実験動物がんのがん遺伝子

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02151079
• 研究機関: 国立がんセンター
• 研究代表者: 長尾 美奈子 国立がんセンター研究所, 発がん研究部, 部長 (40100151)
• 研究分担者: 中村 敏一 九州大学, 理学部, 教授 (00049397) ; 津田 洋幸 藤田学園保健衛生大学, 医学部, 助教授 (10163809) ; 横路 謙次郎 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 教授 (70034618) ; 江角 浩安 国立がんセンター研究所, 生化学部, 部長 (70160364) ; 石坂 幸人 国立がんセンター研究所, 発がん研究部, 室長 (90184514)
• キーワード: 食品中発がん物質ヘテロサイクリックアミン / MeIQによる扁平上皮がん / Haーras活性化G→T変異 / プロテインホスファタ-ゼとがん化 / 放射線間接照射とがん遺伝子 / in vitro自然悪性化

研究概要

食品中に存在するヘテロサイクリックアミン、IQ、MeIQ、MeIQxで誘発されたラット外耳道ジンバル腺の扁平上皮がんにおけるHaー<ras>___ーの活性化をPCR法及び選択的ハイブリダイゼ-ション法を用いて調べた。何れの化合物で誘発された腫瘍でも、cーHaー<ras>___ーの13番目のコドンの第2字目のG→Tの変化が見られた。MeIQでは特異的にこの変化が起こりやすいことがわかった。更に興味あることに、MeIQ誘発マウス前胃扁平上皮がん7例について、single strand conformational polymorphism(SSCP)及びdirect sequencingを用いてHaー<ras>___ーを解析した結果、変異のあった全てで、コドン13の第2字目がG→Tに変異していることを見出した。以上ラットジンバル腺及びマウス前胃扁平上皮がんでは、60〜70%のがんで<ras>___ーが活性化しており、そのほとんどはHaー<ras>___ーコドン13、第2字目のG→Tが起こるという、即ち動物種及び臓器に無関係に、同一変異が誘発されるという特徴を見出すことができた。MeIQ及びIQで誘発されたラット肝がんでは、セリン・スレオニンホスファタ-ゼ2Aの触媒サブユニットの発現が著しく上昇していることを見出した。このホスファタ-ゼに対する特異的阻害剤であるオカダ酸で、がん遺伝子導入によりトランスホ-ムした細胞を処理すると、正常細胞の形態に戻った。同ホスファタ-ゼは細胞の悪性化に関与していることが示された。放射線照射により誘発された胸腺腫では、Kiー<ras>___ーが活性化している。一方、胸腺摘出後、マウスに放射線を照射し胸腺を戻して誘発された間接胸腺腫では、Kiー<ras>___ーは活性化していないが、それらのDNAはチャイニ-ズハムスタ-細胞をトランスホ-ムする活性を示した。現在このがん遺伝子をクロ-ニングしている。チャイニ-ズハムスタ-胎児(CHE)細胞の培養に伴う自然がん化は多段階で、3qのトリソミ-にNー<ras>___ーの変異が加わると悪性細胞になることを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Sasaki,K.,<Nagao,M.>___ーet al.: "Identification of members of the protein phosphatase 1 gene family in the rat and enhanced expression of protein phophsatase 1α gene in rat hepatocellular carcinomas" Jpn.J.Cancer Res.81. 1272-1280 (1990)
• [文献書誌] Yamashita,K.,<Nagao,M.>___ーet al.: "DNA adducts formed by 2ーaminoー3,8ーdimethylimidazo[4,5ーf___ー]ーquinoxaline in rat liver:doseーresponse on chronic administration" Jpn.J.Cancer Res.81. 470-476 (1990)
• [文献書誌] Kudo,M.,<Esumi,H.>___ーet al.: "Mutational activation of cーHaー<ras>___ー gene in squamous of rat Zymbal gland induced by carcinogenic heterocyclic amines" Molecular Carcinogenesis.
• [文献書誌] Okumoto,M.,<Yokoro,K.>___ーet al.: "Lack of evidence for the involvement of typeーC and typeーB retroviruses in radiation leukemogenesis of NFS mice" Radiat.Res.121. 267-273 (1990)
• [文献書誌] <Enomoto,T.>___ーet al.: "Novel nonーtumorigenic cell variants showing potentially different susceptibility to vー<src>___ー induced metastasis" Jpn.J.Cancer Res.81. 501-505 (1990)
• [文献書誌] Komura,J.,<Ishikawa,T.>___ーet al.: "Preferential excision repair and nonーpreferential photoreactivation of pyrimidine dimers in the cー<ras>___ー sequence of cultured goldfish cells" Mutation Res.
• [文献書誌] <Nagao,M.>___ーet al.: "Genetic Basis for Carcinogenesis:Tumor Suppressor Genes and Oncogenes" A.G.Knudson,Jr.et al., 8