真核生物のミスマッチ修復反応に関わる因子の網羅的同定

• 研究課題/領域番号: 25650011
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 分子生物学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 高橋 達郎 大阪大学, 理学(系)研究科(研究院), 助教 (50452420)
• 研究協力者: 河添 好孝 ; 照井 利輝
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2014年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2013年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: ミスマッチ修復 / クロマチン / DNA損傷応答 / DNA複製 / ツメガエル / 卵抽出液 / 試験管内系 / DNA修復 / 染色体 / 無細胞系

研究成果の概要

真核生物の染色体DNAはヒストンに巻き取られクロマチン構造を取る。クロマチンの動的変換と遺伝情報維持反応の協調は、DNA安定維持機構の重要な研究対象である。ミスマッチ修復は遺伝情報の維持に必須の機構であり、その破綻はヒトでは発がんに直結する。本研究では、試験管内でクロマチン形成を再現するツメガエル卵抽出液を用いて、クロマチン上でミスマッチに結合する因子の探索と解析を行った。結果、これまでミスマッチ修復への寄与が知られていない9の因子を同定し、うち3はクロマチン関連因子であった。本研究成果はクロマチン上でのミスマッチ修復解明に向けての重要な土台となる。

研究成果

• [雑誌論文] RecQ4 promotes the conversion of the pre-initiation complex at a site-specific origin for DNA unwinding in Xenopus egg extracts (2015)
  • 著者名/発表者名: Sanuki, Kubota, Kanemaki MT, Takahashi TS, Mimura S, Takisawa H
  • 雑誌名: Cell Cycle 巻: 14-7 号: 7 ページ: 1010-23
  • DOI: 10.1080/15384101.2015.1007003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Thymine DNA glycosylase is a CRL4Cdt2 substrate. (2014)
  • 著者名/発表者名: Slenn TJ, Morris B, Havens CG, Freeman RM Jr, Takahashi TS, Walter JC.
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 巻: 289 号: 33 ページ: 23043-55
  • DOI: 10.1074/jbc.m114.574194
  • 査読あり
• [雑誌論文] MutS stimulates the endonuclease activity of MutL in an ATP-hydrolysis-dependent manner. (2013)
  • 著者名/発表者名: Shimada, A., Kawasoe, Y., Hata, Y., Takahashi, T.S., Masui, R., Kuramitsu, S., Fukui, K.
  • 雑誌名: FEBS Journal 巻: 280 (14) 号: 14 ページ: 3467-3479
  • DOI: 10.1111/febs.12344
  • 査読あり
• [学会発表] PCNAとXEco2はDNA複製と協調したSororin染色体結合反応に機能する (2014)
  • 著者名/発表者名: 高橋 達郎
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市 パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
  • 招待講演
• [学会発表] ミスマッチ修復因子MutSαはPCNAのDNAからの解離を阻害することで新生鎖の記憶を保持する (2014)
  • 著者名/発表者名: 河添 好孝
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市 パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] MutSα依存的なミスマッチ塩基対周辺のヌクレオソーム排除反応 (2014)
  • 著者名/発表者名: 照井 利輝
  • 学会等名: 第37回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市 パシフィコ横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] MutSα-dependent exclusion of nucleosomes from mismatch sites in Xenopus egg extracts (2014)
  • 著者名/発表者名: 高橋 達郎
  • 学会等名: The 9th 3R Symposium
  • 発表場所: 静岡県御殿場市 ホテル時之栖
  • 年月日: 2014-11-17 – 2014-11-21
• [学会発表] PCNA and XEco2 couple chromatin loading of Sororin to DNA replication in Xenopus egg extracts (2014)
  • 著者名/発表者名: 東 寅彦
  • 学会等名: The 9th 3R Symposium
  • 発表場所: 静岡県御殿場市 ホテル時之栖
  • 年月日: 2014-11-17 – 2014-11-21
• [学会発表] MutSα prevents dissociation of PCNA from DNA to keep strand information for eukaryotic mismatch repair (2014)
  • 著者名/発表者名: 河添 好孝
  • 学会等名: The 9th 3R Symposium
  • 発表場所: 静岡県御殿場市 ホテル時之栖
  • 年月日: 2014-11-17 – 2014-11-21
• [学会発表] MutSα prevents PCNA unloading to keep strand information for eukaryotic mismatch repair (2014)
  • 著者名/発表者名: 高橋 達郎
  • 学会等名: 国立遺伝学研究所・研究集会「染色体 DNA の安定維持の分子メカニズム」
  • 発表場所: 静岡県三島市 国立遺伝学研究所
  • 年月日: 2014-11-06 – 2014-11-07
  • 招待講演
• [学会発表] MutSα prevents dissociation of PCNA from DNA to keep strand information for eukaryotic mismatch repair (2014)
  • 著者名/発表者名: 高橋 達郎
  • 学会等名: The 5th US-Japan DNA repair meeting
  • 発表場所: 徳島県鳴門市 グランドエクシブ鳴門
  • 年月日: 2014-10-28 – 2014-10-31
• [学会発表] ミスマッチ修復とクロマチン複製のカップリング (2014)
  • 著者名/発表者名: 高橋 達郎
  • 学会等名: 蛋白研セミナー 『染色体伝承の分子背景：複製から染色体分離まで』
  • 発表場所: 大阪府吹田市 大阪大学蛋白質研究所 1 階講堂
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-26
  • 招待講演
• [学会発表] MutSα-dependent eviction of nucleosomes around mismatch sites in Xenopus egg extracts (2014)
  • 著者名/発表者名: Tatsuro Takahashi, Riki Terui, Kanae Taki, koji Nagao, Takuro Nakagawa, Yumiko Kubota, Haruhiko Takisawa, Chikashi Obuse, Hisao Masukata
  • 学会等名: International Conference: Replication, repair, and transcription; coupling mechanisms and chromatin dynamics for genome integrity
  • 発表場所: 京都市左京区 京都大学 時計台100周年記念ホール
• [学会発表] 真核生物ミスマッチ修復機構とクロマチン動態、DNA損傷応答機構のクロストーク (2014)
  • 著者名/発表者名: 高橋達郎
  • 学会等名: 平成25年度「がん研究分野の特性等を踏まえた支援活動」 公開シンポジウム
  • 発表場所: 東京都千代田区 学術総合センター
  • 招待講演
• [学会発表] Essential roles of the N-terminal region of XEco2 acetyltransferase for cohesion establishment in Xenopus egg extracts (2013)
  • 著者名/発表者名: Torahiko Higashi, Takuro Nakagawa, Hisao Masukata, Tatsuro Takahashi
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratory Meeting "Eukaryotic DNA replication & Genome Maintenance"
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY
• [学会発表] MutSα-dependent eviction of nucleosomes around mismatch sites in Xenopus egg extracts (2013)
  • 著者名/発表者名: Riki Terui, Kanae Taki, Torahiko Higashi, Takuro Nakagawa, Hisao Masukata, Tatsuro Takahashi
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratory Meeting "Eukaryotic DNA replication & Genome Maintenance"
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY
• [学会発表] Evidence that DNA-loaded PCNA acts as the strand marker for eukaryotic mismatch repair (2013)
  • 著者名/発表者名: Yoshitaka Kawasoe, Toshiki Tsurimoto,Takuro Nakagawa, Hisao Masukata, Tatsuro Takahashi
  • 学会等名: Cold Spring Harbor Laboratory Meeting "Eukaryotic DNA replication & Genome Maintenance"
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY
• [学会発表] MutSα-dependent eviction of nucleosomes around mismatch sites in Xenopus egg extracts (2013)
  • 著者名/発表者名: Tatsuro Takahashi, Riki Terui, Kanae Taki, Koji Nagao, Takuro Nakagawa, Uimiko Kubota, Haruhiko Takisawa, Chikashi Obuse, Hisao Masukata
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 兵庫県神戸市 神戸国際会議場
  • 招待講演
• [学会発表] ミスマッチ周辺でのMutS依存的ヌクレオソーム除去反応に関わる因子の探索 (2013)
  • 著者名/発表者名: Riki Terui, Kanae Taki, koji Nagao, Takuro Nakagawa, Yumiko Kubota, Haruhiko Takisawa, Chikashi Obuse, Hisao Masukata
  • 学会等名: 第36回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 兵庫県神戸市 神戸国際会議場
• [学会発表] ミスマッチ修復機構がクロマチン複製の場で機能するための機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 高橋達郎
  • 学会等名: 国立遺伝学研究所・研究会「染色体 DNA の安定維持の分子メカニズム」
  • 発表場所: 静岡県三島市 国立遺伝学研究所
• [学会発表] ミスマッチ修復機構がクロマチン複製の場で機能するための機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 高橋達郎
  • 学会等名: 国立遺伝学研究所・研究会「クロマチンによる遺伝情報のエピジェネティック制御機構」
  • 発表場所: 静岡県三島市 国立遺伝学研究所
• [学会発表] Coupling of cohesin acetylation to the process of DNA replication in Xenopus egg extracts
  • 著者名/発表者名: Torahiko Higashi, Takuro Nakagawa, Hisao Masukata, Tatsuro Takahashi
  • 学会等名: The 18th IMCB Symposium
  • 発表場所: 東京都文京区 東京大学弥生講堂
  • 招待講演