乳頭分泌液のグライコミクスによる早期乳癌糖タンパク質マーカーの探索と診断法の開発

• 研究課題/領域番号: 25513002
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: オミクス計測科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 黒野 定 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (20271554)
• 研究分担者: 檜枝 美紀 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (00380254)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2015年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2014年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: グライコミクス / グライコプロテオミクス / プロテオミクス / 二次元LC/MS / 絶対定量 / 選択反応モニタリング(SRM) / 安定同位体ラベル / SRM

研究成果の概要

大阪大学医学部附属病院、大阪府立成人病センター、大阪がん循環器病予防センター、古妻クリニック、及び市立貝塚病院の５施設から２９検体の乳頭分泌液 (ND) の提供を受けた。AAL レクチン LC を使用し ND 検体から糖タンパク質を分取した後、二次元ナノ LC-MS/MS を用いて乳癌患者により多く発現している糖タンパク質を解析し、ホルネリンというタンパク質を同定した。合成ペプチド２種を用いて免疫ウサギ抗体を作成し、ホルネリンに対する反応性を確認したところ、１種の抗体についてホルネリンとの反応性が好ましいことを確認した。今後、当該新規抗体を用いてホルネリンの簡易アッセイ系の確立を行いたい。

研究成果

• [雑誌論文] 早期乳がん発見を目指す乳頭分泌液中分子マーカーの探索と診断法の開発 (2016)
  • 著者名/発表者名: 大石晴樹、黒野 定
  • 雑誌名: 生産と技術 巻: 68 ページ: 72-77
• [雑誌論文] Identification of potential breast cancer markers in nipple discharge by protein profile analysis using two-dimensional nano-liquid chromatography/nanoelectrospray ionization-mass spectrometry (2016)
  • 著者名/発表者名: Kurono, S., Kaneko, Y., Matsuura, N., Oishi, H., Noguchi, S., Kim, S. J., Tamaki, Y., Aikawa, T., Kotsuma, Y., Inaji, H., Matsuura, S.
  • 雑誌名: PROTEOMICS - Clinical Applications 巻: 未確定
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Quantification of proteins using 13C7-labeled and unlabeled iodoacetanilide by nano liquid chromatography/nanoelectrospray ionization and by selected reaction monitoring mass spectrometry (2015)
  • 著者名/発表者名: Kurono, S., Kaneko, Y., Matsuura, S., Niwayama, S.
  • 雑誌名: Bioorg. Med. Chem. Lett. 巻: 25 号: 5 ページ: 1110-1116
  • DOI: 10.1016/j.bmcl.2014.12.090
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 二次元LC/MS/MSを用いた乳頭分泌液中の乳癌マーカー探索研究 (2015)
  • 著者名/発表者名: 黒野 定、小林則文、中嶋智之、松浦脩治、松浦成昭、大石晴樹
  • 学会等名: 第42回BMSコンファレンス
  • 発表場所: 岐阜市
  • 年月日: 2015-07-07
• [学会発表] An Attempt to Quantitative Analysis of Clinical Proteome in Nipple Discharge by Nano LC-Nano-ESI-SRM-MS using Stable Isotope-labeled Iodoacetanilide (2015)
  • 著者名/発表者名: Kurono, S., Oishi, H., Niwayama, S.
  • 学会等名: The 63rd Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics
  • 発表場所: St. Louis
  • 年月日: 2015-06-03
  • 国際学会
• [学会発表] Exploratory Research on Potential Tumor Markers that are Useful for Cancer Diagnosis, and Development of a Simplified Assay System (2014)
  • 著者名/発表者名: Sadamu Kurono
  • 学会等名: Environmental Organic Chemistry Class
  • 発表場所: 室蘭工業大学、北海道室蘭市
  • 年月日: 2014-10-16
  • 招待講演
• [学会発表] Proteome and Glycoproteome Analyses for Breast Cancer Biomarker Discovery with Nipple Discharge Using Two-Dimensional Nano LC/Nano-ESI-MS (2014)
  • 著者名/発表者名: Kurono, S., Kobayashi, N., Nakajima, T., Matsuura, S., Matsuura, N., Oishi, H.
  • 学会等名: 62ND Conference on Mass Spectrometry and Allied Topics
  • 発表場所: Baltimore, MD, USA
  • 年月日: 2014-06-18
• [学会発表] 二次元 Nano LC/nano-ESI-MS による乳頭分泌液中の乳癌マーカー探索研究
  • 著者名/発表者名: 黒野 定、中嶋智之、小林則文、松浦脩治、松浦成昭、大石晴樹
  • 学会等名: 第61回質量分析総合討論会
  • 発表場所: つくば国際会議場 エポカルつくば、茨城県つくば市
• [学会発表] A Study of Protein and Glycoprotein Biomarker Discovery in Nipple Discharges from Breast Cancer by Nano-LC-ESI-Mass Spectrometry
  • 著者名/発表者名: Kurono, S., Nakajima, T., Kobayashi, N., Matsuura, S., Matsuura, N., Oishi, H.
  • 学会等名: HUPO 12th Annual World Congress
  • 発表場所: Pacifico Yokohama, Yokohama, Kanagawa
• [学会発表] 乳頭分泌液を用いた乳癌バイオマーカー探索における二次元 LC/MS の活用とその効果
  • 著者名/発表者名: 黒野 定
  • 学会等名: 第238回生存圏シンポジウム
  • 発表場所: 京都大学 宇治キャンパス、京都府宇治市
  • 招待講演
• [産業財産権] 浸潤性乳癌の判定法 (2015)
  • 発明者名: 大石 晴樹、松浦 成昭、黒野 定、小林 則文
  • 権利者名: 大石 晴樹、松浦 成昭、黒野 定、小林 則文
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2015-217201
  • 出願年月日: 2015-11-05
• [産業財産権] 非浸潤性乳癌の判定法 (2015)
  • 発明者名: 大石 晴樹、松浦 成昭、黒野 定、小林 則文
  • 権利者名: 大石 晴樹、松浦 成昭、黒野 定、小林 則文
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2015-217202
  • 出願年月日: 2015-11-05
• [産業財産権] 乳癌の判定法 (2014)
  • 発明者名: 松浦 脩治、松浦 成昭、黒野 定、中嶋 智之
  • 権利者名: 松浦 脩治、松浦 成昭、黒野 定、中嶋 智之
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2014-02-20
  • 外国
• [産業財産権] 乳癌の判定方法 (2013)
  • 発明者名: 松浦 脩治、松浦 成昭、黒野 定、金子 有香
  • 権利者名: 松浦 脩治、松浦 成昭、黒野 定、金子 有香
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2013-09-03
  • 外国