細胞内小器官の動態までも着実に観察し得る高性能共焦点レーザー顕微鏡の開発

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 07557025
• 研究種目: 試験研究(B)
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 渡辺 慶一 東海大学, 医学部, 教授 (00055865)
• 研究分担者: 守内 哲也 東海大学, 医学部, 助教授 (20174394) ; 長村 善之 東海大学, 医学部, 教授 (10100992) ; 若木 守明 東海大学, 工学部, 教授 (20100993)
• キーワード: 共焦点レーザー顕微鏡 / 細胞内小器官 / 光顕 / 電顕 / 空間分解能 / ヘリウム-カドニウムレーザーHe-Cd

研究概要

本研究の目的とする所は通常のCLSMによるダイナミックな細胞内物質局在観察の特質を失わず、なおかつ光顕用の標本を用いながら、細胞内小器官の形態(電顕に匹敵する)観察を可能にすること、さらにliving cellsの微細構造をも観察出来る新しいCLSMの開発の可能性を追求することである。そこで本研究では、通常の生物学用CLSMから離れて、別の観点からCLSMを見直すこととし、半導体のような物質の表面の超微細変質をdetectするために作られた工業用のCLSMの特色を生かすことにした。本研究は、先ず(1)日本電子ライオソニック社のCLSM (JDLM-6601)を当研究室に設置した。次いで、上記の目的達成の一ステップとして(2)レーザー光源を紫外領域のヘリウム-カドミウム(325nm)に変更するため藤井光学を通してレンズ系の改変、鏡体の改良を行っている。また、(3)ルーチン操作上、局所場光学効果をあげるためと工業用プログラムソフトを生物学仕様に変えるため東芝エンジニアリング社よりパソコン(SS-R590)を購入し、検討を開始した。

研究成果

• [文献書誌] Takekoshi, S. Watanabe, K. et al: "Activation of protein Kinase C by oxidized diacylglycerols" Biochem. Biophys. Res. Commun.217. 654-660 (1995)
• [文献書誌] Murakoshi, M. Watanabe, K. et al: "Immunolocalization of glutathione-reductase (GSSG-RD) in the rat adrenal cortex" J. Toxicol Pathol.8. 51-57 (1995)
• [文献書誌] Tanaka, M. Watanabe, K. et al: "Immunohistochemical localization of recombinant human Cu, Zn-SOD in rats after intravenous administration" J. Chin. Biochem. Nutr.18. 171-180 (1995)
• [文献書誌] Matsuno, A. Watanabe, K. et al: "Changes in the ultrastructural distribution of prolactin and growth hormone mRNAs in pituitary cells of female rats after estrogen and bromocriptine treatment, studied using ISH with biotinylated oligonucleotide probes." Histochem Cell Biol.104. 37-45 (1995)