スリランカにおける牛ピロプラズマ症の制圧に向けた実践研究

• 研究課題/領域番号: 26257417
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 海外学術
• 研究分野: 獣医学
• 研究機関: 帯広畜産大学
• 研究代表者: 横山 直明 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (80301802)
• 研究分担者: 井上 昇 帯広畜産大学, その他部局等, 理事・副学長 (10271751) ; 林田 京子 大分大学, 医学部, 助教 (40615514)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2018-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2018年度)
• 配分額: 42,900千円 (直接経費: 33,000千円、間接経費: 9,900千円); 2017年度: 9,100千円 (直接経費: 7,000千円、間接経費: 2,100千円); 2016年度: 9,100千円 (直接経費: 7,000千円、間接経費: 2,100千円); 2015年度: 9,100千円 (直接経費: 7,000千円、間接経費: 2,100千円); 2014年度: 15,600千円 (直接経費: 12,000千円、間接経費: 3,600千円)
• キーワード: スリランカ / 牛 / 水牛 / ピロプラズマ / バベシア / タイレリア / 診断 / マダニ / ピロプラズマ原虫 / ウシ / 疫学調査 / 制御 / 治療薬 / ワクチン / トリパノソーマ / 牛ピロプラズマ症 / 診断法

研究成果の概要

本研究では、まず１）スリランカ国の原虫病診断に活用できる遺伝子診断法（PCR法）や血清診断法（ELISA）を確立した。次に、それらの技術を用いて、２）スリランカ国の牛ピロプラズマ病（バベシア病やタイレリア病）や牛トリパノソーマ病に関する疫学情報を収集した。特にスリランカ国で牛に高い病原性を示す新しいバベシア種を発見した。さらに、３）予防ワクチンや治療薬の開発に繋がる新たな原虫抗原（BOV57、Profilinなど）や候補薬剤（Clofazimine、Dipyridamoleなど）を同定した。最後に、４）バベシアやタイレリアの疫学分布や遺伝学的特徴に関する総説をまとめた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究の成果により、スリランカで発生している牛ピロプラズマ症の被害を軽減するための有用な知見と手法を確立できた。今後、スリランカ国で実装可能な牛ピロプラズマ症の制圧法を現地連携研究者と共同で確立していくとともに、スリランカ国内の牛ピロプラズマ症の制圧に貢献する。また、そのスリランカモデルを世界に提唱していく。

研究成果

• [国際共同研究] スリランカ獣医学研究所(スリランカ)
• [国際共同研究] モンゴル生命科学大学・獣医学研究所(モンゴル)
• [国際共同研究] 獣医学研究所(スリランカ)
• [国際共同研究] フエ大学/フエ農林大学(ベトナム)
• [国際共同研究] 獣医学研究所(モンゴル)
• [国際共同研究] サダト市立大学(エジプト)
• [国際共同研究] ナイロビ大学(ケニア)
• [国際共同研究]
• [国際共同研究] 獣医学研究所(スリランカ)
• [国際共同研究] 獣医学研究所(スリランカ)
• [国際共同研究] 国立動物科学研究所(タイ)
• [国際共同研究] フエ大学/フエ農林大学(ベトナム)
• [国際共同研究] ビサヤス州立大学(フィリピン)
• [雑誌論文] Babesia bovis BOV57, a Theileria parva P67 homolog, is an invasion-related, neutralization-sensitive antigen (2017)
  • 著者名/発表者名: Ishizaki Takahiro、Sivakumar Thillaiampalam、Hayashida Kyoko、Takemae Hitoshi、Tuvshintulga Bumduuren、Munkhjargal Tserendorj、Guswanto Azirwan、Igarashi Ikuo、Yokoyama Naoaki
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 54 ページ: 138-145
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2017.06.025
  • NAID: 120006411414
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Babesia ovata: Taxonomy, phylogeny and epidemiology (Review). (2016)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar, T., Igarashi, I., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: Vet. Parasitol. 巻: 229 ページ: 99-106
  • DOI: 10.1016/j.vetpar.2016.10.006
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Epidemiology of bovine hemoprotozoa parasites in cattle and water buffalo in Vietnam (2016)
  • 著者名/発表者名: Weerasooriya, G., Sivakumar, T., Lan, D.T., Long, P.T., Takemae, H., Igarashi, I., Inoue, N., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ 巻: 78 号: 8 ページ: 1361-1367
  • DOI: 10.1292/jvms.16-0099
  • NAID: 130005261519
  • ISSN: 0916-7250, 1347-7439
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Large-scale drug screening against Babesia divergens parasite using a fluorescence-based high-throughput screening assay. (2016)
  • 著者名/発表者名: Rizk, M.A., El-Sayed, S.A., AbouLaila, M., Tuvshintulga, B., Yokoyama, N., and Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet. Parasitol. 巻: 227 ページ: 93-7
  • DOI: 10.1016/j.vetpar.2016.07.032
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Recombinant methionine aminopeptidase protein of Babesia microti: immunobiochemical characterization as a vaccine candidate against human babesiosis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Munkhjargal, T., Yokoyama, N., and Igarashi, I.
  • 雑誌名: Parasitol. Res. 巻: 115 号: 9 ページ: 3669-76
  • DOI: 10.1007/s00436-016-5172-5
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Genetic diversity and antigenicity variation of Babesia bovis merozoite surface antigen-1 (MSA-1) in Thailand. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tattiyapong, M., Sivakumar, T., Takemae, H., Simking, P., Jittapalapong, S., Igarashi, I., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: Infect. Genet. Evol. 巻: 41 ページ: 255-261
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2016.04.021
  • NAID: 120006390947
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Molecular and biochemical characterization of methionine aminopeptidase of Babesia bovis as a potent drug target. (2016)
  • 著者名/発表者名: Munkhjargal, T., Ishizaki, T., Guswanto, A., Takemae, H., Yokoyama, N., and Igarashi, I.
  • 雑誌名: Vet. Parasitol. 巻: 221 ページ: 14-23
  • DOI: 10.1016/j.vetpar.2016.02.024
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Identification and characterization of profilin antigen among Babesia species as a common vaccine candidate against babesiosis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Munkhjargal, T., Aboge, G.O., Ueno, A., Aboulaila, M., Yokoyama, N., and Igarashi I.
  • 雑誌名: Exp. Parasitol. 巻: 166 ページ: 29-36
  • DOI: 10.1016/j.exppara.2016.03.024
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] RBC Invasion and invasion-inhibition assays using free merozoites isolated after cold treatment of Babesia bovis in vitro culture. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ishizaki, T., Sivakumar, T., Hayashida, K., Tuvshintulga, B., Igarashi, I., and Yokoyama N.
  • 雑誌名: Exp. Parasitol. 巻: 166 ページ: 10-15
  • DOI: 10.1016/j.exppara.2016.03.010
  • NAID: 120006390946
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Clofazimine inhibits the growth of Babesia and Theileria parasites in vitro and in vivo. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tuvshintulga, B., AbouLaila, M., Davaasuren, B., Ishiyama, A., Sivakumar, T., Yokoyama, N., Iwatsuki, M., Otoguro, K., Omura, S., and Igarashi, I.
  • 雑誌名: Antimicrob. Agents Chemother. 巻: 60 号: 5 ページ: 2739-46
  • DOI: 10.1128/aac.01614-15
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Type-specific PCR assays for Babesia bovis msa-1 genotypes in Asia: Revisiting the genetic diversity in Sri Lanka, Mongolia, and Vietnam. (2016)
  • 著者名/発表者名: Liyanagunawardena N, Sivakumar T, Kothalawala H, Silva SS, Battsetseg B, Lan DT, Inoue N, Igarashi I, Yokoyama N.
  • 雑誌名: Infect Genet Evol. 巻: 37 ページ: 64-69
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2015.10.029
  • NAID: 120006390924
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] A longitudinal study of Babesia and Theileria infections in cattle in Sri Lanka. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar, T., Kothalawala, H., Weerasooriya, G., Silva, S.S.P., Puvanendiran, S., Munkhjargal, T., Igarashi, I., and Yokoyama, N.
  • 雑誌名: Veterinary Parasitology: Regional Studies and Reports 巻: 6 ページ: 20-27
  • DOI: 10.1016/j.vprsr.2016.11.009
  • NAID: 120006390921
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Evaluation of inhibitory effects of dipyridamole against bovine and equine piroplasmosis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tuvshintulga, B., Sivakumar, T., Yokoyama, N., and Igarashi, I.
  • 雑誌名: J. Protozool. Res. 巻: 26 ページ: 40-46
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Genetic diversity in Trypanosoma theileri from Sri Lankan cattle and water buffaloes. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama N, Sivakumar T, Fukushi S, Tattiyapong M, Tuvshintulga B, Kothalawala H, Silva SS, Igarashi I, Inoue N.
  • 雑誌名: Vet Parasitol. 巻: 207 号: 3-4 ページ: 335-41
  • DOI: 10.1016/j.vetpar.2014.12.006
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Molecular and seroepidemiological survey of Babesia bovis and Babesia bigemina infections in cattle and water buffaloes in the central region of Vietnam. (2014)
  • 著者名/発表者名: Li Y, Luo Y, Cao S, Terkawi MA, Lan DT, Long PT, Yu L, Zhou M, Gong H, Zhang H, Zhou J, Yokoyama N, Suzuki H, Xuan X.
  • 雑誌名: Trop Biomed. 巻: 31 ページ: 406-13
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] The Babesia bovis gene and promoter model: an update from full-length EST analysis. (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamagishi J, Wakaguri H, Yokoyama N, Yamashita R, Suzuki Y, Xuan X, Igarashi I.
  • 雑誌名: BMC Genomics 巻: 15 号: 1 ページ: 678-678
  • DOI: 10.1186/1471-2164-15-678
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Evolution and genetic diversity of Theileria. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar T, Hayashida K, Sugimoto C, Yokoyama N.
  • 雑誌名: Infect. Genet. Evol. 巻: 27 ページ: 250-263
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2014.07.013
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Analyses of the binding between Theileria orientalis major piroplasm surface proteins and bovine red blood cells. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takemae H, Horimoto T, et al.
  • 雑誌名: Vet. Rec. 巻: 175 号: 6 ページ: 149-149
  • DOI: 10.1136/vr.102535
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of the inhibitory effects of miltefosine on the growth of Babesia and Theileria parasites. (2014)
  • 著者名/発表者名: 194.AbouLaila, M., Batadoj, D., Salama, A., Munkhjargal, T., Ichikawa-Seki, M., Terkawi, M. A., Yokoyama, N., and Igarashi, I.
  • 雑誌名: Vet. Parasitol. 巻: 204 号: 3-4 ページ: 104-110
  • DOI: 10.1016/j.vetpar.2014.05.023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of a fluorescence-based method for antibabesial drug screening. (2014)
  • 著者名/発表者名: Guswanto A, Sivakumar T, Rizk MA, Elsayed SA, Youssef MA, ElSaid Eel S, Yokoyama N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Antimicrob. Agents Chemother. 巻: 58 号: 8 ページ: 4713-4717
  • DOI: 10.1128/aac.00022-14
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] PCR detection of Babesia ovata from questing ticks in Japan. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar T, Tattiyapong M, Okubo K, Suganuma K, Hayashida K, Igarashi I, Zakimi S, Matsumoto K, Inokuma H, Yokoyama N.
  • 雑誌名: Ticks Tick Borne Dis. 巻: 5 号: 3 ページ: 305-310
  • DOI: 10.1016/j.ttbdis.2013.12.006
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Genetic characterization of Babesia and Theileria parasites in water buffaloes in Sri Lanka. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar T, Tattiyapong M, Fukushi S, Hayashida K, Kothalawala H, Silva SS, Vimalakumar SC, Kanagaratnam R, Meewewa AS, Suthaharan K, Puvirajan T, de Silva WK, Igarashi I, Yokoyama N.
  • 雑誌名: Vet. Parasitol. 巻: 200 号: 1-2 ページ: 24-30
  • DOI: 10.1016/j.vetpar.2013.11.029
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Inhibitory effect of allicin on the growth of Babesia and Theileria equi parasites. (2014)
  • 著者名/発表者名: Salama AA, AbouLaila M, Terkawi MA, Mousa A, El-Sify A, Allaam M, Zaghawa A, Yokoyama N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Parasitol. Res. 巻: 113 号: 1 ページ: 275-283
  • DOI: 10.1007/s00436-013-3654-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diversity of Babesia bovis merozoite surface antigen genes in the Philippines. (2014)
  • 著者名/発表者名: Tattiyapong M, Sivakumar T, Ybanez AP, Ybanez RH, Perez ZO, Guswanto A, Igarashi I, Yokoyama N.
  • 雑誌名: Parasitol. Int. 巻: 63 号: 1 ページ: 57-63
  • DOI: 10.1016/j.parint.2013.09.003
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Interaction between Theileria orientalis 23-kDa piroplasm membrane protein and heparin. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takemae, H., Sugi, T., Kobayashi, K., Murakoshi, F., Gong, H., Recuenco, F.C., Ishiwa, A., Inomata, A., Horimoto, T., Yokoyama, N., and Kato K.
  • 雑誌名: Jpn J Vet Res. 巻: 62 ページ: 17-24
  • NAID: 120005438296
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] Babesia bovis BOV57, a Theileria parva P67 homolog, is an invasion-related, neutralization-sensitive antigen. (2017)
  • 著者名/発表者名: 石崎隆弘、T. Sivakumar、林田京子、五十嵐郁男、横山直明
  • 学会等名: 第160回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] スリランカ国の牛におけるバベシア及びタイレリアの分子疫学調査 (2016)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar Thillaiampalam、五十嵐郁男、横山直明
  • 学会等名: 第57回日本熱帯医学会大会
• [学会発表] Type-specific PCR assays for Babesia bovis MSA-1 genotypes in Asia: revisiting the genetic diversity in Sri Lanka, Mongolia, and Vietnam. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar Thillaiampalam、井上昇、五十嵐郁男、横山直明
  • 学会等名: 第56回日本熱帯医学会大会
  • 発表場所: 大阪大学（大阪府吹田市）
  • 年月日: 2015-11-04
• [学会発表] Type-specific PCR assays for Babesia bovis MSA-1 genotypes in Asia: revisiting the genetic diversity in Sri Lanka, Mongolia, and Vietnam. (2015)
  • 著者名/発表者名: Liyanagunawardena, N., Sivakumar, T., Silva, S.S.P., Kothalawala, H., and Yokoyama, N.
  • 学会等名: 57th Annual Convention of the Sri Lanka Veterinary Association
  • 発表場所: Oak-Ray Regency (Kandy, Sri Lanka)
  • 年月日: 2015-06-19
  • 国際学会
• [学会発表] Molecular epidemiology of Babesia, Theileria, and Trypanosoma in cattle and water buffaloes in Sri Lanka (2015)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar, T., Kothalawala, H., Silva, S.S.P., and Yokoyama, N.
  • 学会等名: 57th Annual Convention of the Sri Lanka Veterinary Association
  • 発表場所: Oak-Ray Regency (Kandy, Sri Lanka)
  • 年月日: 2015-06-19
  • 国際学会
• [学会発表] The molecular diagnostic tools for bovine piroplasmosis. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama, N.
  • 学会等名: 57th Annual Convention of the Sri Lanka Veterinary Association
  • 発表場所: Oak-Ray Regency (Kandy, Sri Lanka)
  • 年月日: 2015-06-19
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Genetic variations in merozoite surface antigen genes of Babesia bovis detected in Vietnamese cattle and water buffaloes. (2015)
  • 著者名/発表者名: 横山直明、Sivakumar, T.、五十嵐郁男、井上昇
  • 学会等名: 第84回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 杏林大学（東京都、三鷹市）
  • 年月日: 2015-03-21
• [学会発表] Genetic diversity of Babesia bovis merozoite surface antigen genes: Implications for strain verification and immune control. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar, T.、横山直明
  • 学会等名: 第84回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 杏林大学（東京都、三鷹市）
  • 年月日: 2015-03-21
• [学会発表] Genetic diversity of Theileria (2014)
  • 著者名/発表者名: 横山直明、Sivakumar, T.、林田京子、杉本千尋
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（北海道、札幌）
  • 年月日: 2014-09-09
• [学会発表] Trypanosoma theileri in Sri Lankan-bred cattle and water buffaloes: Epidemiology and genetic diversity. (2014)
  • 著者名/発表者名: Sivakumar, T.、福士慎太郎、五十嵐郁男、井上昇、横山直明
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北海道大学（北海道、札幌）
  • 年月日: 2014-09-09
• [備考] 2015.10.07 スリランカ獣医学研究所・研究員のガヤーニさんが帰国しました。
  • URL: http://www.obihiro.ac.jp/~protozoa/topics20151007.html
• [備考] 2015.06.30 スリランカ獣医学会に参加しました。
  • URL: http://www.obihiro.ac.jp/~protozoa/topics20150630.html
• [備考] 帯広畜産大学・原虫病研究センター ホームページ
  • URL: http://www.obihiro.ac.jp/~protozoa/index.html