miRNA－エクソソーム輸送複合体の同定とがん病態誘発との関連

• 研究課題/領域番号: 26640095
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 腫瘍診断学
• 研究機関: 国立研究開発法人国立がん研究センター
• 研究代表者: 土屋 直人 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, ユニット長 (30322712)
• 研究協力者: 吉松 有紀
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2016年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2015年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 細胞外マイクロRNA / 分泌複合体 / 分泌マイクロRNA / エクソソーム / miRNA

研究成果の概要

本研究では、細胞外へとmiRNAを分泌する複合体様式を解析し、その分泌メカニズムを明らかにすることを目的とした。がん細胞株由来のエクソソーム画分を調製し、密度勾配遠心やゲルろ過を組み合わせて、miRNA分泌複合体の特性を解析した。エクソソームに内包されて分泌されるmiRNAの種類は少なく、タンパク質複合体として分泌されているものが多い事が強く示唆された。その分泌に関連する候補タンパク質を質量分析によって複数同定した。これらのノックダウンにより、細胞外へと分泌されるmiRNAが細胞内に蓄積することも明らかにした。今後は、詳細な分子メカニズムの解析を行う。

研究成果

• [雑誌論文] マイクロRNAの特性を利用した“がん医療構築戦略” (2016)
  • 著者名/発表者名: 土屋直人
  • 雑誌名: バイオエクススプレス 巻: 1 ページ: 8-13
• [雑誌論文] An integrated prognostic classifier for stage I lung adenocarcinoma based on mRNA, microRNA and methylation biomarkers (2015)
  • 著者名/発表者名: Robles AI., Kana Y., Mathe E., Okayama H., Schetter A., Brown D., Petersen D., Bowman ED., Noro R., Welsh J., Edelman D., Stevenson H., Tsuchiya N., Kohno T., Skaug V., Mollerup S., Haugen A., Meltzer P., Yokota J., Harris CC.
  • 雑誌名: J Thoracic Oncol. 巻: 10 号: 7 ページ: 1037-1048
  • DOI: 10.1097/jto.0000000000000560
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] A Three-microRNA Signature Predicts Responses to Platinum-Based Doublet Chemotherapy in Patients with Lung Adenocarcinoma. (2014)
  • 著者名/発表者名: Saito M, Shiraishi K, Matsumoto K, Schetter AJ, Ogata-Kawata H, Tsuchiya N, Kunitoh H, Nokihara H, Watanabe SI, Tsuta K, Kumamoto K, Takenoshita S, Yokota J, Harris CC, Kohno T.
  • 雑誌名: Clinical Cancer Research 巻: 20（18） 号: 18 ページ: 4784-93
  • DOI: 10.1158/1078-0432.ccr-14-1096
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] NEK9-dependent proliferation of cancer cells lacking functional p53 (2014)
  • 著者名/発表者名: Kurika D, Takeshita F, Tsuta K, Sakamoto H, Watanabe S, Matsumoto K, Watanabe M, Nakagama H, Ochiya T, Yokota J, Kohno T, Tsuchiya N.
  • 雑誌名: Sci. Rep. 巻: 4 号: 1 ページ: 6111-6111
  • DOI: 10.1038/srep06111
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Circulating Exosomal microRNAs as Biomarkers of Colon Cancer (2014)
  • 著者名/発表者名: Ogata-Kawata H., Izumiya M., Kurioka D., Honnma Y., Yamada Y., Furuta K., Gunji T., Ohta H., Okamoto H., Sonoda H., Watanabe M., Nakagama H., Yokota J., Kohno T., Tsuchiya N.
  • 雑誌名: Plos ONE 巻: 9 号: 4 ページ: e92921-e92921
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0092921
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Fine-tuning of p53-dependent nucleolus stress response by miR-101 (2016)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara Y., Kohno T., Tsuchiya N.
  • 学会等名: 第３９回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] エクソソームマイクロRNAのがん診断マーカーとしての重要性 (2016)
  • 著者名/発表者名: 土屋直人
  • 学会等名: 第５４回日本癌治療学会学術集会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市
  • 年月日: 2016-10-20
  • 招待講演
• [学会発表] Nucleolar stress-specified molecular connection of miR-101 and p53 as a novel circuitry in an intrinsic tumor-suppressor network. (2016)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya N.
  • 学会等名: 第７６回日本癌学会総会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市
  • 年月日: 2016-10-06
• [学会発表] MicroRNAs in colon carcinogenesis ~ basic research to clinical applications ~ (2015)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya N.
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 愛知県名古屋市
  • 年月日: 2015-10-08
  • 招待講演
• [学会発表] Extra-cellular microRNAs - Basic research to clinical application - (2015)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya N
  • 学会等名: Seminar in Laboratory of Human Carcinogenesis, NCI.
  • 発表場所: Bethesda, MD, USA
  • 年月日: 2015-04-23
  • 招待講演
• [学会発表] MicroRNA target screen identifies NEK9 pathway as a crucial component regulating proliferation of cancer cells lacking functional p53. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tsuchiya N.
  • 学会等名: AACR Annual Meeting 2015
  • 発表場所: Philadelphia USA
  • 年月日: 2015-04-17
  • 国際学会
• [学会発表] マイクロRNA：発がん機構の理解とTranslational Research (2014)
  • 著者名/発表者名: 土屋 直人
  • 学会等名: RNA科学総合研究センター公開シンポジウム
  • 発表場所: 東京理科大学
  • 年月日: 2014-12-22
  • 招待講演
• [学会発表] p53不活化がん細胞のNEK9依存性増殖 (2014)
  • 著者名/発表者名: 土屋 直人
  • 学会等名: 第３７回分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] Regulation of p53-dependent G2 arrest and apoptosis by miR-101 through the regulation of EG5 and p53 pathway (2014)
  • 著者名/発表者名: Yuko Fujiwara, Takashi Kohno, Naoto Tsuchiya
  • 学会等名: 第３７回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-25 – 2014-11-27
• [学会発表] 大腸がん診断マーカーとしてのエクソソームマイクロRNAの有用性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 土屋 直人
  • 学会等名: 第６９回大腸肛門病学会学術集会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-11-07 – 2014-11-08
  • 招待講演
• [学会発表] EG5-p53 axis, a novel pathway to control cell cycle and apoptosis, is regulated by miR-101 (2014)
  • 著者名/発表者名: Naoto Tsuchiya
  • 学会等名: 第７３回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-25 – 2015-09-27