mitocryptides: Physiological Significance of a Novel Family of Neutrophil-Activating Peptides (2014)
  • 著者名/発表者名: Mukai, H., Hattori, T., Marutani, T., Nakashima, K., Tsutsumi, K., and Kiso, Y.
  • 学会等名: 15th German-Japanese Symposium on Peptide Science
  • 発表場所: Boppard, Germany
  • 年月日: 2014-09-07 – 2014-09-09
  • 招待講演
• [学会発表] Mitocryptide-2: structure-activity relationships for the elucidation of ligand recognition mechanisms of Formyl-peptide receptor like-1 (2014)
  • 著者名/発表者名: Marutani, T., Hattori, T., Koike, Y., Harada, A., Watanabe, K., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 学会等名: 33rd European Peptide Symposium
  • 発表場所: Sofia, Bulgaria
  • 年月日: 2014-08-31 – 2014-09-05
  • 招待講演
• [学会発表] Functional analysis of mitocryptides with their neutralizing monoclonal antibodies (2014)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Araki, R., Watanabe, K., Marutani, T., Nakashima, K., Nishi, Y., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 学会等名: 33rd European Peptide Symposium
  • 発表場所: Sofia, Bulgaria
  • 年月日: 2014-08-31 – 2014-09-05
• [学会発表] 一群の新規好中球活性化ペプチド、マイトクリプタイドに対する特異的抗体を用いた生体機能解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 服部竜弥、荒木良太、渡辺建佑、丸谷飛之、中島健太、西義介、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 日本ケミカルバイオロジー学会 第9回年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-06-11 – 2014-06-13
• [学会発表] ミトコンドリアタンパク質に由来する内因性N-ホルミル化クリプタイドの生体機能解析 (2014)
  • 著者名/発表者名: 丸谷飛之、服部竜弥、小池祐介、原田明彦、渡辺建佑、堤光己、野口公輔、木曽良明、向井秀仁
  • 学会等名: 日本ケミカルバイオロジー学会第9回年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-06-11 – 2014-06-13
• [学会発表] クリプタイド：その存在意義と産業的応用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 向井秀仁
  • 学会等名: 新科学技術推進協会ライフサイエンス技術部会・材料分科会講演会
  • 発表場所: 東京
  • 招待講演
• [学会発表] Identification and Structure-Activity Studies of Novel Cryptides Hidden in Mitochondrial Proteins (2013)
  • 著者名/発表者名: Mukai, H., Hokari, Y., Seki, T., Fukamizu, A., and Kiso, Y.
  • 学会等名: 6th International Peptide Symposium / 23rd American Peptide Symposium
  • 発表場所: Big Island, Hawaii, USA
• [学会発表] 好中球活性化ペプチド、マイトクリプタイドに対するモノクローナル抗体の作製とそれを用いた生理機能解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 服部竜弥, 荒木良太, 丸谷飛之, 荻野智史, 小池祐介, 廣岡佑一, 木曽良明, 西義介, 向井秀仁
  • 学会等名: 日本生化学会第86回大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] ミトコンドリアタンパク質に由来する内因性ホルミルペプチドの生体機能解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 丸谷飛之, 服部竜弥, 木曽良明, 向井秀仁
  • 学会等名: 日本生化学会第86回大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] クリプタイドと創薬－－タンパク質に隠された新しい生理活性ペプチド、クリプタイドの系統的探索および生体機能の解析と創薬への応用 (2013)
  • 著者名/発表者名: 向井秀仁
  • 学会等名: 生命分子機能研究会2013学術集会
  • 発表場所: 長浜
  • 招待講演
• [学会発表] Systematic identification of neutrophil-activating cryptides utilizing multiple solid-phase peptide synthesis (2013)
  • 著者名/発表者名: Mukai, H., Hattori, T., Araki, R., Nakashima, K., Marutani, T., and Kiso, Y.
  • 学会等名: 4th Modern SPPS and Its Applications Symposium
  • 発表場所: Kobe
• [学会発表] O-Acyl Isopeptide : A New Class of Aggregation Inhibitor of Amyloid β Peptide (2013)
  • 著者名/発表者名: Ohno, S., Kawashima, H., Sohma, Y., Nakanishi, T., Kitamura, H., Mukai, H., Yamashita, M., Akaji, K., and Kiso, Y.
  • 学会等名: 4th Modern SPPS & Its Applications Symposium
  • 発表場所: Kobe
• [学会発表] Mitocryptides: Elucidation of their biological functions with their monoclonal antibodies (2013)
  • 著者名/発表者名: Hattori, T., Araki, R., Nakashima, K., Marutani, T., Ogino, S., Koike, Y., Hirooka, Y., Miyake, N., Murata, K., Watanabe, K., Kiso, Y., Nishi, Y., and Mukai, H.
  • 学会等名: 4th Asia-Pacific International Peptide Symposium / 50th Japanese Peptide Symposium
  • 発表場所: Suita, Osaka
• [学会発表] Endogenous N-formylated cryptides: Investigation of their biological functions (2013)
  • 著者名/発表者名: Marutani, T., Hattori, T., Koike, Y., Harada, A., Watanabe, K., Kiso, Y., and Mukai, H.
  • 学会等名: 4th Asia-Pacific International Peptide Symposium / 50th Japanese Peptide Symposium
  • 発表場所: Suita, Osaka
• [学会発表] Aggregation inhibitor of amyloid-β peptide based on O-acyl isopeptide (2013)
  • 著者名/発表者名: Kawashima, H., Sohma, Y., Nakanishi, T., Kitamura, H., Mukai, H., Yamashita, M., Akaji, K., and Kiso, Y.
  • 学会等名: 4th Asia-Pacific International Peptide Symposium / 50th Japanese Peptide Symposium
  • 発表場所: Suita, Osaka
• [学会発表] 内因性N-ホルミルペプチドの生体機能の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 向井秀仁
  • 学会等名: 関西ペプチドセミナー
  • 発表場所: 神戸
• [図書] ホルモンから見た生命現象と進化第７巻第４章 (2016)
  • 著者名/発表者名: 向井秀仁
  • 出版者: 裳華房
• [備考] 長浜バイオ大学ペプチド科学研究室
  • URL: http://b-lab.nagahama-i-bio.ac.jp/~h_mukai/
• [備考] 長浜バイオ大学教員紹介
  • URL: http://www.nagahama-i-bio.ac.jp/research/
• [備考] 長浜バイオ大学ペプチド科学研究室
  • URL: http://b-lab.nagahama-i-bio.ac.jp/~h_mukai/
• [備考] 長浜バイオ大学 教員紹介
  • URL: http://www.nagahama-i-bio.ac.jp/guide/kyoin/detail/post-5.html