グリオーマ運動性因子による運動制御の解析-腫瘍浸潤の分子機構解明と治療法の開発

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06671389
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 大西 丘倫 大阪大学, 医学部, 助手 (70233210)
• 研究分担者: 斎藤 洋一 大阪大学, 医学部, 助手 (20252661) ; 平賀 章壽 大阪大学, 医学部, 助手 (40243232) ; 早川 徹 大阪大学, 医学部, 教授 (20135700)
• キーワード: 悪性グリオーマ / 浸潤 / 運動性因子 / 細胞外マトリックス / 細胞接着因子

研究概要

これまでの研究で、グリオーマ細胞の運動性の亢進がin vitroでの腫瘍浸潤能に正の相関を示すことを明らかにした。本年度は、グリオーマ運動性因子(GMF)の構造解析および生物学的機能に関する解析を行い、グリオーマ細胞の運動と接着の観点からグリオーマ浸潤の分子メカニズムについて検討を行った。精製GMF-I,GMF-IIをエンドペプチダーゼ処理後、逆相クロマトグラフィーにより得られたペプチド断片についてアミノ酸配列を決定した。また、Westem blotにより、フィブロネクチン(FN)上の種々の機能ドメインおよびextra domain(ED)領域の発現について調べた。分子量の異なる2種のGMFの部分アミノ酸配列の結果、2種のGMFは酷似しており、FNと一部相同性を示した。GMF-I,II共、C末端ヘパリン結合ドメイン、III型モジュール内細胞結合ドメインを有していたが、胎生期あるいは癌化に伴って発現するED領域について、GMF-IIがED-A,ED-B共に発現していたのに対し、GMF-IはED-A領域のみを発現していた。各種グリオーマ細胞は、GMF-IIよりもGMF-Iに対してより強い運動活性を示したが、接着活性はGMF-IIの方が高かった。また、正常グリア細胞はGMF-I,II共に運動活性を示さなかった。グリオーマのラット脳内移植モデルにおいて、移植グリオーマ細胞は対側に注入したGMF-Iに対して強い遊走能を示した。また、ヒトグリオーマ組織でのED領域の発現を調べた結果、抗ED-A抗体陽性を示す組織では、著明な腫瘍浸潤を認めた。以上より、GMFによる運動性亢進がグリオーマ浸潤に重要な役割を演じていることが推察された。18FA01:脳腫瘍

研究成果

• [文献書誌] T.ohnishi,et al: "Purification of motility factor (GMF) from human malignant glioma cells and its biological significance in tumor invasion" Biochem Biophys Res Commun. 193. 518-525 (1993)
• [文献書誌] M.Higuchi,et al: "Expression of tenascin in human gliomas:its relation to histological malignancy,tumor dedifferentiation and angiogenesis" Acta Neuropathol. 85. 481-487 (1993)
• [文献書誌] T.Taki,et al: "Anti-proliferative effects of TNP-470 on human malignant glioma in vivo:potent inhibition of tumor angiogenesis." JNeuro-Oncol. 19. 251-258 (1994)
• [文献書誌] T.Ohnishi,et al: "Vasogenic brain edema induced by arachidonic acid:role of extracellular arachidonic acid in blood-brain barrier dysfunction" Neurosurg. 30. 545-551 (1992)
• [文献書誌] S.Hiraga,et al: "Transformation of type 1 astrocytes with N-ethy1-N-nitrosourea:Establishment of an in vitro system and the role of the p53 gene" GLIA. 13. 51-63 (1995)
• [文献書誌] M.Higuchi,et al: "Leptomeningeal dissemination of malignant glioma:immunohistochemical analysis of tenascin and glial fibrillary acidic protein" Clin Neuropathol(in press).
• [文献書誌] T.Ohnishi,et al: "Brain Tumor Research and Therapy:Expression and Biological functions of L1 cell adhesion molecule(L1CAM)in malignant cells" Springer-Verlag(in press),
• [文献書誌] S.Izumoto,et al: "Brain Tumor Research and Therapy:Homozygous deletion of p16 gene in malignant glioma" Springer-Verlag(in press),