細胞の分化及び生存に影響を及ぼす新たなRNA代謝機構

• 研究課題/領域番号: 25460371
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 高知大学
• 研究代表者: 坂本 修士 高知大学, 教育研究部医療学系基礎医学部門, 准教授 (80397546)
• 研究協力者: 戸高 寛 高知大学, 教育研究部医療学系基礎医学部門, 助教 (80769662) ; 樋口 琢磨 高知大学, 教育研究部医療学系基礎医学部門, 助教 (10754567)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2015年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2014年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 二本鎖RNA結合蛋白質 / microRNA生合成 / miRNA / 筋分化 / 中心核病 / Dynamin 2 / NF90 / NF45 / 筋再生 / 中心核 / 骨格筋 / 筋成熟 / マイクロRNA / Dynamin / 筋萎縮 / ミオパチー / Dynamin2

研究成果の概要

1. NF90 もしくは NF90-NF45複合体は、microRNA生合成、mRNA安定化、翻訳抑制、ウイルスRNAの複製、転写に関与することが知られている。本研究で我々は、個体レベルで、NF90-NF45複合体が骨格筋病のひとつである中心核病 (筋分化異常) を引き起こし、その病態の発症がNF90-NF45複合体によるmiR-133a生合成抑制を介したdynamin 2 (中心核病の原因遺伝子)の発現増加に起因することを見出した。

2. NF90による蛋白質合成抑制能を介したATPの収支バランスの制御を、培養細胞を用いてIn vitroの系で検証を試みたが、その制御を確認するに至らなかった、

研究成果

• [雑誌論文] PNPLA3 is involved in hepatic fatty acid and triglyceride metabolism through XBP1 and modulation of endoplasmic reticulum stress in mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ochi T, Munekage K, Ono M, Higuchi T, Tsuda M, Hayashi Y, Okamoto N, Toda K, Sakamoto S, Oben JA, Saibara T
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 印刷中 号: 6 ページ: 584-592
  • DOI: 10.1111/hepr.12587
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Expression and phosphorylation state analysis of intracellular protein kinases using Multi- PK antibody and Phos- tag SDS- PAGE. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, Y., Katayama, S., Kameshita, I., Morisawa, K., Higuchi, T., Todaka, H., Eiji Kinoshita, Kinoshita- Kikuta, E., Koike, T., Taniguchi, T., Sakamoto, S.
  • 雑誌名: MethodsX 巻: 2 ページ: 469-474
  • DOI: 10.1016/j.mex.2015.11.007
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] マルチPK抗体とPhos-tagを利用した細胞内リン酸化動態の新規解析法 (2015)
  • 著者名/発表者名: 1. 杉山 康憲、亀下 勇、坂本 修士
  • 雑誌名: 電気泳動 巻: 59 号: 2 ページ: 82-84
  • DOI: 10.2198/electroph.59.82
  • NAID: 130005103931
  • ISSN: 2189-2628, 2189-2636
  • オープンアクセス
• [雑誌論文] Overexpression of NF90-NF45 complex functions as a negative regulation in the microRNA precessing pathway. (2015)
  • 著者名/発表者名: Todaka H, Higuchi T, Yagyu KI, Sugiyama Y, Yamaguchi F, Morisawa K, Ono M, Fukushima A, Tsuda M, Taniguchi T, Sakamoto S.
  • 雑誌名: Molecular and Cellular Biology 巻: 印刷中
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Bofutsushosan, a Japanese herbal (Kampo) medicine, attenuates progression of nonalcoholic steatohepatitis in mice (2013)
  • 著者名/発表者名: Masafumi Ono, Mitsunari Ogasawara, Akira Hirose, Sachiko Mogami, Nobuhiro Ootake, Kosuke Aritake, Takuma Higuchi, Nobuto Okamoto, Shuji Sakamoto, Masahiro Yamamoto, Yoshihiro Urade, Toshiji Saibara, Jude A. Oben.
  • 雑誌名: Journal of Gastroenterology 巻: 49(6) 号: 6 ページ: 1065-1173
  • DOI: 10.1007/s00535-013-0852-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] 過剰発現したNF90-NF45複合体は筋サテライト細胞発生のマスター因子であるPax7の発現増加を引き起こす. (2015)
  • 著者名/発表者名: 戸高寛, 樋口琢磨, 三輪武司, 森澤啓子, Lai Sylvia Chin See, 有川幹彦, 佐藤隆幸, 津田雅之, 坂本修士.
  • 学会等名: Biochemistry and Molecular Biology 2015
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド (神戸市)
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] 膵臓における二本鎖RNA結合タンパク質NF90及びNF45の機能解析. (2015)
  • 著者名/発表者名: 2. Lai Sylvia Chin See, 樋口琢磨, 杉山康憲, 森澤啓子, 戸高寛, 三輪武司, 津田雅之, 坂本修士.
  • 学会等名: Biochemistry and Molecular Biology 2015
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド (神戸市)
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] 抗がん剤を処理したヒト白血病細胞HL-60の細胞内キナーゼの発現およびリン酸化動態の解析. (2015)
  • 著者名/発表者名: 杉山康憲, 片山将一, 亀下勇, 森澤啓子, 樋口琢磨, 戸高寛, 木下英司, 木下-菊田恵美子, 小池透, 坂本修士.
  • 学会等名: Biochemistry and Molecular Biology 2015
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド (神戸市)
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] 肝細胞癌における二本鎖RNA結合タンパク質によるケモカイン，CXCL5の発現制御機構. (2015)
  • 著者名/発表者名: 三輪武司, 樋口琢磨, 戸高寛, 森澤啓子, Lai Sylvia Chin See, 坂本修士.
  • 学会等名: Biochemistry and Molecular Biology 2015
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド (神戸市)
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] マルチPK抗体とPhos-tagを利用した細胞内リン酸化動態の新規解析法 (2015)
  • 著者名/発表者名: 杉山 康憲、亀下 勇、坂本 修士
  • 学会等名: 第66回日本電気泳動学会総会
  • 発表場所: 東京工科大学 (東京都)
  • 年月日: 2015-09-04
  • 招待講演
• [学会発表] 二本鎖RNA結合タンパク質が関与する肝細胞癌の新たな遊走能制御 (2014)
  • 著者名/発表者名: 樋口琢磨, 安東徳子, 三輪武司, 戸高寛, 森澤啓子, Lai Chin See Sylvia, 杉山康憲, 津田雅之, 坂本修士.
  • 学会等名: 第87回 日本生化学会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都市）
  • 年月日: 2014-10-15 – 2014-10-18
• [学会発表] マルチPK抗体とPhos-tagを利用した細胞内リン酸化シグナリング解析法 (2014)
  • 著者名/発表者名: 杉山康憲, 森澤啓子, 樋口琢磨, 戸高寛, 山口史佳, 安東徳子, 坂本修士.
  • 学会等名: 第87回 日本生化学会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都市）
  • 年月日: 2014-10-15 – 2014-10-18
• [学会発表] Identification of a motif in NF90 protein that is involved in inhibition of microRNA biogenesis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi F, Todaka H, Higuchi T, Morisawa K, Sugiyama Y, Sakamoto S.
  • 学会等名: 第36回 日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド (神戸)
• [学会発表] NF90-NF45 complex impairs muscular maturation via blockade of miR-133 biogenesis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Todaka H, Higuchi T, Yagyu K, Yamaguchi F, Morisawa K, Fukushima A, Tsuda M, Sugiyama Y, Sakamoto S.
  • 学会等名: 第36回 日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド (神戸)
• [学会発表] NF90-NF45 regulates an expression of EGFR through suppression of miR-7 biogenesis in hepatocellular carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Higuchi T, Todaka H, Morisawa K, Yamaguchi F, Ono M, Sugiyama Y, Tsuda M, Sakamoto S.
  • 学会等名: 第36回 日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド (神戸)
• [学会発表] Suppression of miR-7 biogenesis by NF90-NF45 complex in Hepatocellular Carcinoma. (2013)
  • 著者名/発表者名: Higuchi T, Todaka H, Yamaguchi F, Morisawa K, Ono M, Sugiyama Y, Tsuda M, Sakamoto S.
  • 学会等名: 第15回RNA学会年会
  • 発表場所: 愛媛県県民文化会館ひめぎんホール (愛媛)
• [学会発表] Overexpression of NF90-NF45 complex causes centronuclear muscle fibers through blockade of microRNA biogenesis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Todaka H, Higuchi T, Yagyu K, Yamaguchi F, Morisawa K, Fukushima A, Tsuda M, Sugiyama Y, Sakamoto S.
  • 学会等名: 第15回RNA学会年会
  • 発表場所: 愛媛県県民文化会館ひめぎんホール (愛媛)
• [学会発表] NF90及びNF45によるmiRNA-7生合成阻害を介した腫瘍化制御機構の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 樋口琢磨, 戸高寛, 池恩秀, 山口史佳, 森澤啓子, 小野正文, 杉山康憲, 津田雅之, 坂本修士, 谷口武利.
  • 学会等名: 第54回日本生化学会 中国・四国支部例会
  • 発表場所: 徳島大学 大塚講堂 (徳島)
• [学会発表] NF90-NF45複合体によるmiRNA産生調節を介した筋成熟抑制 (2013)
  • 著者名/発表者名: 戸高寛, 樋口琢磨, 矢生健一, 森澤啓子, 山口史佳, 池恩秀, 福島敦樹, 津田雅之, 杉山康憲, 坂本修士.
  • 学会等名: 第54回日本生化学会 中国・四国支部例会
  • 発表場所: 徳島大学 大塚講堂 (徳島)