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電子顕微鏡法によるギャップ結合チャネルの構造と機能の研究

研究課題

研究課題/領域番号 26840019
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 構造生物化学
研究機関名古屋大学

研究代表者

大嶋 篤典  名古屋大学, 名古屋大学細胞生理学研究センター, 准教授 (80456847)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
研究課題ステータス 完了 (2015年度)
配分額 *注記
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2014年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
キーワードギャップ結合チャネル / イネキシン / 電子顕微鏡 / 三次元再構成 / 二次元結晶 / 極低温電子顕微鏡 / 二次元結晶化
研究成果の概要

本研究ではギャップ結合チャネルの開閉機構の解明を目的として、線虫に存在するイネキシン6(INX-6)の電子線結晶構造解析を行った。N末端の2~19残基を欠失したINX-6変異体(INX-6delN)から二次元結晶が得られ、極低温電子顕微鏡像から膜平面10オングストローム分解能における三次元再構成に成功した。その結果、INX-6delN ギャップ結合チャネルは16量体から成っていることが明らかとなった。チャネルの通路にはプラグに相当する密度が確認された。透過活性測定ではINX-6delNの活性は失われており、閉じている構造の一つを示すものであることがわかった。以上の結果は論文にまとめて発表した。

報告書

(3件)
  • 2015 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて 2016 2015 2014

すべて 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 1件、 査読あり 3件、 オープンアクセス 2件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (10件) (うち国際学会 1件、 招待講演 5件)

  • [雑誌論文] Hexadecameric structure of an invertebrate gap junction channel2016

    • 著者名/発表者名
      Oshima, A., Matsuzawa, T., Murata, K., Tani, K. and Fujiyoshi, Y.
    • 雑誌名

      Journal of Molecular Biology

      巻: 428 号: 6 ページ: 1227-1236

    • DOI

      10.1016/j.jmb.2016.02.011

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] ギャップ結合チャネルの構造と多様性2016

    • 著者名/発表者名
      大嶋篤典
    • 雑誌名

      膜

      巻: 41 ページ: 50-56

    • NAID

      130005249079

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] GraDeR: membrane protein complex preparation for single particle cryo-EM.2015

    • 著者名/発表者名
      Hauer F., Gerle C., Fischer N., Oshima A., Shinzawa-Itoh K., Shimada S., Yokoyama K., Fujiyoshi Y. & Stark H.
    • 雑誌名

      Structure

      巻: 23 号: 9 ページ: 1769-1775

    • DOI

      10.1016/j.str.2015.06.029

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] THREE-DIMENSIONAL STRUCTURE OF INNEXIN GAP JUNCTION CHANNELS STUDIED BY ELECTRON CRYSTALLOGRAPHY2016

    • 著者名/発表者名
      Atsunori Oshima, Tomohiro Matsuzawa, Kazuyoshi Murata, Kazutoshi Tani and Yoshinori Fujiyoshi
    • 学会等名
      60th Biophysical Society Annual Meeting
    • 発表場所
      Los Angeles Convention Center, Los Angeles
    • 年月日
      2016-02-27
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Three dimensional structure of C. elegans innexin gap junction channels2015

    • 著者名/発表者名
      Atsunori Oshima, Tomohiro Matsuzawa, Kazuyoshi Murata, Kazutoshi Tani and Yoshinori Fujiyoshi
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会、第88回日本生化学会大会 合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド、神戸
    • 年月日
      2015-12-01
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Initial 3D reconstruction of innexin gap junction channels by electron crystallography2015

    • 著者名/発表者名
      Atsunori Oshima,, Tomohiro Matsuzawa, Kazuyoshi Murata, Kazutoshi Tani and Yoshinori Fujiyoshi
    • 学会等名
      日本顕微鏡学会 第71回学術講演会
    • 発表場所
      国立京都国際会館
    • 年月日
      2015-05-13 – 2015-05-15
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Initial 3D reconstruction of innexin gap junction channels by electron crystallography2015

    • 著者名/発表者名
      Atsunori Oshima,, Tomohiro Matsuzawa, Kazuyoshi Murata, Kazutoshi Tani and Yoshinori Fujiyoshi
    • 学会等名
      日本顕微鏡学会 第71回学術講演会
    • 発表場所
      国立京都国際会館、京都
    • 年月日
      2015-05-13
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Structure and diversity of gap junction channels studied by electron microscopy2015

    • 著者名/発表者名
      Atsunori Oshima
    • 学会等名
      第120回日本解剖学会総会・全国学術集会・第92回日本生理学会大会合同大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場
    • 年月日
      2015-03-21 – 2015-03-23
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Electron Microscopic Studies of Invertebrate Gap Junction Channels2015

    • 著者名/発表者名
      Atsunori Oshima, Tomohiro Matsuzawa, Kazuyoshi Murata, Kouki Nishikawa, Kazutoshi Tani and Yoshinori Fujiyoshi,
    • 学会等名
      IGER International Symposium on Frontiers in Biological Research with Advanced Electron Microscope Technologies
    • 発表場所
      Nagoya University
    • 年月日
      2015-01-15 – 2015-01-16
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 電子顕微鏡で見るギャップ結合チャネルの構造と多様性2014

    • 著者名/発表者名
      大嶋篤典
    • 学会等名
      「電子顕微鏡機能イメージングの医学・生物学への応用」~次世代の生物電顕を考える~
    • 発表場所
      生理学研究所
    • 年月日
      2014-11-12 – 2014-11-13
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Electron microscopy of C. elegans innexin-6 gap junction channels indicates the characteristic subunit organization2014

    • 著者名/発表者名
      Atsunori Oshima, Tomohiro Matsuzawa, Kazuyoshi Murata, Kouki Nishikawa, and Yoshinori Fujiyoshi
    • 学会等名
      第52回日本生物物理学会年会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター
    • 年月日
      2014-09-25 – 2014-09-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Oligomeric form and function of C. elegans innexin-6 gap junction channels2014

    • 著者名/発表者名
      Atsunori Oshima, Tomohiro Matsuzawa, Kazuyoshi Murata, Kouki Nishikawa, and Yoshinori Fujiyoshi
    • 学会等名
      the 23rd International Union of Crystallography (IUCr) Congress and General Assembly
    • 発表場所
      Montréal, Québec, Canada
    • 年月日
      2014-08-05 – 2014-08-12
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 電子顕微鏡によるイネキシンギャップ結合チャネルの構造研究2014

    • 著者名/発表者名
      大嶋篤典、松澤朋寛、村田和義、西川幸希、藤吉好則
    • 学会等名
      日本顕微鏡学会第70回記念学術講演会
    • 発表場所
      幕張メッセ 国際会議場
    • 年月日
      2014-05-11 – 2014-05-13
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書

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公開日: 2014-04-04   更新日: 2017-05-10  

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