研究課題/領域番号 |
04454204
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研究機関 | (財)東京都神経科学総合研究所 |
研究代表者 |
保井 孝太郎 (財)東京都神経科学総合研究所, 微生物学・免疫学研究部門, 参事研究員 (90073080)
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研究分担者 |
菅又 昌実 (財)東京都神経科学総合研究所, 微生物学・免疫学, 流動研究員 (00091041)
宮本 道子 (財)東京都神経科学総合研究所, 微生物学・免疫学, 主任 (40190821)
木村 純子 (財)東京都神経科学総合研究所, 微生物学・免疫学, 主任 (20142151)
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キーワード | 日本脳炎ウイルス / 神経病原性 / 神経細胞 / 受容体 / E蛋白 / prM蛋白 |
研究概要 |
日本脳炎ウイルスは、脳内で増殖して脳炎を起こす。デングウイルスや黄熱病ウイルスは、脳炎を起こさず肝臓に障害を起こす。フラビウイルスの示すこのような組織特異的病原性が、どのような因子によって規定されているのかについて、日本脳炎ウイルスをモデルとして用いて解析した。 ラット脳細胞初代培養および培養株細胞を用いて、以下のことが明らかになった。1、細胞内にウイルスから抽出したゲノムRNAを直接注入すると、非感受性細胞内でもウイルスが増殖できる。2、感受性細胞膜画分から、非感受性細胞には存在しないウイルス粒子E蛋白と結合する75Kdの受容体候補蛋白を検出分離し、そのN末端アミノ酸配列を明らかにすることができた。3、75Kd蛋白のcDNAの一部をクローニングする事ができた。 一方日本脳炎ウイルス粒子及び遺伝子cDNAを用い、ウイルス粒子形成機構を解析して、以下のことが明らかになった。1、ウイルスエンベロープを形成する蛋白であるprMとEのプロセシングには、NS3蛋白によるC蛋白アンカー部分のプロセシングが必要である。2、prM-Eヘテロ2量体の形成には、prM蛋白C末端が関与しており、E蛋白の構造構築と細胞内輸送に必要である。3、E蛋白の中和抗体エピトープを構成するアミノ酸に置換を導入すると、神経病原性が低下する。以下の結果から、日本脳炎ウイルスの示す神経病原性は、感受性細胞膜に存在する細胞受容体とE蛋白との結合効率とE蛋白の構造変化によって規定されており、E蛋白の構造構築と細胞内輸送には、prM蛋白が重要な役割をしていることが明らかになった。
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