| 研究課題/領域番号 |
62480130
|
|---|
| 研究種目 |
一般研究(B)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 研究分野 |
病態医化学
|
|---|
| 研究機関 | 東京大学 |
|---|
研究代表者 |
清水 孝雄 東京大学, 医学部栄養学教室, 助教授 (80127092)
|
|---|
| 研究分担者 |
笠間 健嗣 東京大学, 医学部栄養学教室, 教務職員 (80124668)
掘 チヨ (堀 チヨ) 東京大学, 医学部栄養学教室, 教務職員 (10157050)
脊山 洋右 東京大学, 医学部栄養学教室, 教授 (90010082)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1987 – 1988
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1988年度)
|
| 配分額 *注記 |
5,100千円 (直接経費: 5,100千円)
1988年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
1987年度: 3,600千円 (直接経費: 3,600千円)
|
|---|
| キーワード | ロイコトリエン / リポキシゲナーゼ / 11,12ーロイコトリエンA4 / グルタチオンS転移酵素 / クモ膜下出血 / 血管攣縮 / アラキドン酸 / cDNAクローニング / グルタチオンS-転移酵素 / 12-リポキシゲナーゼ / 11,12-ロイコトリエンA4 / ロイコトリエンA4水解酵素 / ロイコトリエンB4 |
|---|
| 研究概要 |
ロイコトリエン生合成調節のメカニズムを明かにし、さらに病態時の変動を解析するのが本研究の目的である。二年間の研究を通じて以下の成果を得た。
1.ロイコトリエン関連物質生合成の酵素学的研究。
ロイコトリエン(LT)生合成酵素のうち、5ーリポキシゲナーゼ(マスト細胞)、LTA4水解酵素(ヒト肺、モルモット肺)を均一に精製し、後者に関してはさらにcDNAクローニング、免疫抗体の作製を行った。LTA4水解酵素CDNAのクローニングと発現はアラキドン酸カスケードの分野での成功第一例となった。一方、LTA4よりC4を合成する酵素(LTC4合成酵素)は、従来よりグルタチオンS転移酵素と同一と考えられて来たが、モルモット肺ミクロソームよりの可溶化精製により、同酵素と分離し特異的にLTC4を産生する酵素である事が明かとなった。
一方、血小板や脳等で産生される12ーリポキシゲナーゼ経路については代謝産物や酵素系が同定されていなかったが、新たに11,12ロイコトリエンA4や1,1,12ーロイコトリエンC4を発見し、その関連酵素を単離精製した。
2.疾病とロイコトリエン代謝異常。
1で確立した酵素測定法、抗体沈降法等を用いて疾患とロイコトリエン代謝の異常について検討した。クモ膜下出血後の血管攣縮において脳底動脈のリポキシゲナーゼ活性が亢進している事、ある種の免疫低下疾患でロイコトリエン産生が低下しいる事、さらに心筋硬塞などの病巣拡大にロイコトリエンB4とそれにより遊走されてきた好中球が関与している事が明かとなった。尚、当初目的にかかげたプロスタグランジン類の多成分同時分析法の確立はサンプル処理やレーザー光での励起をめぐり、若干の未解決の問題が残っている。
|
