ATRの新規基質の網羅的同定及び機能解析

• 研究課題/領域番号: 25701005
• 研究種目: 若手研究(A)
• 配分区分: 一部基金
• 研究分野: 放射線・化学物質影響科学
• 研究機関: 国立研究開発法人国立がん研究センター (2014-2016); 広島大学 (2013)
• 研究代表者: 塩谷 文章 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 主任研究員 (10627665)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 23,660千円 (直接経費: 18,200千円、間接経費: 5,460千円); 2016年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2015年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2014年度: 5,720千円 (直接経費: 4,400千円、間接経費: 1,320千円); 2013年度: 9,100千円 (直接経費: 7,000千円、間接経費: 2,100千円)
• キーワード: ATR / DNA損傷応答 / DNA複製ストレス / ＤＮＡ損傷・修復 / ＤＮＡ複製 / 細胞周期 / 翻訳後修飾 / 細胞増殖・細胞死 / DNA damage

研究成果の概要

ATRはDNA損傷応答を制御し、ゲノムの安定性を維持するキナーゼである。ATRはより広範なDNA損傷に応答し、多様な機能を示す事が明らかにされてきている。本課題ではATRのDNA構造依存的な活性化を基にATRの直接的な基質を網羅的同定し機能を明らかにする事を目的に研究を行った。成果として、DNA二本鎖切断部位における新規ATR活性化機構を見出した。またアナログ感受性ATR変異体を作成し、多くの未知基質の検出及び同定に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] requent amplification of receptor tyrosine kinase genes in well-differentiated/dedifferentiated liposarcoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Asano N, Yoshida A, Mitani S, Kobayashi E, Shiotani B, Komiyama M, Fujimoto H, Chuman H, Morioka H, Matsumoto M, Nakamura M, Kubo T, Kato M, Kohno T, Kawai A, Kondo T, Ichikawa H.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 8 号: 8 ページ: 12941-12952
  • DOI: 10.18632/oncotarget.14652
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] UV Damage-Induced Phosphorylation of HBO1 Triggers CRL4DDB2-Mediated Degradation To Regulate Cell Proliferation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsunuma R, Niida H, Ohhata T, Kitagawa K, Sakai S, Uchida C, Shiotani B, Matsumoto M, Nakayama KI, Ogura H, Shiiya N, Kitagawa M.
  • 雑誌名: Mol Cell Biol. 巻: 36 号: 3 ページ: 394-406
  • DOI: 10.1128/mcb.00809-15
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] CBP-93872 inhibits NBS1-mediated ATR activation, abrogating maintenance of the DNA double-strand break-specific G2 checkpoint. (2014)
  • 著者名/発表者名: Hirokawa T, Shiotani B, Shimada M, Murata K, Johmura Y, Haruta M, Tahara H, Takeyama H, Nakanishi M.
  • 雑誌名: Cancer Res. 巻: 74 号: 14 ページ: 3880-9
  • DOI: 10.1158/0008-5472.can-13-3604
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] DSE-FRET : A new anticancer drug screening assay for DNA binding proteins (2014)
  • 著者名/発表者名: Miyagi T, Shiotani B, Miyoshi R, Yamamoto T, Oka T, Umezawa K, Ochiya T, Takano M, Tahara H
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: (in press) 号: 7 ページ: 870-874
  • DOI: 10.1111/cas.12420
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Two distinct modes of ATR activation orchestrated by Rad17 and Nbs1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Shiotani B, Nguyen HD, Hakansson P, Marechal A, Tse A, Tahara H, Zou L
  • 雑誌名: Cell Rep 巻: 3(5) 号: 5 ページ: 1651-62
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2013.04.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] Curcumin suppresses multiple DNA damage response pathways and has potency as a sensitizer to PARP inhibitor. (2013)
  • 著者名/発表者名: Ogiwara H, Ui A, Shiotani B, Zou L, Yasui A, Kohno T
  • 雑誌名: Carcinogenesis 巻: 34 号: 11 ページ: 2486-2497
  • DOI: 10.1093/carcin/bgt240
  • 査読あり
• [学会発表] Bunsyo Shiotani (2016)
  • 著者名/発表者名: Establishment of direct substrates identifying system by analog sensitive-ATR kinase
  • 学会等名: 第39回 日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜 （神奈川県 横浜市）
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] Identification of ATR substrates utilizing analog ATP sensitive-ATR (2016)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani
  • 学会等名: 第75回 日本癌学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜 （神奈川県 横浜市）
  • 年月日: 2016-10-06
• [学会発表] Development of a direct ATR substrates identification system utilizing ATP analog (2016)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani
  • 学会等名: Gordon Research Conference
  • 発表場所: Hong Kong (China)
  • 年月日: 2016-07-24
  • 国際学会
• [学会発表] Dark side of ATR (2016)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章
  • 学会等名: DNA 損傷応答ワークショップ 浜名湖ミーティング
  • 発表場所: 浜名湖弁天リゾート ジ・オーシャン（静岡県 浜松市）
  • 年月日: 2016-04-04
• [学会発表] Sensing and signaling of DNA damage by master checkpoint kinase ATM and ATR (2016)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani and Hitoshi Zembustu
  • 学会等名: Tenth AACR-JCA Joint Conference
  • 発表場所: Hawai
  • 年月日: 2016-02-16
  • 国際学会
• [学会発表] ATPアナログを利用したATR基質同定法の開発 (2015)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani
  • 学会等名: BMB2015
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] ATMとATRが制御するDNA二本鎖切断部位におけるゲノム安定性維持機構 (2015)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章、前佛均、Lee Zou
  • 学会等名: 日本人類遺伝学会第60回大会
  • 発表場所: 新宿
  • 年月日: 2015-10-14
• [学会発表] Nbs1-mediated ATR activation maintaining G2 checkpoint at resected DNA double stranded breaks (2015)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani Takahisa Hirokawa, Makoto Nakanishi, and Lee Zou
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2015-10-08
• [学会発表] Identification and dissection of ATR substrates (2015)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章
  • 学会等名: 国立遺伝学研究所・研究集会 「染色体DNAの安定維持の分子メカニズム」
  • 発表場所: 三島
  • 年月日: 2015-10-01
• [学会発表] Revisiting ATR functions in safeguarding genome stability (2015)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章
  • 学会等名: 第4回DNA損傷ワークショップ
  • 発表場所: 浜名湖
  • 年月日: 2015-04-02
• [学会発表] microRNA による細胞老化誘導機構の解明 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山本佑樹, 塩谷文章, 嶋本顕, 田原栄俊
  • 学会等名: 第３７回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] NFkB DSE-FRET assay を用いた、転写因子NFkB結合阻害剤の探索 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山本拓弥 宮城徹 塩谷文章 梅澤一夫 田原栄俊
  • 学会等名: 第３７回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] Biphasic activation of ATR induced by DSBs (2014)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani
  • 学会等名: 国立遺伝研究所 研究集会「染色体DNAの安定維持の分子メカニズム」
  • 発表場所: 三島
  • 年月日: 2014-11-06 – 2014-11-07
• [学会発表] Activation and regulation of ATR at double-stranded DNA breaks (2014)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani
  • 学会等名: 日本放射線影響学会第５７回大会
  • 発表場所: 鹿児島
  • 年月日: 2014-10-01 – 2014-10-03
• [学会発表] 人工多能性幹細胞（iPS細胞）のX線高感受性の分子機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 嶋本彰 香川晴信 河合秀彦 佐久間哲史 山本卓 塩谷文章 田原栄俊
  • 学会等名: 日本放射線影響学会第５７回大会
  • 発表場所: 鹿児島
  • 年月日: 2014-10-01 – 2014-10-03
• [学会発表] Depletion of PRPF19 induces cellular senescence through p53-mediated mechanism (2014)
  • 著者名/発表者名: unsyo Shiotani, Tomoki Shidooka, and Hidetoshi Tahara
  • 学会等名: 第７３回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [学会発表] miR-27bの発現上昇に伴う標的遺伝子PRPF19の発現低下はヒト繊維芽細胞の細胞老化に関与する (2014)
  • 著者名/発表者名: 志戸岡友希 塩谷文章 矢野公義 嶋本彰 田原栄俊
  • 学会等名: 第６回RNAi研究会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 2014-08-28 – 2014-08-30
• [学会発表] Two distinct modes of ATR activation orchestrated by Rad17 and Nbs1 at resected DNA double stranded breaks (2014)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani, Takahisa Hirokawa, Hai Dang Nguyen, Pelle Hakansson, Alexandre Marechal, Alice Tse, Hidetoshi Tahara, Makoto Nakanishi, and Lee Zou
  • 学会等名: Gordon Research Conference Genome Instability
  • 発表場所: Hong Kong
  • 年月日: 2014-07-06 – 2014-07-11
• [学会発表] PRPF19の発現抑制による細胞老化及び老化誘導型抗がん核酸医薬の可能性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章 田原栄俊
  • 学会等名: 第１８回 がん分子標的治療学会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2014-06-25 – 2014-06-27
• [学会発表] NFkB DSE-FRET assay を用いた、転写因子NFkB結合阻害剤の探索 (2014)
  • 著者名/発表者名: 山本拓弥 宮城徹 塩谷文章 嶋本彰 田原栄俊
  • 学会等名: 第１８回 がん分子標的治療学会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2014-06-25 – 2014-06-27
• [学会発表] Silencing of PRPF19 triggers cellular senescence in normal human fibroblasts (2014)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章
  • 学会等名: 第１回 Genome Damage Network Workshop
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2014-06-05 – 2014-06-06
• [学会発表] PRPF19発現抑制による正常細胞老化誘導機構 (2014)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章
  • 学会等名: 第３回DNA損傷応答ワークショップ
  • 発表場所: 浜名湖
  • 年月日: 2014-04-03 – 2014-04-04
• [学会発表] Regulation of ATR checkpoint pathway at DSB (2013)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章
  • 学会等名: 第２回DNA損傷応答ワークショップ
  • 発表場所: 浜名湖
• [学会発表] PRPF19の発現抑制による細胞老化誘導とがん分子標的としての可能性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章、田原 栄俊
  • 学会等名: 第17回がん分子標的治療学会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] ATR activation regulated by Nbs1 at DSB (2013)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章、田原栄俊、Zou Lee,
  • 学会等名: 第65回日本細胞生物学会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] 細胞老化におけるPRPF19 の発現抑制に関与するmiRNAの解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 志戸岡友希、塩谷文章、鶴崎慎也、田原栄俊
  • 学会等名: 日本RNAi研究会第5回
  • 発表場所: 広島
• [学会発表] PRPF19の発現抑制はDNA損傷を誘発し細胞老化を誘導する (2013)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章、志戸岡友希、田原栄俊
  • 学会等名: 日本癌学会第72回総会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] 細胞老化におけるPRPF19の発現抑制に関与するmiR-27bの解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 志戸岡 友希, 鶴崎 慎也, 塩谷文章, 嶋本顕, 田原栄俊
  • 学会等名: 日本分子生物学年会36回
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] PRPF19 をターゲットとした siRNA の抗がん剤としての応用の可能性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 鶴崎慎也, 塩谷文章, 志戸岡友希, 嶋本顕,田原栄俊
  • 学会等名: 日本分子生物学年会36回
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] 56. Telomere DSE-FRET assay を用いた、テロメア結合タンパク質TRF2の結合阻害剤の探索と機能解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 三好龍也, 新家一男, 清宮啓之, 塩谷文章, 嶋本顕, 田原栄俊
  • 学会等名: 日本分子生物学年会36回
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] 人工多能性幹細胞における X 線に対する高感受性細胞死の p53 依存的な誘導機構の解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 香川晴信, 河合秀彦, 佐久間哲史, 山本卓, 塩谷文章, 嶋本顕, 田原栄俊
  • 学会等名: 日本分子生物学年会36回
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] ATM/ATR依存的リン酸化はHBO1を複製起点から遊離させる (2013)
  • 著者名/発表者名: 丹伊田浩行, 塩谷文章, 松本雅記, 西谷秀男, 北川雅敏
  • 学会等名: 日本分子生物学年会36回
  • 発表場所: 神戸
• [図書] DNA Replication, Recombination, and Repair-Molecular Mechanisms and Pathology (2016)
  • 著者名/発表者名: Bunsyo Shiotani, Lee Zou
  • 総ページ数: 24
  • 出版者: Springer Japan
• [図書] DNA replication, Recombination, and Repair-Molecular Mechanisms and Pathology (2015)
  • 著者名/発表者名: Bunstyo Shiotani and Lee Zou
  • 総ページ数: 24
  • 出版者: Springer
• [図書] 血液内科 (2014)
  • 著者名/発表者名: 塩谷文章 田原栄俊
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: 科学評論社
• [図書] DNA Replication, Recombination and Repair - Molecular Mechanisms and Pathology, (2014)
  • 著者名/発表者名: Shiotani B and Zou L
  • 出版者: Springer
• [備考] 国立研究開発法人国立がん研究センター研究所
  • URL: http://www.nccri.ncc.go.jp/