哺乳類細胞発現系組み換え蛋白質を使った天疱瘡のドメイン特異的ELISA法の確立

• 研究課題/領域番号: 25860973
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 皮膚科学
• 研究機関: 久留米大学
• 研究代表者: 大山 文悟 久留米大学, 医学部, 講師 (90461441)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2016-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2015年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2014年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円); 2013年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 自己免疫性水疱症 / エピトープ解析 / ドメイン特異的ELISA法 / 哺乳類細胞発現系組み換え蛋白質 / 昆虫細胞発現系組み換え蛋白質 / 免疫沈降法 / 免疫ブロット法 / ELISA法 / バキュロウイルス発現系 / 哺乳細胞発現系

研究成果の概要

天疱瘡は自己免疫性水疱症で、抗原であるデスモグレイン（Dsg）1、Dsg3、デスモコリン（Dsc）1、およびDsc3の細胞外領域のEC（extracellular ）1からEC5の5つの領域に自己抗体が反応し、各Dsg（あるいはDsc）間の表皮細胞間接着が失われ水疱を形成する。
本研究ではバキュロウイルス発現系を発展させ、より生体に近い蛋白質である哺乳細胞からDsg（あるいはDsc）組み換え蛋白質を用いて、患者自己抗体が反応するエピトープを簡便に検査できるELISA法の確立を目指した。その研究成果の論文報告を行い、更に哺乳細胞発現系を用いたデスモコリンELISAを確立し論文報告した。

研究成果

• [雑誌論文] Establishment of IgA ELISAs of mammalian recombinant proteins of human desmocollins 1-3. (2016)
  • 著者名/発表者名: eye K, Numata S, Ohzono A, Ohyama B, Tsuchisaka A, Koga H, Hachiya T, Tsuruta D, Ishii N, Hashimoto T
  • 雑誌名: J Dermatol Sci 巻: 印刷中 号: 1 ページ: 75-77
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2016.04.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical and immunological profiles in 17 Japanese patients with drug-induced pemphigus studied at Kurume University. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yoshimura K, Ishii N, Hamada T, Abe T, Ono F, Hashikawa K, Fukuda S, Ohyama B, Koga H, Sogame R, Teye K, Ochiai T, Nakajima H, Nakajima K, Iijima S, Kanzaki M, Kojima K, Nagatani T, Fujimoto W, Karashima T, Nakama T, Ohata C, Furumura M, Tsuruta D, Hashimoto T
  • 雑誌名: Br J Dermatol 巻: 171 号: 3 ページ: 544-553
  • DOI: 10.1111/bjd.12925
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of Autoantibodies to Precursor Proteins of Desmogleins in Sera of a Patient with Bowen Carcinoma (2014)
  • 著者名/発表者名: Demitsu T, Yamada T, Nakamura S, Kakurai M, Dohmoto T, Kamiya K, Aoyama Y, Iwatsuki K, Yamagami J, Ohyama B, Ohata C, Koga H, Hashimoto T
  • 雑誌名: Acta Derm Venereol 巻: 94 号: 5 ページ: 601-603
  • DOI: 10.2340/00015555-1776
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antibodies to the amino-terminal domain of desmoglein 1 are retained during transition from pemphigus vulgaris to pemphigus foliaceus. (2014)
  • 著者名/発表者名: Espana A, Koga H, Suarez-Fernandez R, Ohata C, Ishii N, Irarrazaval I, Teye K, Ohyama B, Hashimoto T
  • 雑誌名: Eur J Dermatol 巻: in press
  • 査読あり