ピロリ菌の病原性発現へのファージの関与機構の解明とその殺菌力を用いる除菌法の開発

• 研究課題/領域番号: 26461504
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 感染症内科学
• 研究機関: 高知大学
• 研究代表者: 松崎 茂展 高知大学, 教育研究部医療学系基礎医学部門, 准教授 (00190439)
• 研究分担者: 内山 淳平 麻布大学, 獣医学部, 講師 (20574619) ; 大畑 雅典 高知大学, 教育研究部医療学系基礎医学部門, 教授 (50263976)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円); 2016年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2015年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2014年度: 2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
• キーワード: ピロリ菌 / バクテリオファージ / 除菌 / ファージ / 制限-修飾

研究成果の概要

本研究では、バクテリオファージ（ファージ）KHP30、KHP40を利用する、薬剤耐性ピロリ菌の胃内からの効果的除菌法の開発を行うために必要な、菌保有のファージ排除機構である制限－修飾系に関する情報の収集を目指した。その結果、ファージの感染効率を著しく減衰させる制限－修飾系が、ピロリ菌には複数存在していることが明らかとなった。そのため、本ファージを含むピロリ菌ファージを除菌に使用するためには、これらの制限-修飾系に適応したファージセットの構築をする必要性があることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] High load of Merkel cell polyomavirus DNA detected in the normal skin of Japanese patients with Merkel cell carcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Yumiko Hashida, Kimiko Nakajima, Hideki Nakajima, Takeo Shiga, Moe Tanaka, Masanao Murakami, Shigenobu Matsuzaki, Seiji Naganuma, Naoki Kuroda, Yasutaka Seki, Harutaka Katano, Shigetoshi Sano, Masanori Daibata.
  • 雑誌名: Journal of Clinical Virology 巻: 82 ページ: 101-107
  • DOI: 10.1016/j.jcv.2016.07.011
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Screening of KHP30-like prophages among Japanese Helicobacter pylori strains, and genetic analysis of a defective KHP30-like prophage sequence integrated in the genome of the H. pylori strain NY40. (2016)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, Kato S, Takeuchi H, Sakaguchi Y, Ujihara T, Daibata M, Shimakura H, Okamoto N, Sakaguchi M, Matsuzaki S.
  • 雑誌名: FEMS Microbiol Lett. 巻: 363 号: 16 ページ: 1-9
  • DOI: 10.1093/femsle/fnw157
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Analyses of Short-Term Antagonistic Evolution of Pseudomonas aeruginosa Strain PAO1 and Phage KPP22 (Myoviridae Family, PB1-Like Virus Genus). (2016)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Suzuki M, Nishifuji K, Kato S, Miyata R, Nasukawa T, Yamaguchi K, Takemura-Uchiyama I, Ujihara T, Shimakura H, Murakami H, Okamoto N, Sakaguchi Y, Shibayama K, Sakaguchi M, Matsuzaki S.
  • 雑誌名: Appl Environ Microbiol 巻: 82 号: 15 ページ: 4482-4491
  • DOI: 10.1128/aem.00090-16
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Helicobacter pylori ファージとそのゲノム (2016)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平、竹内啓晃、平山隆一郎、島倉秀勝、阪口雅弘、松崎茂展
  • 雑誌名: Helicobacter Research 巻: 20 ページ: 470-474
• [雑誌論文] Characterization of Pseudomonas aeruginosa phage KPP21 belonging to family Podoviridae genus N4-like viruses isolated in Japan (2016)
  • 著者名/発表者名: Shigehisa, R., Uchiyama, J., Kato S, Takemura-Uchiyama, I, Yamaguchi, K., Miyata, R., Ujihara, T., Sakaguchi, Y., Okamoto, N., Shimakura, H., Daibata, M., Sakaguchi, M., and Matsuzaki, S.
  • 雑誌名: Microbiology and Immunology 巻: 60 号: 1 ページ: 64-67
  • DOI: 10.1111/1348-0421.12347
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] ウイローム バクテリオファージ療法 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松崎茂展, 氏原隆子, 村上雅尚, 大畑雅典
  • 雑誌名: 臨床と微生物 巻: 42（6） ページ: 697-701
• [雑誌論文] ファージ吸着分子を利用した簡易迅速細菌検出技術 (2015)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平、松井秀仁、内山（竹村）伊代、渡辺茂、花木秀明、松崎茂展
  • 雑誌名: 化学工業 巻: 65 ページ: 12-19
  • 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Complete genome sequence of a Pseudomonas aeruginosa bacteriophage KPP23 belonging to family Siphoviridae (2014)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi K, Miyata R, Shigehisa R, Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, Kato S, Ujihara T, Sakaguchi Y, Daibata M, Matsuzaki S
  • 雑誌名: Genome Announcements 巻: 2(3) 号: 3
  • DOI: 10.1128/genomea.00233-14
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Characterization of a novel Pseudomonas aeruginosa bacteriophage, KPP25, of the family Podoviridae (2014)
  • 著者名/発表者名: Miyata R, Yamaguchi K, Uchiyama J, Shigehisa R, Takemura-Uchiyama I, Kato S, Ujihara T, Sakaguchi Y, Daibata M, Matsuzaki S
  • 雑誌名: Virus Research 巻: 189 ページ: 43-46
  • DOI: 10.1016/j.virusres.2014.04.019
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Perspective: The age of the phage. (2014)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki S, Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, Daibata M.
  • 雑誌名: Nature 巻: 509 号: 7498 ページ: S9-S9
  • DOI: 10.1038/509s9a
  • 査読あり
• [雑誌論文] Experimental phage therapy again st lethal lung-derived septicemia ca used by Staphylococcus aureus in mice (2014)
  • 著者名/発表者名: Takemura-Uchiyama I, Uchiyama J, Osa nai M, Morimoto N, Asagiri T, Ujihar a T, Daibata M, Sugiura T, Matsuzaki S
  • 雑誌名: Microbes Infect 巻: (in press) 号: 6 ページ: 512-517
  • DOI: 10.1016/j.micinf.2014.02.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intragenus generalized transduction in Staphylococcus spp. by a novel giant phage. (2014)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, Sakaguchi Y, Gamoh K, Kato SI, Daibata M, Ujihara T, Misawa N, Matsuzaki S.
  • 雑誌名: ISME J. 巻: in press 号: 9 ページ: 1949-1952
  • DOI: 10.1038/ismej.2014.29
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] In silico analysis of AHJD-like viruses, Staphylococcus aureus phages S24-1 and S13', and study of phage S24-1 adsorption. (2014)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, Kato S, Sato M, Ujihara T, Matsui H, Hanaki H, Daibata M, Matsuzaki S.
  • 雑誌名: Microbiologyopen. 巻: 3 号: 2 ページ: 257-270
  • DOI: 10.1002/mbo3.166
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Study of adsorption of AHJD-like phages infecting Staphylococcus aureus. (2017)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平, 黒川健児, 内山伊代, 氏原隆子, 坂口義彦, 松崎茂展, 坂口雅弘
  • 学会等名: 第９０回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 仙台国際センター展示棟 （宮城県仙台市）
  • 年月日: 2017-03-19
• [学会発表] バクテリオファージKHP30の感染能に及ぼすピロリ菌保有制限-修飾系の解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 松澤佑一, 内山淳平, 竹内啓晃, 氏原隆子, 橋田裕美子, 樋口知紀, 田中望紅，冨永宗一竜, 大畑雅典, 松崎茂展
  • 学会等名: 第９０回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 仙台国際センター展示棟 (宮城県仙台市）
  • 年月日: 2017-03-19
• [学会発表] Phylogenetic analysis of Merkel cell polyomavirus based on full-length LT and VP1 sequences derived from normal skin of healthy individuals. (2016)
  • 著者名/発表者名: 田中望紅, 橋田裕美子, 村上雅尚, 松﨑茂展, 大畑雅典
  • 学会等名: 第64回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター （北海道札幌市）
  • 年月日: 2016-10-23
• [学会発表] Epidemiological study of Merkel cell polyomavirus in healthy skin among healthy individuals in Japan. (2016)
  • 著者名/発表者名: 橋田裕美子, 田中望紅, 村上雅尚, 松﨑茂展, 大畑雅典
  • 学会等名: 第64回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター （北海道札幌市）
  • 年月日: 2016-10-23
• [学会発表] 新規PB1様ファージKPP22と緑膿菌PAO1株を利用した前適応ファージKPP22M作成過程の遺伝的解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 那須川忠弥，内山淳平，鈴木仁人，西藤公司，加藤伸一郎，内山伊代，氏原隆子，島倉秀勝，村上裕信，岡本憲明，阪口義彦，柴山恵吾，阪口雅弘，松崎茂展
  • 学会等名: ファージ・環境ウイルス研究会 合同シンポジウム（第6回ファージ研究会
  • 発表場所: JAMSTEC （神奈川県横須賀市）
  • 年月日: 2016-10-21
• [学会発表] Screening of KHP30-like prophage in Helicobacter pylori using Japanese strains, andanalysis of their fate by in silico approach. (2016)
  • 著者名/発表者名: Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, Kato S, Takeuchi H, Sakaguchi Y, Ujihara T,Nasukawa T, Shimakura H, Okamoto N, Sakaguchi M, Matsuzaki S
  • 学会等名: ファージ・環境ウイルス研究会 合同シンポジウム（第6回ファージ研究会
  • 発表場所: JAMSTEC （神奈川県横須賀市）
  • 年月日: 2016-10-21
• [学会発表] ピロリ菌ゲノムに溶原化したKHP30様ファージDNAへの挿入配列の転移. (2016)
  • 著者名/発表者名: 松崎茂展, 内山淳平, 竹内啓晃, 氏原隆子, 大畑雅典
  • 学会等名: 第６９回日本細菌学会中国・四国支部総会
  • 発表場所: かがわ国際会議場高松シンボルタワー （香川県高松市）
  • 年月日: 2016-10-15
• [学会発表] 活性型ピロリ菌ファージKHP30の特徴付けとその潜伏感染性の解析. （ワークショップ ファージ・ルネッサンス －ファージ発見から100年たった今―） (2016)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平, 内山伊代, 竹内啓晃, 阪口義彦, 阪口雅弘, 松崎茂展
  • 学会等名: 第89回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 大阪国際交流センター
  • 年月日: 2016-03-23
  • 招待講演
• [学会発表] ファージを利用した細菌検出～黄色ブドウ球菌ファージクロマト法の開発～（ワークショップ ファージ・ルネッサンス －ファージ発見から100年たった今―） (2016)
  • 著者名/発表者名: 松井秀仁、内山淳平、津田愛美、松崎茂展、花木秀明
  • 学会等名: 第89回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 大阪国際交流センター
  • 年月日: 2016-03-23
  • 招待講演
• [学会発表] 緑膿菌PAO1株とファージKPP22の短期間進化的軍拡競争の解析. (2016)
  • 著者名/発表者名: 那須川忠弥、内山淳平、鈴木仁人、宮田怜奈、山口琴絵、内山伊代、阪口義彦、柴山恵吾、阪口雅弘
  • 学会等名: 第89回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 大阪国際交流センター
  • 年月日: 2016-03-23
• [学会発表] ボツリヌス毒素変換ファージのゲノム比較と遺伝子解析. (2016)
  • 著者名/発表者名: 阪口義彦、内山淳平、小椋義俊、山本友由弥子、松崎茂展、林哲也、松下治、小熊惠二、林俊治
  • 学会等名: 第89回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 大阪国際交流センター
  • 年月日: 2016-03-23
• [学会発表] Mycobacterium smegmatisに感染するバクテリオファージの形態学的解析. (2016)
  • 著者名/発表者名: 氏原隆子、大原直也、谷口初美、山崎利雄、大畑雅典、松崎茂展
  • 学会等名: 第89回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 大阪国際交流センター
  • 年月日: 2016-03-23
• [学会発表] バクテリオファージを利用するピロリ菌除菌法開発のための基礎的研究 (2016)
  • 著者名/発表者名: 大畑雅典, 松澤佑一, 松崎茂展
  • 学会等名: 平成28年度 中四国乳酸菌研究会・研究発表会
  • 発表場所: ホテル グランヴィア岡山 （岡山県岡山市）
• [学会発表] Mycobacterium smegmatis バクテリオファージの長期保存状態における生存率. (2015)
  • 著者名/発表者名: 松崎茂展，大原直也, 谷口初美，山崎利雄，氏原隆子，村上雅尚，大畑雅典
  • 学会等名: 第 68回日本細菌学会中国四国支部総会
  • 発表場所: 岡山大学
  • 年月日: 2015-10-03
• [学会発表] B型ボツリヌス菌のボツリヌス毒素遺伝子をコードするプラスミド解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 坂口義彦、内山淳平、細見晃司、幸田知子、松崎茂展、小椋義俊、林哲也、林俊治、小崎俊司、向本雅郁
  • 学会等名: 第88回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長良川国際会議場 （岐阜）
  • 年月日: 2015-03-26 – 2015-03-28
• [学会発表] 各種ファージに対する黄色ブドウ球菌受容体の解析 (2015)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平、黒川健司、坂口義彦、内山（竹村）伊代、氏原隆子、村上雅尚、大畑雅典、松崎茂展
  • 学会等名: 第88回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長良川国際会議場 （岐阜）
  • 年月日: 2015-03-26 – 2015-03-28
• [学会発表] 緑膿菌感染症に対するファージ療法と化学療法の併用療法の可能性検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 重久 立、内山淳平、宮田玲奈、山口琴絵、内山伊代、坂口義彦、氏原隆子、大畑雅典、松崎茂展
  • 学会等名: 第88回日本細菌学会総会
  • 発表場所: 長良川国際会議場 （岐阜）
  • 年月日: 2015-03-26 – 2015-03-28
• [学会発表] ピロリ菌におけるKHP30 様ファージの溶原性に関する研究 (2014)
  • 著者名/発表者名: 内山淳平、内山（竹村）伊代、阪口義彦、竹内啓晃、村上雅尚、氏原隆子、大畑雅典、松崎茂展
  • 学会等名: 第67回日本細菌学会中国四国支部総会
  • 発表場所: 徳島文理大学 （徳島）
  • 年月日: 2014-10-04 – 2014-10-05
• [学会発表] バクテリオファージ療法の現状と可能性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 松崎茂展、内山淳平、内山伊代、村上雅尚、大畑雅典
  • 学会等名: 2014年度日本農芸化学会西日本支部大会シンポジウム 「ファージ研究の新展開」
  • 発表場所: HOTELグランデはがくれ・佐賀大学本庄キャンパス(佐賀)
  • 年月日: 2014-09-18 – 2014-09-19
  • 招待講演
• [学会発表] Generalized transduction in vitro among Staphylococcus spp., using a novel phage S6. (2014)
  • 著者名/発表者名: 10. Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, Sakaguchi Y, Kato S, Gamoh K, Misawa N, Daibata M, Matsuzaki S:
  • 学会等名: International Union of Microbiological Societies Congress
  • 発表場所: Montreal, Canada
  • 年月日: 2014-07-27 – 2014-08-01
• [学会発表] KHP30-like phages among clinical isolates of Helicobacter pylori (2014)
  • 著者名/発表者名: 11. Takemura-Uchiyama I, Uchiyama J, Takeuchi H, Gamoh K, Sakaguchi Y, Kato S, Ujihara T, Daibata M, Matsuzaki S
  • 学会等名: International Union of Microbiological Societies Congress
  • 発表場所: Montreal, Canada
  • 年月日: 2014-07-27 – 2014-08-01
• [学会発表] Analysis of botulinum neurotoxin type G gene-encoding plasmid in Clostridium argentinense strain 2740 (2014)
  • 著者名/発表者名: 12. Sakaguchi Y, Uchiyama J, Suzuki T, Yamamoto Y, Hosomi K, Kohda T, Matsuzaki S, Hayashi T, Mukamoto M, Oguma K
  • 学会等名: International Union of Microbiological Societies Congress
  • 発表場所: Montreal, Canada
  • 年月日: 2014-07-27 – 2014-08-01
• [図書] Chapter 10. Phage therapy: experiments using animal infection models. .Phage Therapy. Current Research and Applications. (2014)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki S, Uchiyama J, Takemura-Uchiyama I, and Daibata M
  • 総ページ数: 20
  • 出版者: Caister Academic Press
• [産業財産権] 特許 (2014)
  • 発明者名: 大畑雅典、松崎茂展、内山淳平、内山伊代
  • 権利者名: 大畑雅典、松崎茂展、内山淳平、内山伊代
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2014-04-01
  • 取得年月日: 2016-04-28