非天然型アミノ酸を有する新規機能性抗体の安定的生産システムの開発

• 研究課題/領域番号: 25670023
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 樋野 展正 大阪大学, 薬学研究科(研究院), 助教 (90469916)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 拡張遺伝暗号 / 非天然型アミノ酸 / tRNA / 抗体薬物複合体 / 非天然アミノ酸 / 部位特異的修飾

研究成果の概要

非天然型アミノ酸を部位特異的に含有する抗体を生産するには，サプレッサーtRNAと呼ばれる外来tRNAを効率的に発現する細胞株の取得が必要である．tRNAの発現効率を改善するため，外来tRNAを内在性tRNAと同じく核小体から発現させることを目指したベクターを構築した．実際に，これらのベクターを用いることで，タンパク質への非天然型アミノ酸導入効率を２倍程度に向上させることに成功した．

研究成果

• [雑誌論文] Endothelial cell-specific expression of roundabout 4 is regulated by differential DNA methylation of the proximal promoter (2014)
  • 著者名/発表者名: Okada, Y., Funahashi, N., Tanaka, T., Nishiyama, Y., Yuan, L., Shirakura, K., Turjman, A. S., Kano, Y., Naruse, H., Suzuki, A., Sakai, M., Zhixia, J., Kitajima, K., Ishimoto, K., Hino, N., Kondoh, M., Mukai, Y., Nakagawa, S., Garcia-Cardena, G., Aird, W. C., Doi, T.
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb. Vasc. Biol. 巻: 34 号: 7 ページ: 1531-1538
  • DOI: 10.1161/atvbaha.114.303818
  • 査読あり
• [学会発表] タンパク質間の相互作用部位の解析を可能にする細胞内光クロスリンク技術の開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 一瓢奨
  • 学会等名: 第13回次世代を担う若手ファーマ・バイオフォーラム2014
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 2014-09-20 – 2014-09-21
• [学会発表] 非天然型アミノ酸含有タンパク質の安定生産系の構築 (2014)
  • 著者名/発表者名: 喜多絢海、一瓢奨、樋野展正、土井健史
  • 学会等名: 日本ケミカルバイオロジー学会 第９回年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-06-11 – 2014-06-13
• [学会発表] プローブ転移能を有する光クロスリンカーを用いた細胞内タンパク質間相互作用解析法の開発 (2014)
  • 著者名/発表者名: 一瓢奨、喜多絢海、張功幸、高島成二、樋野展正、土井健史
  • 学会等名: 日本ケミカルバイオロジー学会 第９回年会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2014-06-11 – 2014-06-13
• [備考]
  • URL: http://www.phs.osaka-u.ac.jp/homepage/b018/index.html