食細胞遺伝子の分子病理学的解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 09470066
• 研究機関: 大分医科大学
• 研究代表者: 山本 俊輔 大分医科大学, 医学部, 教授 (90040188)
• 研究分担者: 松浦 恵子 大分医科大学, 医学部, 助手 (00291542)
• キーワード: CD14 / TLR4 / ADAM / CD156 / オステオポンチン

研究概要

CD14の研究:遊離型CD14発現トランスジェニックマウス(TM)(M14S)を用いてLPS刺激に対し血中TNF-αやIL-6の低下とShwartzman反応の低下、P.o acnes/LPS刺激マウスにおける肝障害阻止、がん転移亢進などを観察した。CD14N末端部のTMを作出した。ヒト臍帯血管培養細胞(HUVEC)、単球およびMφ細胞株THP-1の全ての細胞にTLR1およびTLR4mRNA発現を確認した。TLR2RNA発現は単球およびTHP-1では強いが、HUVECでは殆ど見られなかった。TLR4発現はFACS法でも観察され、LPS刺激で亢進した。LPS刺激によりHUVECのEセレクチンmRNA発現は亢進し、抗TLR4mAbにより抑制された。FACSでも同様な成績を確認した。LPS刺激によりHUVECのIL-6遊離は亢進し、抗TLR4mAbにより抑制された。
ADAMに関する研究:ヒトとマウスADAM17(TACE)に対するmAbを作成し、単球での恒常的発現と活性化好中球における出現を明らかにした。ConAとIL-2刺激T細胞やNK細胞における陽性細胞増加、を認めた。ヒトの特発性間質性肺炎の肺胞壁Mφと好中球、慢性関節リウマチ滑膜下MφにADAM17陽性細胞を認めた。マウスP.acnes注射後の肺や肝の肉芽腫内Mφと好中球に発現を認めた。マウスADAM15遺伝子構造を明らかにした。LPSやサイトカイン刺激による遺伝子発現亢進を観察した。正常胸腺T細胞での発現は陰性であるが、ConAとIL-2刺激後CD4^+CD8^+とCD4^+CD8^-細胞に強く発現を認めた。正常組織では、脳の錐体細胞とPurkinje細胞、骨髄の巨核球、myeloid細胞、erythroid細胞、脾臓の巨核球、単核球、腎集合管上皮細胞、副腎網状帯細胞、心筋細胞などでの発現を観察した。マウスADAM8は常在Mφと好中球で発現し、LPS刺激で増加を観察した。2種の新ADAMcDNAを検出した。89-2-2はzinc-binding siteのコンセンサス配列を持ち、プロテアーゼの可能性が示唆された。
オステオポンチンの研究:ホモザイゴートTMを作成し、現在免疫および炎症反応を解析中。

研究成果

• [文献書誌] Tamura,Y.他: "CD14 transgenic mice expressing membrane and soluble forms"Int.Immunol.. 11(3). 333-339 (1999)
• [文献書誌] Hisaka,H.他: "Close localization of mouse CD14 and CD32/16 in the cell surface"Pathobiology. 67(2). 92-97 (1999)
• [文献書誌] Yamamoto,S.他: "ADAM family proteins in immune system"Immunol.Today. 20(5). 278-284 (1999)
• [文献書誌] Ohki,K.他: "Suppressive effects of serum on the LPS-induced production of nitric"Immunol.Cell Biol.. 77(2). 143-152 (1999)
• [文献書誌] Yamamoto,T.他: "Expression of scavenger receptor class A and CD14 in lipopoly-"Pathol.Int.. 49(11). 983-992 (1999)
• [文献書誌] 山本俊輔: "エンドトキシンショック"病理と臨床(臨時増刊号). 17. 320 (1999)
• [文献書誌] 山本俊輔: "自然免疫鳥瞰-一次防御、および獲得免疫の支持と利用"Molecular Medicine. 36(5). 468-474 (1999)
• [文献書誌] 山本俊輔: "LPS臓器障害とマクロファージ"病理と臨床. 169,(). 1100-1111 (1999)
• [文献書誌] Yoshiyama,K.他: "CD156(human ADAM8):expression,primary amino acid sequence,and"Genomics.. 41(1). 56-62 (1997)
• [文献書誌] Takai,N.他: "Primary structure of rat CD14 and characteristics of rat CD14,cytokine"J.Leuko.Biol.. 61(6). 736-744 (1997)
• [文献書誌] Shinji,H.他: "Lipopolysaccharide-induced biphasic inositol 1,4,5-triphosphate"J.Immunol.. 158(2). 1370-1376 (1997)
• [文献書誌] Kataoka,M.他: "Structure of the murine CD156 gene,characterization of its promoter"J.Biol.Chem.. 272(29). 18209-18215 (1997)
• [文献書誌] Shinji,H.他: "Lipopolysaccharide-induced biphasic inositol 1.4,5-triphosphate"J.Immunol.. 158(2). 1370-1376 (1996)
• [文献書誌] Onozuka,K.他: "Participation of CD14 in the phagocytosis of smooth-type Salmonella"Microbiol.Immunol.. 41(10). 765-772 (1997)
• [文献書誌] Kirikae T.他: "Rhodobacter spheroides diphosphoryl lipid A inhibits interleukin-6"J.Endotox.Res.. 4(2). 115-122 (1997)
• [文献書誌] Morita,H.他: "Difference in clearance of exogenously administered smooth-form LPS"J.Endotox.Res.. 4(6). 415-423 (1997)
• [文献書誌] 樋口安典他: "CD14トランスジェニックマウス"臨床免疫. 29(11). 1345-1350 (1997)
• [文献書誌] Haziot,A.他: "Resistance to endotoxin shock and reduced dissemination of Gram-"Immunity. 4(4). 407-414 (1996)
• [文献書誌] Shinji,H.他: "Lipopolysaccharide-induced biphasic inositol 1.4,5-triphosphate response"J.Immunol.. 158(2). 1370-1376 (1996)
• [文献書誌] Onozuka,K.他: "Participation of CD14 in the phagocytosis of smooth-type Sal,onella"Microbiol.Immunol.. 41(10). 765-772 (1997)
• [文献書誌] Kirikae T.他: "Rhodobacter spheroides diphosphoryl lipid A inhibits interleukin-6"J.Endotox.Res.. 4(2). 115-122 (1997)
• [文献書誌] Morita,H.他: "Difference in clearance of exogenously administered smooth-form LPS"J.Endotox.Res.. 4(6). 415-423 (1997)
• [文献書誌] 樋口安典他: "CD14トランスジェニックマウス"臨床免疫. 29(11). 1345-1350 (1997)
• [文献書誌] Haziot,A.他: "Resistance to endotoxin shock and reduced dissemination of Gram-negative"Immunity. 4(4). 407-414 (1996)
• [文献書誌] 山本俊輔: "自然免疫鳥瞰 一 一次防御、および獲得免疫の支持と利用"Molecular Medicine. 36(5). 468-474 (1999)
• [文献書誌] 山本俊輔: "LPS臓器障害とマクロファージ"病理と臨床. 169,(). 1100-1111 (1999)
• [文献書誌] Yoshiyama,K.他: "CD156(human ADAM8):expression,primary amino acid sequence,and"Genomics.. 41(1). 56-62 (1997)
• [文献書誌] Takai,N.他: "Primary structure of rat CD14 and characteristics of rat CD14,cytokine"J.Leuko.Biol.. 61(6). 736-744 (1997)
• [文献書誌] Shinji,H.他: "Lipopolysaccharide-induced biphasic inositol 1,4,5-triphosphate response"J.Immunol.. 158(2). 1370-1376 (1997)
• [文献書誌] Kataoka,M他: "Structure of the mrine CD156 gene,characterization of its promoter"J.Biol.Chem.. 272(29). 18209-18215 (1997)
• [文献書誌] 山本俊輔他: "CD156(ADAM8)の構造、機能およびファミリー"Molecular Medicine34(臨時増刊号)免疫1997-98. 148-162 (1997)
• [文献書誌] Matsuura,K.他: "Involvement of CD14 in LPS-induced liver"Wiley-Liss(in press). (1999)
• [文献書誌] Yammoto,S.他: "Roles of CD14 in LPS signaling and scavenging:studies using CD14-"Wiley-Liss. 8 (1998)
• [文献書誌] Higuchi,Y.: "CD156(ADAM8) workshop panel report.Leukocyte Typing VI.."Garland Publ Inc. 3 (1998)
• [文献書誌] Kataoka,M.: "Generation and analysis of CD14-transgenic mice.Leukocyte Typing VI."Garland Publ Inc. 2 (1998)
• [文献書誌] Takai,N.他: "Structure of rat CD14,and expression of rat CD14 and cytokines"Oxford Univ Press. 3 (1998)
• [文献書誌] Kataoka,M他: "Generation and analysis of CD14-transgenic mice"Oxford Univ Press. 2 (1998)
• [文献書誌] Takai,N.他: "Structure of rat CD14,and expression of rat CD14 and cytokines"Oxford Univ Press. 3 (1998)
• [文献書誌] Kataoka,M他: "Generation and analysis of CD14-transgenic mice."Oxford Univ Press. 2 (1998)
• [文献書誌] Higuchi,Y.: "CD156(ADAM8) workshop panel report.Leukocyte Typing VI..1"Garland Publ Inc. 3 (1998)
• [文献書誌] Kataoka,M.: "Generation and analysis of CD14-transgenic mice.Leukocyte Typing VI."Garland Publ Inc. 2 (1998)
• [文献書誌] 片岡晶志: "エンドキシン感受性亢進および低下マウス"菜根出版. 12 (1998)