| 研究課題/領域番号 |
04454596
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| 研究機関 | 京都産業大学 |
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研究代表者 |
山科 郁男 京都産業大学, 工学部, 教授 (70025675)
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| 研究分担者 |
中田 博 京都産業大学, 工学部, 助教授 (90113141)
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| キーワード | ムチン / グリコホリンA / ロイコシアリン / ヒツジ顎下腺ムチン / Tn抗原 / シアリルTn抗原 / シアリルLe^a抗原 / Le^x抗原 |
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| 研究概要 |
ムチン型糖タンパク質に対して作成した種々の単クローン抗体のうち、3種についてそのエピトープ、癌診断への応用に関して研究した。
MLS128についてはすでに、OSM(ヒツジ顎下腺ムチン)、グリコホリンA、を用いてエピトープを明らかにしたが、さらにT-リンパ球、Jurkat細胞の表面抗原であるロイコシアリンについてエピトープ構造を明らかにした。ロイコシアリンのトリプシン消化物をMLS128のイムノアフィニティーカラムにかけてTn抗原糖ペプチドを分離し、さらにHPLCにかけて分画した。アミノ酸配列順序決定可能な糖ペプチドはいずれもGalNAc-Ser/Thrの3連構造を含んでおり、OSM、グリコホリンAについて明らかにしたTn抗原エピトープのクラスター構造が普遍的であることを明らかにした。
MLS102についてはOSMから種々の糖ペプチドを単離して、その構造の決定を行っている。シアリルTn抗原エピトープもSia-GalNAc-Ser/Thrのクラスターであるが詳細についてはさらに検討中である。
MSW113については、ヒト初乳から新たに2種のシアリルLe^aオリゴ糖を単離する一方、ヒト膠様結腸腺癌の糖脂質について調べた。糖脂質をエンドグリコセラミダーゼで処理し、遊離したオリゴ糖をMSW113のイムノアフィニティーカラムにかけた。得られたもののうち比較的多量の画分について構造決定を行ない、3種の新オリゴ糖を得た。そのうちの一つはシアリル-Le^a-xと呼び得る構造で、Le^aとle^xの構造を一つの分子中に含んでいた。
なお、計画した顎下腺ムチンの遺伝子クローニングについては、現在、mRNAを調製し、さらにcDNA検出のプローブを作成中である。
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