Tangoを利用した5-HT2C受容体活性のin vivoライブイメージング

• 研究課題/領域番号: 25640024
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 神経解剖学・神経病理学
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 田中 雅樹 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (80264753)
• 研究分担者: 渡邊 義久 京都府立医科大学, 大学院医学研究科, 講師 (50363990)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2014年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2013年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 5-HT2C受容体 / Tango / GPCR / arrestin / RNA編集 / Arrestin / スクリーニング系 / 5-HT2CR

研究成果の概要

本研究では5-HT2C受容体(5-HT2CR) 活性を簡便に測定できるシステムを開発するために、Tangoと呼ばれるArrestinのGタンパク質共役型受容体への結合を利用した系を構築した。まずTangoベクターに5-HT2CRを挿入したpEF1-5-HT2CR-Tangoプラスミドを構築し、受容体は2種類のRNA未編集型（INI）と完全編集型（VGV）アイソフォームを使用した。次に5-HT2CRから遊離したLexAの量に依存するEGFPによるレポータープラスミドを構築した。そして安定発現細胞株を作製し、INI, VGV型の活性を比較し、このアッセイ系が有効に作動していることを確認した。

研究成果

• [雑誌論文] Lysosomal enzyme cathepsin B enhances the aggregate forming activity of exogenous α-synuclein fibrils. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tsujimura A, Taguchi K, Watanabe Y, Tatebe H, Tokuda T, Mizuno T, Tanaka M.
  • 雑誌名: Neurobiol Dis 巻: 73 ページ: 244-253
  • DOI: 10.1016/j.nbd.2014.10.011
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Enhancement of alcohol drinking in mice depends on alterations in RNA editing of serotonin 2C receptors. (2014)
  • 著者名/発表者名: Watanabe Y, Yoshimoto K, Tatebe H, Kita M, Nishikura K, Kimura M, Tanaka M
  • 雑誌名: The International Journal of Neuropsychopharmacology 巻: 17(5) 号: 05 ページ: 739-751
  • DOI: 10.1017/s1461145713001545
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Different expression of alpha- synuclein in hippocampal neurons. (2014)
  • 著者名/発表者名: Taguchi, K, Watanabe, Y, Tsujimura, A, Tatebe, H, Miyata, S, Tokuda, T, Mizuno, T, Tanaka, M
  • 雑誌名: PLos One 巻: 9 号: 2 ページ: e89327-e89327
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0089327
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Enhancement of alcohol drinking in mice depends on alterations in RNA editing of serotonin 2C receptors. (2014)
  • 著者名/発表者名: Watanabe Y, Yoshimoto K, Tatebe H, Kita M, Nishikura K, Kimura M, Tanaka M
  • 雑誌名: Int J Neuropsychopharmacol 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Behavioral analysis of relaxin-3 deficient mice (2013)
  • 著者名/発表者名: Tanaka, M., Furube, E., Aoki, M., Watanabe, Y.
  • 雑誌名: Ital J Anat Embryol 巻: 118 ページ: 56-59
  • DOI: 10.13128/IJAE-13893
  • 査読あり
• [学会発表] Alteration in RNA editing of serotonin2C receptors is involved in alcohol drinking in mice. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tanaka M
  • 学会等名: 第120回日本解剖学会総会・第92回生理学会合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2015-03-21 – 2015-03-23
  • 招待講演
• [学会発表] Development of Tango system for the monitoring of 5-HT2CR activity. (2014)
  • 著者名/発表者名: Watanabe Y, Tsujimura A, Aoki M, Taguchi K, Tanaka M.
  • 学会等名: 44th Annual Meeting of the Society for Neuroscience.
  • 発表場所: Washington D. C., USA
  • 年月日: 2014-11-15 – 2014-11-19
• [学会発表] Tangoを利用した5- HT_2c R活性のモニタリングシステムの開発. (2014)
  • 著者名/発表者名: 渡邊義久, 辻村敦, 青木美空, 田口勝敏, 田中雅樹.
  • 学会等名: 第37回日本神経科学大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-11 – 2014-09-13
• [学会発表] 受容体RNA編集の脳高次機能への役割～RNA未編集マウスの行動解析～. (2014)
  • 著者名/発表者名: 青木美空, 渡邊義久, 吉本寛司, 田中雅樹.
  • 学会等名: 第37回日本神経科学大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-11 – 2014-09-13
• [学会発表] RNA editing of serotonin 2C receptor is involved in alcohol intake. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tanaka M, Watanabe Y, Yoshimoto K, Nishikura K, Kimura M.
  • 学会等名: 20th International Symposium on Regulatory Peptides.
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2014-09-07 – 2014-09-10
  • 招待講演
• [学会発表] Tangoを利用した5- HT2CR活性のモニタリングシステムの開発. (2014)
  • 著者名/発表者名: 渡邊義久, 辻村敦, 田中雅樹.
  • 学会等名: 第11回GPCR研究会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-05-09 – 2014-05-10
• [学会発表] Development of Tango live imaging system of 5-HT2CR activity
  • 著者名/発表者名: Watanabe Y, Tsujimura A, Taguchi K, Aoki M, Tanaka M
  • 学会等名: 第３６回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Involvement of 5-HT2CR-editing in alcohol preference.
  • 著者名/発表者名: Watanabe Y, Yoshimoto K, Tatebe H, NIshikura K, Kimura M, Tanaka M.
  • 学会等名: Society for Neuroscience
  • 発表場所: San Diego, USA
• [学会発表] 5-HT2C受容体RNA編集の脳高次機能への役割
  • 著者名/発表者名: 青木美空、渡邊義久、吉本寛司、田中雅樹
  • 学会等名: 日本行動神経内分泌研究会 第４回関西支部会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 5-HT2C受容体RNA編集のアルコール嗜好性への関与
  • 著者名/発表者名: 渡邊義久、吉本寛司、木村實、田中雅樹
  • 学会等名: 日本行動神経内分泌研究会 第４回関西支部会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Symposium:Protein Metabolism and Homeostasis in Aging. Exoression and Lewy Body-like Aggregation of alpha-synuclein in cultured cells.
  • 著者名/発表者名: Tanaka M.
  • 学会等名: 1st Annual World Congress of Geriatrics and Gerontology
  • 発表場所: Dalian, Chiana
• [図書] Alpha-Synuclein: Functional Mechanisms, Structure and Role in Parkinson’s Disease (2013)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, Y., Tsujimura, A., Taguchi, K., Tanaka, M.
  • 出版者: Nova Science Publishers Inc
• [備考] 基礎老化学（教室ホームページ）
  • URL: http://www.f.kpu-m.ac.jp/k/cellbio/
• [備考] 大学ホームページ研究室紹介
  • URL: http://www.kpu-m.ac.jp/doc/classes/igaku/seitai/41.html
• [備考] 基礎老化学（教室ホームページ） 研究業績
  • URL: http://www.f.kpu-m.ac.jp/k/cellbio/Pub_list.html
• [備考] 大学ホームページ 研究室紹介
  • URL: http://www.kpu-m.ac.jp/doc/classes/fuzoku/noukekkan/239.html